Кръв за HSV 1 и 2. Нека да поговорим за тестовете за херпес: какви са те и как да дешифрираме резултатите им. Полимеразна верижна реакция

Провежда се тест за херпес, за да се идентифицира този вирус в клинични прояви или когато се подозира, че инфекцията живее в тялото от дълго време. С помощта на тестове можете да разберете дали човек е имал преди това херпес или дали вирусът е активен в момента и да предложите колко дълго е заболяването. Методът на полимеразна верижна реакция (PCR) ви позволява да откриете генетичния код на инфекцията в различни биологични материали - в серум, цяла кръв, слюнка, урина, върху лигавицата на орофаринкса, върху гениталиите и др. Откриването на РНК ни позволява да преценим активния процес. Лабораторните изследвания са важни за диференциалната диагноза и определянето на тактиката на лечение.

Мащаб на проблема

Основният проблем е, че няма лечение за много видове херпесни инфекции. Хората се разболяват от години, без да знаят. По това време заболяването не се проявява клинично, но засяга клетките на органите и лигавиците и отслабва имунната система. На медицински семинари учените представят теорията, че пациентите, които страдат от херпесни вируси дълго време, са по-податливи на рак. За бременните жени е опасно да се заразят с HSV (тип 1 и 2) или (тип 5). Ако вирусът проникне през плацентарната бариера, плодът може да умре или да се роди с тежки патологии.

Кога е необходимо да се изследвате за HSV?

Тестовете за херпесния вирус се вземат в редица случаи:

• В случай на треска с неизвестен произход, за да се определи причината, особено при субфебрилна температура.
• По време на ранна бременност и преди раждане.
• При отклонения в общия кръвен тест (повишена СУЕ, левкоцитоза, промени в левкоцитната формула).
• За диагностициране на рецидив на заболяването.
• При имунодефицитни състояния.
• При обриви по кожата и лигавиците от неалергичен произход.
• Жени със сърбеж и обилно вагинално течение, когато не са потвърдени други полово предавани инфекции.

HSV при възрастни най-често се проявява под формата на рани по устните или носната лигавица и се диагностицира от лекар с прост преглед. Около 30% от заразените са асимптоматични. Поради това се препоръчва да се изследват за антитела срещу различни видове херпесни вируси във всеки случай, дори когато няма специфични показания.

Признаци на херпес

Семейството на херпес включва десетки видове: херпес симплекс вирус 1 и 2 (HSV), цитомегаловирусна инфекция (CMVI или тип 5), вирус на Epstein-Barr (EBV или тип 4), трети тип, който причинява варицела и херпес зостер и и т.н.

При децата заболяванията, причинени от херпес, имат изразена картина. Когато EBV е заразен, се развива инфекциозна мононуклеоза. В същото време цервикалните или други лимфни възли се увеличават, телесната температура се повишава до 40 градуса, а в клиничния кръвен тест се откриват атипични мононуклеарни клетки. При CMV най-често се засягат орофаринкса, отделителната система и черния дроб. В черния дроб може да се образува киста, която е трудна за лечение.

При всеки пациент инфекцията протича различно в зависимост от силата на имунната система, наличието на придружаващи хронични заболявания и възрастта. Има няколко признака на активен ход на персистираща (продължителна) инфекция или първична инфекция:

• Температурата се повишава до различни числа. Някои пациенти носят вируса с ниска температура, докато при други тя се повишава до много високи нива.
• Наличието на мехури по устните на пациента, които бързо се покриват с кора, е характерно за HSV 1.
• Обривите по гениталиите най-често се свързват с HSV-2 или CMV.
• Увеличаването на един или повече лимфни възли е характерно за EBV.
• Цитомегаловирусната инфекция може да възникне при чести екзацербации на цистит, пиелонефрит, конюнктивит, тъй като засяга епителната тъкан.

Колкото по-силна е имунната система, толкова по-бързо преминават клиничните прояви. Децата боледуват по-често и по-тежко, тъй като техният нестабилен имунитет не е в състояние бързо да неутрализира вируса и да го постави в „спящо“ състояние.

Вируси тип 1, 2 и 5 могат да се предават от майка на дете по време на бременност. В този случай новородените имат единични пъпки или множество обриви по тялото си, наблюдават се аномалии в нервната система. В тежки случаи лезията води до вътрематочна смърт.

За да се предпише своевременно лечение на майката и детето, е необходимо периодично да се подлагат на тестове за откриване на антитела.

Тестове за херпесен вирус при бременни жени

При регистрация за бременност лекарят предписва серия от тестове на жената. Сред тях са необходими тестове за TORCH инфекции. Това е група от заболявания, които радикално засягат хода на бременността и развитието на плода. Скринингът за TORCH инфекции включва тестове за херпес. Оптимално е и двамата съпрузи да направят тези тестове по време на планирането на бременността.

Какъв тест да вземете за херпес:

• Имуноглобулини M и G по отношение на HSV 1, 2 и CMV.
• Ако Ig M е положителен, е необходимо да се подложи на PCR тест за херпес симплекс и цитомегаловирус. Информативна биологична среда за изследване е кръвният серум.
• Ако имате анамнеза за EBV, херпес тип 6 или 8, е необходимо да се следи титърът на антителата към тези вируси.
• Ако една жена е болна от генитален херпес, тогава се препоръчва кръвен тест за Ig M и G за HSV2. Също така се прави изстъргване от лигавицата на гениталните органи за изследване чрез PCR метод за откриване на генния код на HSV-2.

Ако първоначалният тест даде положителен резултат за антитела срещу вирус от всякакъв тип, по-нататъшните диагностични тактики се определят от имунолог или специалист по инфекциозни заболявания. Окончателната диагноза се поставя след цялостен преглед.

Видове тестове за херпес

Какви тестове се вземат за генитален херпес:

1. Кръвен тест за Ig M при съмнение за скорошна инфекция или за Ig G при диагностициране на хронична инфекция. По-информативно е да се направи обобщен тест за двата вида антитела. Тези тестове разкриват имунен отговор на инфекция, тоест „следа“ от болестта.
2. Кръвен тест за авидност за генитален HSV-2 ви позволява да предвидите вероятността от инфекция с вируса преди месец или по-рано.
3. PCR анализът на намазка от урогениталния тракт показва наличието или отсъствието на HSV по време на изследването, т.е. той се оценява в реално време.
4. Методът RIF изследва блясъка, произведен от херпесния вирус.

В различни ситуации лекарят ще ви насочи за кръвен тест или цитонамазка. Тактиката на изследване за генитален херпес се определя от гинеколог или специалист по инфекциозни заболявания.

Кръвен тест за PCR

PCR означава полимеразна верижна реакция. Тази техника на молекулярна биология има за цел да идентифицира ДНК или РНК на патогена.

За разлика от определянето на антигена на вируса, PCR ви позволява да откриете генния код на самия херпес. Информативността на метода е над 90%.

Използва се за диагностициране на активната фаза на заболяването, тоест когато вирусът се размножава и расте не в клетката, а извън нея и е способен да навреди на тялото.

За откриване на херпес се изследват различни биологични вещества. Лекарят може да предпише PCR тест от всяка лигавица (конюнктива, орофаринкс, горни дихателни пътища, уретра, вагина, цервикален канал и др.), серум или цяла кръв. Ако е необходимо, лабораториите могат да използват PCR за изследване на цереброспиналната течност (CSF) и други биоматериали, получени по време на хирургична пункция на орган.

Заключението от анализа може да бъде качествено (открито / неоткрито) или количествено, т.е. колко копия се намират в конвенционална единица биоматериал. Лекарят се нуждае от количествен резултат, за да избере подходящата доза от лекарството.

Свързан имуносорбентен анализ

Ензимно-свързаният имуносорбентен анализ (ELISA) се основава на специфична реакция антиген-антитяло. Методът открива различни нискомолекулни съединения, които се образуват в организма в отговор на инфекция. Намерената специфична молекула се нарича антитяло и е част от имуноглобулина, произведен по време на херпесна инфекция.

През първите 2 седмици се образуват Ig А или М. Престоят им в кръвта е около 1-2 месеца. Постепенно те се заменят с Ig G, който обикновено се диагностицира от втория месец на заболяването. Техният титър се увеличава с дългосрочен рецидивиращ херпес. Продължителността на живота на антителата е приблизителна и зависи от имунната система на индивида.

Анализът се извършва от кръвен серум. Първо се взема венозна кръв от пациента, утаява се и се върти в центрофуга.

При генитален херпес се предписва ELISA за Ig M и G за HSV-1 и 2. Лекарят използва този метод за диагностициране на херпесна инфекция, за да определи първичната инфекция и хроничния ход. Чрез намаляване на количеството имуноглобулини специалистът може да прецени успешното лечение. При рецидив на заболяването титърът на антителата се повишава.

RIF (имунофлуоресцентна реакция)

Това е бърз метод за откриване на антиген или антитела. Анализът се основава на способността на специфичен серум да свети в ултравиолетова светлина, когато се комбинира с вирус. Информативността на метода е под 50%. Това е остарял диагностичен метод, който се използва изключително рядко в съвременната медицина.

Ако херпесът се появи на устните, тогава слюнката може да се използва за бърза първоначална диагноза. С помощта на метода RIF може да се открие флуоресцентно сияние, когато към слюнката се добави специален реагент за откриване на HSV-1. За да се направи окончателна диагноза, е необходимо да се открие херпес в тялото с помощта на PCR.

Други методи за диагностициране на херпес

Когато пациентът е диагностициран с HSV, инфекциозна мононуклеоза или цитомегаловирус, е необходимо периодично да се подлага на тестове, за да се оцени динамиката на курса.

Ако е необходимо да се установи преди колко време е настъпила инфекцията, лекарят предписва тест за авидност на херпес. Авидността може да се определи за HSV 1, 2, EBV или CMV.

Как да се изследваме за херпес: подготовка и събиране на материал

Вземете кръвен тест за херпес сутрин на празен стомах. Позволено е да се вземе кръв през деня 4 часа след ядене на лека храна.

Намазка за херпес в интимната област се дава при следните условия:

• предния ден не можете да бъдете сексуално активни;
• жените не трябва да се душят, допустимо е само измиване на външните гениталии без сапун;
• При вземане на намазка от уретрата не трябва да има уриниране 2-3 часа преди вземането на биоматериала.

Декодиране на резултатите

След като вирусът навлезе в тялото, имунната система го разпознава и започва да се бори. В същото време се произвеждат защитни антитела срещу вируса - имуноглобулини, съкратено Ig. По наличието на тези имуноглобулини в кръвта лекарят преценява дали пациентът е заразен с един или друг херпесен вирус.

Първо се появяват имуноглобулини от клас Ig M, средната продължителност на тяхната циркулация в кръвта е от 2 седмици до 2 месеца. Произведените антитела срещу вируса на херпес тип 4 продължават по-дълго. Ако анализът покаже наличието на Ig M, това означава, че вирусът е бил заразен наскоро или е активиран хроничен херпес.

След това се произвежда Ig G. Те започват да се записват в кръвта месец след въвеждането на вируса и понякога присъстват през целия живот, което показва хроничен ход на заболяването.

Какво да направите, ако се открие херпес в тялото

Положителните тестове за херпес показват наличието на това заболяване. Необходимо е да се наблюдава от имунолог, който ще избере тактика на лечение. Поне веднъж годишно трябва да се провежда превантивен курс на лечение по време на неактивната фаза.

Колко струва преглед в диагностични центрове в Москва?

Цялостен преглед за Ig клас M и G за един тип вирус струва приблизително 1200-1600 рубли. PCR диагностиката на един вид херпес от определено място варира в ценовите листи на московските лаборатории от 250 до 400 рубли.

Колко време отнема изследването?

Диагнозата с помощта на метода ELISA е много бърза. Това изследване се провежда на анализатори и отнема 20-40 минути. Методът PCR и RIF изисква определена подготовка на биоматериала, така че анализите приключват след няколко часа.

Херпесът е едно от най-често срещаните вирусни заболявания на планетата. Според статистиката поне 90% от населението е носител на този вирус. Клиничните признаци за различните видове херпес са различни, заболяването може да се прояви върху кожата и лигавиците. Типове 1 и 2 и декодирането на данни е начин за идентифициране на патогена, определяне на неговия тип и избор на подходящ режим на лечение.

Какво е патоген?

Инфекцията може да възникне по един от следните начини:

• контакт (включително при използване на общи битови предмети и лична хигиена);
• във въздуха;
• сексуален;
• вертикална (от майка на дете по време на бременност и по време на раждане).

След като влезе в тялото, вирусът може да не се прояви клинично дълго време. Човешката имунна система държи патогенната популация под контрол и тя не е в състояние да се възпроизвежда. Първите симптоми се появяват, когато нивото на имунната защита намалява, включително сезонни имунодефицити. Следователно херпесът често придружава други вирусни и бактериални заболявания, гъбични инфекции.

Пациентът може да не знае, че е носител на вируса, но въпреки това да зарази другите.

Херпес вирус тип 1

Най-често заболяването се локализира върху кожата на лицето и тялото и се проявява със следните симптоми:

• зачервяване на кожата на мястото на активиране на вируса;
• появата на малък обрив (мехурите се отварят сами и на тяхно място се образуват язви);
• сърбеж и подуване.

Заболяването се проявява локално, но някои пациенти се оплакват и от треска, втрисане, слабост и болки в мускулите. По време на рецидив на херпес пациентът е най-опасен за другите, тъй като патогенът е в съдържанието на везикулите.

Херпес вирус тип 2

Херпесът от втори тип се класифицира като болест, предавана по полов път. Освен това има контактни, битови и вертикални пътища на предаване. Клинично заболяването се проявява като обрив по гениталиите и кожата на бедрата. Тестовете за херпесвирус са задължителни по време на бременност. Вирусът е опасен за плода: съществува риск от развитие на патологии, както и инфекция на бебето по време на раждане.

В какви случаи трябва да се свържете с лабораторията?

По време на рецидив на заболяването херпес вирус тип 1 и 2 може да се определи чрез прост преглед. Характерен сърбящ обрив, който има специфична локализация, е единственият признак, който ще бъде основа за диагноза. Освен това мехурчетата често се появяват на едно и също място, от една и съща страна.

Необходимо е да дарите кръв в лаборатория за анализ само в няколко случая:

1. ако херпесът се проявява нестандартно, в изтрита форма или с усложнения;
2. по време на планиране на бременността;
3. ако трябва да разберете продължителността на инфекцията (например по време на бременност, за да оцените потенциалния риск за плода).

Обривът може да е признак на голям брой заболявания от инфекциозен и неинфекциозен произход. С помощта на кръвен тест можете да определите вида на вируса, да потвърдите диагнозата и да предпишете необходимото лечение.

Методи за определяне на херпесния вирус в кръвта

Има няколко техники за откриване. Те са ефективни в спорни ситуации, както и в случаите, когато заболяването протича безсимптомно. По време на рецидив можете също да изследвате съдържанието на мехури, кожни изстъргвания или петна от лигавиците. Лекуващият лекар ще определи какви изследвания трябва да бъдат взети въз основа на възможностите на лабораторията и финансовото състояние на пациента.

Има няколко стандартни правила, които ще ви позволят да получите най-точния резултат. Тестовете се вземат на празен стомах. Най-често кръвта се взема сутрин, от 8 до 10 часа. Предния ден не трябва да ядете мазни храни и алкохол. Резултатите от тестовете също могат да бъдат повлияни от стрес или друг емоционален стрес.

Тестването за херпес тип 1 и 2 най-често се извършва по два метода - PCR (полимеразна верижна реакция) и ELISA (ензимно-свързан имуносорбентен анализ). Могат да се използват и други методи в зависимост от оборудването на лабораторията и нейните технически възможности.

Полимеразна верижна реакция (PCR)

PCR е чувствителна реакция, която ви позволява да откриете ДНК на вирусни клетки в материала, който се тества. Същността на метода е, че определен ген се копира многократно, в резултат на което може да се идентифицира наличието и вида на патогена. Важно е, че реакцията няма да настъпи, ако ДНК, която се тества, не е в материала.

Полимеразната верижна реакция дава възможност за откриване на вируса веднага след инфекцията, много преди заболяването да започне да се проявява клинично. Предписва се и в случаите, когато е необходимо да се определи конкретният тип вирус, а не само неговото наличие.

Лабораторията предоставя формуляри с индикатори, които лесно можете да дешифрирате сами. резултатът показва наличието на вируса в кръвта, отрицателният резултат показва липсата му. Това е най-надеждният и чувствителен анализ, който открива и най-малката концентрация на патогена. Полимеразната верижна реакция дава един от най-надеждните резултати, поради което се счита за скъпа. Формулярите съдържат и информация за вида на херпеса.

Ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA)

ELISA е реакция, която се основава на изолирането на комплекса антиген-антитяло. Херпесният вирус тип 1 или 2 е антиген за тялото (чуждо вещество), в отговор на което имунната система отделя специални протеини - антитела (имуноглобулини или Ig).

Антителата се транспортират в кръвта през тялото до мястото на заболяването и там започват да се борят с инфекцията. Има няколко основни класа имуноглобулини, които могат да бъдат открити по време на тест за херпес:

• IgM са първите антитела, които се образуват в тялото на пациента. Те могат да бъдат намерени в кръвта на пациента в рамките на 2 седмици от момента на заразяването. В допълнение, тези протеини се появяват по време на пробуждането на вируса при хроничен херпес.
• IgG са антитела, въз основа на които можем да говорим за хронична инфекция, която е в тялото на пациента от дълго време. Броят на имуноглобулините от този клас рязко се увеличава при следващия рецидив на херпес.
• IgG към ранните протеини на херпесния вирус са протеини на антитела, които се появяват в кръвта след IgM и също показват наличието на заболяването в остра или хронична форма.
• Те също така оценяват такъв показател като. Той характеризира способността на този имуноглобулин да се свързва с вируса и да образува комплекс антиген-антитяло. В началото на заболяването този показател е слабо изразен, но по време на активната фаза на заболяването рязко се увеличава.

Резултатите се интерпретират от лекар. Всяка лаборатория има свои нормални показатели. Пациентът получава формуляр, в който се посочват неговите стойности на антителата, както и тези, от които да се базира. Ако количеството на имуноглобулините е под нормата, резултатът е отрицателен, ако е по-висок, резултатът е положителен.

Тестовете за авидност на IgG се дешифрират отделно. Възможните резултати са представени в таблицата:

Резултатите от тестовете може да варират в различните лаборатории. Те зависят от оборудването и други фактори, но като цяло са надеждни.

Имунофлуоресцентна реакция (RIF)

RIF е друг начин за откриване на вирус в изследвания материал, включително кръв. Тази реакция показва най-точен резултат, ако концентрацията на патогена е висока. Същността на метода се свежда до добавяне на специални багрила с антитела към субстрата (кръв) и последващото му микроскопиране. Ако вирусът присъства, той реагира химически с антителата и свети под микроскопа.

Дешифрирането на кръвен тест за херпес от RIF е резултатите от микроскопията. Характерният блясък показва наличието на патоген. Точността на данните ще бъде повлияна не само от количеството на херпесния вирус, но и от наличието на друга инфекция в кръвта. Ако е там във висока концентрация, можете да получите фалшив положителен резултат.

Този метод се състои в изолиране на вируса от тестовия материал и заразяване на биологични обекти (клетъчни култури, пилешки ембриони) в лабораторни условия. Методът отнема много време и не се използва в нормални ситуации. Най-често се използва за научни изследвания. За да се извърши, е необходима специално оборудвана вирусологична лаборатория, която да изолира патогена в помещението и да предотврати разпространението му.

Заключение

Вирусът на херпес симплекс (HSV) е ДНК вирус Херпес симплекс вируссемейства Herpesviridaeподсемейства Alphaherpesvirinae. Според статистиката на СЗО инфекциите, причинени от HSV, са на второ място сред вирусните заболявания при хората. Има два серотипа на HSV – HSV-1 и HSV-2. И двата типа вируси причиняват човешки инфекциозни заболявания с различна тежест от характерни везикулозни или пустуларни обриви по кожата и лигавиците до лезии на централната нервна система. HSV-1 е причината за офталмохерпес, който протича под формата на кератит или кератоиридоциклит, по-рядко увеит, а в отделни случаи - ретинит, блефароконюнктивит. Заболяването може да доведе до помътняване на роговицата и вторична глаукома. HSV-1 е основната причина за енцефалит при възрастното население на страните с умерен климат, като само 6–10% от пациентите получават едновременно кожни лезии.

По време на епидемиологичните проучвания наличието на специфични антитела срещу HSV е установено при 90-95% от изследваните лица сред възрастното население, докато първичната инфекция се проявява явно само при 20-30% от заразените.

HSV се характеризира с кратък цикъл на възпроизвеждане в клетъчни култури и има силен цитопатичен ефект. Той е способен да се възпроизвежда в различни видове клетки, най-често персистира в централната нервна система, главно в ганглиите, поддържайки латентна инфекция с възможност за периодично реактивиране. Най-често причинява мукокутанни форми на заболяването, както и увреждане на централната нервна система и очите. Геномът на HSV може да се интегрира с гените на други вируси (включително ХИВ), предизвиквайки тяхното активиране, възможно е също да стане активен по време на развитието на други вирусни и бактериални инфекции.

Пътища на предаване на HSV: въздушно-капков, сексуален, битов контакт, вертикален, парентерален. Факторите на предаване на HSV включват кръв, слюнка, урина, везикуларен и вагинален секрет и сперма. Входните врати са повредени лигавици и кожа. Вирусът се придвижва по периферните нерви до ганглиите, където персистира цял живот. Когато се активира, HSV се разпространява по нерва до първоначалната лезия (механизмът на „затворения цикъл“ е цикличната миграция на вируса между ганглия и повърхността на кожата). Възможна е лимфогенна и хематогенна дисеминация на патогена, което е особено характерно за недоносени новородени и лица с тежък имунен дефицит (включително HIV инфекция). HSV се намира в лимфоцити, еритроцити, тромбоцити; когато вирусът проникне в тъкани и органи, те могат да бъдат увредени поради неговия цитопатичен ефект. Вирусонеутрализиращите антитела, които се запазват през целия живот на човека (дори във високи титри), въпреки че предотвратяват разпространението на инфекцията, не предотвратяват рецидивите.

Освобождаването на HSV продължава значително време при първична инфекция (ДНК се открива в кръвната плазма за 4-6 седмици), а при рецидиви - не повече от 10 дни. Образуването на антихерпетичен имунитет възниква както по време на явна, така и при асимптоматична инфекция. При първия контакт на антигена с клетките на имунната система се формира първичен имунен отговор в рамките на 14-28 дни, който при имунокомпетентни индивиди се проявява чрез образуването на интерферони, производството на специфични антитела (първоначално - IgM, впоследствие - IgA и IgG), повишена активност на естествените клетки убийци - NK клетки и образуването на мощен пул от високоспециализирани убийци. В случай на реактивиране или повторно заразяване възниква повторен контакт на клетките на имунната система с Ag и се образуват AT и T-убийци. Реактивирането е придружено от производството на IgM AT (рядко, дори при наличие на типични обриви), IgA AT (по-често) и IgG.

HSV (главно HSV-2) причинява генитален херпес, хронично, рецидивиращо заболяване. Клиничните прояви на първичния епизод на инфекция, причинена от различни видове вируси, са подобни, но инфекцията, причинена от HSV-2, е много по-рецидивираща по природа. Предаването на вируса става чрез сексуален контакт, източникът на инфекция е локализиран върху лигавицата и кожата на гениталните органи и перигениталната област. Възпроизвеждането на вируса в епителните клетки води до образуване на фокус от групирани везикули (папули, везикули), които съдържат вирусни частици, придружени от зачервяване и сърбеж. Първоначалният епизод е по-остър (обикновено със симптоми на интоксикация), отколкото последващите рецидиви. Често се появяват симптоми на дизурия и признаци на ерозия на шийката на матката.

В ранните стадии на HIV инфекцията протичането на заболяването, причинено от HSV-1 или HSV-2, е кратко и типично. Чест признак на задълбочаване на имуносупресията и прехода на латентния стадий на HIV инфекцията към стадия на вторични заболявания е развитието на херпес зостер. Наличието на персистиращи дълбоки вирусни кожни лезии, повторен или дисеминиран херпес зостер, локализиран сарком на Капоши са някои от клиничните критерии за стадия на вторичните заболявания на HIV инфекцията. При пациенти с брой CD4+ клетки под 50 клетки/μl няма тенденция за спонтанно заздравяване на ерозивни и язвени дефекти. Честотата на херпетичния енцефалит сред лезиите на ЦНС при HIV инфекция е около 1–3%. При пациенти със СПИН с тежък имунен дефицит заболяването често има нетипичен ход: заболяването започва подостро и бавно прогресира до най-тежките прояви на енцефалит.

Херпетичната инфекция, дори ако е безсимптомна, може да причини редица патологии при бременна жена и новородено. Най-голямата заплаха за репродуктивната функция е гениталния херпес, който в 80% от случаите се причинява от HSV-2 и в 20% от HSV-1. Асимптоматичното заболяване се среща по-често при жените и е по-типично за HSV-2, отколкото за HSV-1. Първичната инфекция или рецидивите по време на бременност са най-опасни за плода, тъй като могат да доведат до спонтанен аборт, смърт на плода, мъртво раждане и дефекти в развитието. Инфекцията на плода и новороденото се наблюдава по-често при асимптоматичен генитален херпес, отколкото при клинично изразен типичен курс. Новороденото може да получи херпесна инфекция в утробата, по време на раждането (в 75-80% от случаите) или постнатално.

HSV-2 може да проникне в маточната кухина през цервикалния канал, засягайки плода в 20-30% от случаите; трансплацентарна инфекция може да възникне в 5-20% от случаите, инфекция по време на раждане в 40% от случаите. Вирусът може да се предава по време на медицински процедури. При типични клинични прояви диагнозата на херпесната инфекция не създава никакви затруднения, докато при атипични форми се проверява въз основа на резултатите от лабораторни тестове и приоритет трябва да бъде изследването, насочено към идентифициране на маркери за текуща (активна) инфекция. Активирането на инфекциозния процес по време на херпесна инфекция, дори при наличие на клинични прояви в острия стадий, рядко се придружава от производството на AT-HSV IgM (по-често при първична инфекция или реинфекция), като правило, появата на AT -HSV IgA се отбелязва.

Диагностичните тестове са подходящи за откриване на HSV или неговите маркери, ако анамнезата на пациента показва рецидивираща инфекция или начало на херпесна инфекция по време на бременност.

Диференциална диагноза.При наличие на инфекциозен синдром (продължителна субфебрилна температура, лимфаденопатия, хепато- или хепатоспленомегалия) - токсоплазмоза, цитомегаловирусна инфекция и инфекция, причинена от EBV; контактен дерматит, инфекциозни заболявания, придружени от везикулозни обриви по кожата и лигавиците (варицела, херпес зостер, пиодермия и др.); ерозивни и язвени лезии на гениталиите, причинени от Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi; Болест на Крон, синдром на Бехчет, фиксирана токсикодермия, менингоенцефалит и менингит с неизвестна етиология, увеит и кератоконюнктивит с неизвестна етиология).

Показания за изследване

• Планиране на бременност;
• жени с анамнеза или по време на лечение на типични херпесни обриви от всякаква локализация, включително рецидивиращ генитален херпес или наличие на везикуларни и / или ерозивни обриви по кожата, задните части, бедрата, мукопурулентен секрет от влагалището;
• сексуален контакт с партньор, който има генитален херпес;
• атипична форма на заболяването: липса на сърбеж или парене, липса на везикули, верукозни възли; обширни кожни лезии (до 10% от случаите на предполагаем херпес зостер са причинени не от VZV, а от HSV);
• жени с обременена акушерска история (перинатални загуби, раждане на дете с вродени малформации);
• бременни жени (предимно тези с ултразвукови признаци на вътрематочна инфекция, лимфаденопатия, треска, хепатит и хепатоспленомегалия с неизвестен произход);
• деца с признаци на вътрематочна инфекция, вродени малформации или наличие на везикули или корички по кожата или лигавиците;
• деца, родени от майки, които са имали генитален херпес по време на бременност;
• пациенти (предимно новородени) със сепсис, хепатит, менингоенцефалит, пневмония, увреждане на очите (увеит, кератит, ретинит, некроза на ретината), стомашно-чревно увреждане.

Материал за изследване

• Съдържание на везикули/везикули от лигавиците и кожата на половите органи на мъже и жени - микроскопски изследвания, културелни изследвания, откриване на хипертония, откриване на ДНК;
• петна (остъргвания) от лигавиците на цервикалния канал, уретрата (при липса на видими мехури или ерозивни и язвени лезии) - откриване на ДНК;
• кръвен серум, CSF (по показания) - откриване на AT.

Етиологичната лабораторна диагностика включвамикроскопско изследване, изолиране и идентифициране на вируса в клетъчна култура, откриване на антигени или ДНК на патогена, определяне на специфични антитела.

Сравнителна характеристика на лабораторните диагностични методи (херпес симплекс вирус - анализ).Сред лабораторните диагностични методи отдавна се счита за „златен стандарт“ изолирането на HSV в клетъчна култура от кръв, CSF, съдържанието на везикуларни или пустуларни обриви и други локуси (назофаринкс, конюнктива, уретра, вагина, цервикален канал). Този метод включва изолиране на вируса по време на инфекция на чувствителни клетъчни култури с биологичен материал, последвано от неговата последваща идентификация. Безспорните предимства на метода включват: способността да се определи активността на инфекцията при наличие на клинични прояви и да се извърши типизиране на вируса, както и да се установи чувствителността към антивирусни лекарства. Въпреки това, продължителността на анализа (1-8 дни), интензивността на труда, високата цена и необходимостта от определени условия за изследване затрудняват използването на този метод за рутинна лабораторна диагностика на заболяването. Чувствителността достига 70-80%, специфичността - 100%.

Материал от повърхността на обрива може да се използва за микроскопски (оцветяване на препарати по Романовски-Гимза) или цитологични (оцветяване на препарати по Tzanck и Papanicolaou) изследвания. Тези процедури имат ниска диагностична специфичност (не позволяват диференциране на HSV от други херпесни вируси) и чувствителност (не повече от 60%) и следователно не могат да се считат за надеждни диагностични методи.

Откриването на HSV антигени в кръвта, CSF, съдържанието на везикулозни или пустуларни обриви и други локуси (назофаринкс, конюнктива, уретра, вагина, цервикален канал) се извършва с помощта на методите RIF и RNIF, като се използват моноклонални или високо пречистени поликлонални антитела. Когато се използва методът ELISA, чувствителността на изследването се увеличава до 95% или повече, специфичността за манифестен херпес варира от 62 до 100%. Въпреки това повечето комплекти реагенти за откриване на HSV антиген чрез ELISA не позволяват диференциране на вирусни серотипове.

Откриването на ДНК на HSV-1 и/или HSV-2 с помощта на PCR в различни биологични материали надхвърля чувствителността на откриването на HSV с помощта на вирусологично изследване. Откриването на HSV в изстъргвания от лигавиците на устната кухина, урогениталния тракт, при изхвърляне на везикуларни изригвания (везикули) и ерозивни и язвени кожни лезии с помощта на PCR е метод на избор. Определянето на количеството HSV ДНК с помощта на PCR в реално време е безспорно полезно, резултатите от изследването могат да се използват както за диагностични цели, така и за оценка на ефективността на лечението.

За откриване на антитела срещу HSV от различни класове IgA, IgG, IgM, общо към HSV антигени от двата вида или специфични за типа се използват методите RNIF или ELISA; за определяне на авидността на IgG антителата се използва методът ELISA. Откриването на IgM антитела като индикатор за активността на процеса е от най-голямо диагностично значение, тяхното откриване може да означава остро заболяване, реинфекция, суперинфекция или реактивация. Въпреки това, в клинично значими случаи, включително с типичния ход на генитален или неонатален херпес, рядко се откриват специфични IgM антитела (в 3-6% от случаите). Определянето на авидността на HSV IgG антителата носи ниско информационно натоварване: реактивирането в клинично значими случаи е придружено от наличието на антитела с висока авидност. Тестът за откриване на AT-HSV IgA е метод на избор заедно с определянето на ДНК или HSV антиген при определяне на активността на инфекциозния процес.

Показания за използване на различни лабораторни тестове.Препоръчително е да се определи AT, за да се потвърди първичната инфекция, както и да се установи диагноза при пациенти с асимптоматичен и атипичен ход на заболяването.

При бременни жени (скрининг) е препоръчително да се проведат изследвания за откриване на AT-HSV IgM, както и за откриване на AT-HSV IgA. При бременни жени с висок инфекциозен риск се препоръчва допълнително определяне на HSV ДНК и антиген в левкоцитна суспензия или в материал от предполагаема лезия.

Ако се подозира вътрематочна инфекция, се препоръчва откриване на вирусна ДНК в кръвта от пъпна връв; при новородени откриване на вирусна ДНК в различни биологични проби (отделяне на везикуларни изригвания (везикули), ерозивни и язвени лезии на кожата и лигавиците, орофаринкс, конюнктива; периферна кръв, CSF, урина и др.), както и определяне на AT-HSV IgM и IgA в кръвта. Като се има предвид високата диагностична стойност на откриването на вирусна ДНК чрез PCR и връзката между смъртността при новородени и виремията, причинена от HSV, някои изследователи препоръчват използването на този метод за лабораторен скрининг на генерализирана херпесна инфекция при деца с висок риск.

Откриването на антиген-HSV в различни биологични проби се предлага да се използва като бързи тестове за разграничаване на типовете вируси при скрининг на популации с високи нива на заболеваемост, както и при наблюдение на заболяването.

При пациенти с HIV инфекция с атипични клинични прояви на кожни лезии при диагностициране се предпочита откриването на HSV ДНК чрез PCR метода като най-чувствителен метод за лабораторна диагностика.

Характеристики на интерпретация на резултатите.Откриването на вирус-специфични IgM антитела може да означава първична инфекция, по-рядко - реактивиране или повторно заразяване; откриване на HSV IgA антитела - активността на инфекциозния процес (продължителен курс в началото на херпесна инфекция, реинфекция или реактивация). Вродена инфекция (неонатален херпес) се показва от наличието на AT-HSV IgM и/или IgA. Откриването на IgG антитела отразява латентна инфекция (инфекция).

Откриването на HSV ДНК показва наличието на активен (репликативен) стадий на вирусна инфекция, като се вземе предвид тежестта на клиничните прояви. Откриването на ДНК на HSV-1 и / или HSV-2 чрез PCR позволява еднократно изследване за установяване на факта на вътрематочна инфекция на плода; При провеждане на изследване през първите 24-48 часа след раждането, лабораторно потвърждение на вродена инфекция, причинена от HSV.

Диагностичната стойност (специфичност и чувствителност) на откриването на HSV ДНК в CSF на пациенти с HIV инфекция с лезии на централната нервна система не е напълно установена. Може би, за да се потвърди херпетичната етиология на енцефалита, е необходимо да се определи концентрацията на HSV ДНК в CSF. Проучването за откриване на HSV ДНК в кръвта не е много информативно поради краткотрайното присъствие на HSV в съдовото легло, следователно е възможно да се получи отрицателен резултат въпреки развитието на клинично значимо заболяване.

Те са едни от най-често срещаните херпесни вируси сред населението на много страни. Според статистиката на СЗО патогенът е в тялото в латентно състояние съответно при 90% и 60% от хората по света. Първият тип вирус причинява везикулозни обриви по устните, кожата на назолабиалния триъгълник и по-рядко върху устната лигавица. Вторият тип вирус води до образуване на везикулозен обрив на шийката на матката, вагиналната лигавица, кожата на външните гениталии и перинеума. След първия контакт с тялото, патогенът прониква в нервните клетки на гръбначните ганглии и е в „спящо“ състояние без вреда за здравето. Нарушаването на имунната система води до активиране на херпесния вирус и тежка инфекция с увреждане на вътрешните органи. За идентифициране на патогена и оценка на тежестта на заболяването се извършва кръвен тест за херпес тип 1 и 2, като лекуващият лекар е отговорен за тълкуването на резултатите от изследването.

Здравата имунна система може да държи вируса под контрол през целия живот на човека. Вирусът е в нервните клетки в неактивно състояние - не се размножава, не нарушава жизнените функции на тялото и не разрушава клетките. Когато имунитетът намалява: физическо пренапрежение, стрес, настинки, менструация, обостряне на хронични заболявания, патогенът придобива патогенни свойства и причинява образуването на херпетичен обрив по устните или гениталиите. Рязкото потискане на защитните сили на организма причинява тежки форми на инфекция с увреждане на вътрешните органи.

Първичната диагноза се извършва въз основа на клиничните признаци, предимно естеството и местоположението на обрива. В повечето случаи заболяването не изисква етиологично лечение или антивирусните лекарства се използват като локална терапия. За да се провери вирусът, в някои случаи се предписва изследване на биологични течности: кръв, урина, храчки, изстъргвания от влагалището и шийката на матката и съдържанието на везикуларни везикули. Необходима е лабораторна диагностика преди предписване на антивирусни лекарства.

Тестовете за херпес най-често се предписват на хора с имунодефицитни състояния (IDS).

Тест за херпесен вирус трябва да се направи в следните случаи:

• идентифициране на причинителя на вирусно заболяване;
• проверка на вида на херпесния вирус;
• избор на антивирусни лекарства;
• планиране на бременност и период на бременност;
• честа екзацербация на инфекцията (повече от 3-4 пъти годишно).

Тестът за херпес обикновено се предписва на пациенти с имунна недостатъчност (предимно ХИВ / СПИН), онкология, тежки хронични заболявания, по време на лъчева и химиотерапия и лечение с имуносупресори. При такива пациенти имунната система е потисната, което може да доведе до тежки форми на херпес, протичащи с увреждане на очите, мозъка и вътрешните органи.

Видове лабораторна диагностика за идентифициране на херпесни вируси

За изследване на биологични течности за наличие на херпесни патогени от първи и втори тип се предписва лабораторна диагностика: (ензимен имуноанализ), PCR (полимеразна верижна реакция), метод на култура. Използването на цялостен преглед повишава ефективността на проверката на вируса на различни етапи от заболяването.

ELISA

Имунологичната диагностика е насочена към идентифициране на специфични протеини в кръвта - имуноглобулини (Ig), които са антитела и се произвеждат от имунната система в отговор на инвазията на вируса в тялото. Синтезират се специфични антитела към определен тип херпесен вирус. Наличието, количеството и вида на имуноглобулините показват причинителя на инфекцията, периода и тежестта на заболяването.

Видове имуноглобулини:

• Ig M - синтезирани от имунокомпетентни клетки в първите дни след първичната инфекция, по време на обостряне на инфекцията, остават в кръвта за 1-2 месеца;
• Ig G - се синтезират 7-14 дни след инфекцията, остават в малки количества в кръвта през целия живот на човека и са показатели за имунологична памет.

Необходима е лабораторна диагностика преди предписване на антивирусни лекарства.

За да се определи етапът на развитие на херпесната инфекция, се дарява кръв за изследване на индекса на авидитет - способността на Ig G да се свързва с херпесния вирус, за да го неутрализира. В началото на заболяването или периода на обостряне индексът на авидитет е нисък и с напредване на инфекцията се увеличава.

Обяснение на резултатите от изследването:

• Ig M – отрицателен, Ig G – отрицателен – тялото не е заразено с херпесвирус;
• Ig M – положителен, Ig G – отрицателен – първична инфекция, ранен период на херпесна инфекция;
• Ig M – положителен, Ig G – положителен, индекс на авидитет – под 50% – първична инфекция в разгара си;
• Ig M – положителен, Ig G – положителен, индекс на авидитет над 60% – обостряне на херпетична инфекция;
• Ig M – отрицателен, Ig G – положителен, индекс на авидитет над 60% – хроничен ход на заболяването или носителство.

Ако кръвните изследвания показват индекс на авидитет от 50-60%, което съответства на съмнителен резултат, тестът се повтаря след 10-14 дни.

ELISA се извършва с помощта на качествени и количествени методи. В първия случай се открива наличието и вида на имуноглобулини към херпес вирус тип 1 и 2, във втория - титърът на антителата, които показват тежестта на заболяването и нивото на имунитет към инфекция.

ELISA се извършва чрез директни и индиректни методи. Директният метод включва въвеждане в тестовия серум на един компонент - белязан антиген, който образува комплекс антиген-антитяло със специфичен имуноглобулин. След добавяне на ензима към серума се появява цвят, чийто интензитет определя концентрацията на комплексите в кръвта. При индиректния метод към серума се добавят два компонента - антиген-антитяло. Специфичен антиген в кръвта е притиснат от антитела от двете страни (метод на сандвич). Този метод е по-чувствителен и точен, което позволява определянето на имуноглобулини в ниски концентрации.

PCR

PCR е лабораторен диагностичен метод, който открива генетичния материал на вируса (ДНК, РНК) в изследваната биологична течност. С помощта на анализа е възможно да се открие минимално количество ДНК/РНК на определен херпесен вирус, така че изследването е високо специфично и информативно. Диагностиката се предписва за установяване на причинителя на заболяването в периода на първична инфекция или обостряне.

Тълкуване на кръвен тест за херпес чрез PCR метод:

• положителен – в биологичната течност е открит генетичен материал на вируса;
• отрицателен – в биологичната течност не е открит генетичен материал на вируса.

PCR изследването се извършва с помощта на качествени и количествени методи. В първия случай се открива наличието на вирусна ДНК, във втория - количеството генетичен материал в биологичната течност, което показва активността и тежестта на инфекцията.

По време на PCR анализ, откритият генетичен материал на вируса се подлага на многократно копиране чрез едноверижна ДНК (праймери) и ензими (ДНК полимераза). След получаване на достатъчно количество генетичен материал резултатите от диагностиката се дешифрират.

Културен метод

Методът на биологичната култура рядко се използва, когато резултатите от имунологичния и PCR анализ са съмнителни. За да се идентифицира причинителя на инфекцията, културата се извършва върху хранителни среди, след което се наблюдава растежът на херпесния вирус. За култивиране на вируса се използват живи клетки от пилешки ембриони. Посяването се извършва върху хорион-алантоисната мембрана, в алантоисната кухина, в жълтъчната торбичка, в амниотичната кухина. Резултатът от анализа се получава след 10-14 дни.

Тълкуване на анализа за херпес чрез културния метод:

• положителен – засяването даде характерни промени в хранителната среда;
• отрицателен – инокулацията не предизвиква характерни промени в хранителната среда.

Можете да дарите биоматериал по всяко време на инфекцията. Дългосрочният растеж на вириони върху хранителни среди не позволява изследването да се използва за бърза диагностика на заболяването.

Подготовка за изпита

Преди да предадете биоматериал за изследване, е необходимо да се подготвите правилно. Кръвният тест се извършва на празен стомах след гладуване в продължение на поне 6-8 часа. Предния ден не трябва да претоварвате диетата си с мазни, пържени, пикантни храни. Препоръчително е да се избягват стресови ситуации и физическа умора. Един час преди събирането на биоматериал се препоръчва да се въздържате от пушене.

Правилната подготовка за тестовете за херпес ще гарантира тяхната максимална надеждност.

Урината (средната част) се събира в чист съд след тоалет на външните полови органи. Храчките се изплюват в стерилен контейнер, преди анализ не яжте и не мийте зъбите си. Изстъргването от вагината и шийката на матката се извършва със стерилна гинекологична шпатула. В деня преди изследването трябва да се въздържате от полов акт, употребата на вагинални супозитории и таблетки и спринцовки. Те вземат тампони след използване на перинеалната тоалетна.

Лабораторната диагностика на херпес тип 1 и 2 не е показана за всички пациенти. Лекарят назначава изследването след интервю и преглед на пациента. Какви изследвания трябва да се вземат, се решава от специалиста в зависимост от клиничната картина, тежестта на заболяването и периода на заболяването.

Още по темата: