Sânge pe vpg 1 și 2. Să vorbim despre testele pentru herpes: ce sunt acestea și cum să le descifrem rezultatele. reacția în lanț a polimerazei

Se efectuează o analiză pentru herpes pentru a depista acest virus în cazul manifestărilor clinice sau dacă se suspectează că infecția trăiește de mult timp în organism. Cu ajutorul testelor, puteți afla dacă o persoană a avut anterior herpes sau virusul este activ în prezent, sugerând durata bolii. Metoda reacției în lanț a polimerazei (PCR) face posibilă detectarea codului genetic al unei infecții în diverse materiale biologice - în ser, în sânge integral, salivă, urină, pe mucoasa orofaringiană, pe organele genitale etc. Detectarea ARN-ului face posibilă aprecierea procesului activ. Testele de laborator sunt importante pentru diagnosticul diferențial, determinând tactica de tratament.

Amploarea problemei

Problema principală este că este imposibil să vă recuperați după multe tipuri de infecție cu herpes. Ani de zile oamenii se îmbolnăvesc fără să știe. În acest moment, boala nu se manifestă clinic, dar afectează celulele organelor și mucoaselor, slăbește sistemul imunitar. La seminariile medicale, oamenii de știință au înaintat teoria potrivit căreia pacienții care sunt bolnavi de virusuri herpetice de multă vreme sunt mai predispuși la cancer. Este periculos să vă îmbolnăviți de HSV (tipurile unu și doi) sau (tipul cinci) pentru femeile însărcinate. Dacă virusul traversează bariera placentară, fătul poate muri sau se poate naște cu patologii severe.

Când să fiți testat pentru HSV

Testele pentru virusul herpes sunt efectuate în mai multe cazuri:

• Cu febră de origine necunoscută, pentru a-i determina cauza, mai ales cu cifre subfebrile.
• În timpul sarcinii timpurii și înainte de naștere.
• Cu abateri ale testului general de sânge (VSH crescut, leucocitoză, modificări ale formulei leucocitelor).
• Pentru diagnosticarea recidivei bolii.
• În stările de imunodeficiență.
• Cu erupții pe piele și mucoase de origine non-alergică.
• Femei cu mâncărime și scurgeri vaginale abundente, când alte infecții sexuale nu sunt confirmate.

HSV la adulți se manifestă adesea sub formă de răni pe buze sau mucoasa nazală, diagnosticate de un medic cu o simplă examinare. Aproximativ 30% dintre persoanele infectate sunt asimptomatice. Prin urmare, se recomandă să fie examinat pentru anticorpi la diferite tipuri de virusuri herpetice în orice caz, chiar și atunci când nu există indicații specifice.

Semne de herpes

Familia herpesului include zeci de tipuri: virusul herpes simplex 1 și 2 (HSV), infecția cu citomegalovirus (CMVI sau tip 5), virusul Epstein-Barr (EBV sau tip 4), tipul trei, care provoacă varicela și zona zoster și etc.

La copii, bolile cauzate de herpes au o imagine pronunțată. Odată cu înfrângerea EBV, se dezvoltă mononucleoza infecțioasă. În același timp, ganglionii cervicali sau alți ganglioni limfatici cresc, temperatura corpului crește la 40 de grade, celulele mononucleare atipice sunt găsite într-un test de sânge clinic. Cu CMVI, orofaringele, sistemul urinar și ficatul sunt mai des afectate. În ficat se poate forma un chist, care este dificil de tratat.

Infecția decurge diferit la fiecare pacient, în funcție de puterea sistemului imunitar, de prezența bolilor cronice concomitente și de vârstă. Există mai multe semne ale unui curs activ al unei infecții persistente (prelungite) sau al infecției primare:

• Creșterea temperaturii la diferite numere. Unii pacienți poartă virusul cu temperatură subfebrilă, la alții se ridică la un număr foarte mare.
• Prezența veziculelor pe buze, care se formează rapid, este caracteristică HSV 1.
• Erupțiile cutanate pe organele genitale sunt asociate mai des cu HSV-2 sau CMVI.
• O creștere a unuia sau mai multor ganglioni limfatici este caracteristică EBV.
• Infecția cu citomegalovirus poate apărea cu exacerbări frecvente ale cistitei, pielonefritei, conjunctivitei, deoarece afectează țesutul epitelial.

Cu cât sistemul imunitar este mai puternic, cu atât trec mai repede manifestările clinice. Copiii se îmbolnăvesc mai des și mai grav, deoarece imunitatea lor instabilă nu este capabilă să neutralizeze rapid virusul și să-l pună într-o stare de „adormit”.

Virușii 1, 2 și 5 se pot transmite în timpul sarcinii de la mamă la copil. În acest caz, nou-născuții au un singur coș sau mai multe erupții pe corp, se observă abateri de la sistemul nervos. În cazurile severe, leziunea duce la moartea fătului.

Pentru a prescrie tratamentul mamei și copilului la timp, este necesar să se efectueze periodic teste pentru detectarea anticorpilor.

Teste pentru virusul herpes la femeile însărcinate

Când se înregistrează pentru sarcină, medicul prescrie femeii o serie de studii. Printre acestea, testele pentru infecțiile TORCH sunt obligatorii. Acest grup de boli, care afectează radical cursul sarcinii și dezvoltarea fătului. Screening-ul pentru infecția TORCH include teste pentru herpes. Este optim să faceți aceste teste în timpul planificării sarcinii pentru ambii soți.

Ce analiză să transmiteți herpesului:

• Imunoglobulinele M și G în raport cu HSV 1, 2 și CMVI.
• Dacă Ig M este pozitivă, este necesar să se efectueze un test PCR pentru herpes simplex și citomegalovirus. Un mediu biologic informativ pentru cercetare este serul de sânge.
• Dacă există antecedente de EBV, herpes tip 6 sau 8, este necesar să se observe titrul de anticorpi împotriva acestor virusuri.
• Dacă o femeie este bolnavă de herpes genital, atunci se recomandă un test de sânge pentru Ig M și G la HSV2. De asemenea, se face o răzuire a mucoasei genitale pentru testarea PCR pentru a detecta codul genei HSV-2.

Cu un rezultat pozitiv la examinarea inițială a anticorpilor împotriva unui virus de orice tip, tacticile suplimentare de diagnosticare sunt determinate de un imunolog sau de un specialist în boli infecțioase. Diagnosticul final se face după o examinare completă.

Tipuri de teste pentru herpes

Ce teste se fac pentru herpesul genital:

1. Sânge pentru Ig M dacă se suspectează o infecție recentă sau pentru Ig G când este diagnosticată o infecție cronică. Este mai informativ să faceți un test total pentru ambele tipuri de anticorpi. Conform acestor analize, este detectat un răspuns imun la infecție, adică o „urmă” a bolii.
2. Un test de sânge pentru aviditatea pentru HSV-2 genital sugerează o fracțiune din probabilitatea de a contracta virusul cu o lună în urmă sau mai devreme.
3. Analiza PCR a unui frotiu din tractul urogenital arată prezența sau absența HSV la momentul studiului, adică este evaluată în timp real.
4. Metoda RIF examinează strălucirea pe care o dă virusul herpes.

În diferite situații, medicul prescrie un test de sânge sau un frotiu. Tactica de examinare pentru herpesul genital este determinată de un ginecolog sau de un specialist în boli infecțioase.

Test de sânge PCR

PCR înseamnă reacția în lanț a polimerazei. Această metodă de biologie moleculară are ca scop identificarea ADN-ului sau ARN-ului agentului patogen.

Spre deosebire de determinarea antigenului virusului, PCR vă permite să detectați codul genei herpesului în sine. Conținutul informațional al metodei este de peste 90%.

Este folosit pentru a diagnostica faza activă a bolii, adică atunci când virusul se înmulțește și crește nu în celulă, ci în afara acesteia și este capabil să dăuneze organismului.

Pentru a detecta herpesul, sunt examinate diferite substanțe biologice. Medicul poate prescrie un test PCR din orice mucoase (conjunctiva, orofaringe, tract respirator superior, uretra, vagin, canal cervical etc.), ser sau sange integral. Dacă este necesar, laboratoarele pot examina LCR (lichidul cefalorahidian) și alte biomateriale obținute în timpul unei puncție chirurgicală de organ prin PCR.

Concluzia analizei poate fi calitativă (detectată/nedetectată) sau cantitativă, adică câte copii se găsesc într-o unitate convențională de biomaterial. Este necesar un rezultat cantitativ pentru ca medicul să aleagă doza adecvată de medicament.

Test imunosorbant legat

Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) se bazează pe o reacție specifică antigen-anticorp. Metoda detectează diferiți compuși cu greutate moleculară mică formați în organism ca răspuns la o infecție. Molecula specifică detectată se numește anticorp și face parte din imunoglobulina produsă în timpul infecției cu herpes.

În primele 2 săptămâni se formează Ig A sau M. Perioada prezenței lor în sânge este de aproximativ 1-2 luni. Treptat, acestea sunt înlocuite cu Ig G, care sunt de obicei diagnosticate din a doua lună de boală. Titrul lor crește odată cu herpesul recurent prelungit. Durata de viață a anticorpilor este aproximativă, în funcție de imunitatea individuală.

Analiza se efectuează din ser de sânge. În primul rând, sângele venos este prelevat de la pacient, acesta este apărat și deșurubat într-o centrifugă.

În cazul herpesului genital, se prescrie un ELISA pentru Ig M și G la HSV-1 și 2. Medicul folosește această metodă de diagnosticare a unei infecții cu herpes pentru a determina infecția primară și cursul cronic. Prin reducerea numărului de imunoglobuline, un specialist poate aprecia un tratament de succes. Odată cu reapariția bolii, titrul de anticorpi crește.

RIF (reacție de imunofluorescență)

Aceasta este o metodă rapidă pentru detectarea antigenului sau a anticorpilor. Analiza se bazează pe capacitatea unui anumit ser de a străluci în lumină ultravioletă atunci când este combinat cu un virus. Conținutul de informații al metodei este mai mic de 50%. Aceasta este o metodă de diagnostic învechită, care este rar folosită în medicina modernă.

Dacă herpesul a apărut pe buze, atunci saliva poate fi utilizată pentru diagnosticul primar rapid. Metoda RIF poate detecta o strălucire fluorescentă atunci când un reactiv special este adăugat în salivă pentru detectarea HSV-1. Pentru a pune un diagnostic final, este necesar să se identifice herpesul în organism prin PCR.

Alte metode de diagnosticare a herpesului

Când un pacient este diagnosticat cu HSV, mononucleoză infecțioasă sau citomegalovirus, este necesar să se efectueze periodic teste pentru a evalua dinamica cursului.

Dacă este necesar, aflați cu cât timp a apărut infecția, medicul prescrie o analiză pentru aviditatea herpesului. Aviditatea poate fi determinată la HSV 1, 2, la EBV sau la CMVI.

Cum se efectuează teste pentru herpes: pregătirea și prelevarea de probe

Faceți un test de sânge pentru herpes dimineața, pe stomacul gol. Se permite să se ia sânge în timpul zilei la 4 ore după ce ai luat o masă ușoară.

Un tampon pentru herpes în zona intimă este administrat în următoarele condiții:

• în ajun nu poți trăi o viață sexuală;
• femeile nu trebuie să facă duș, este permisă doar spălarea organelor genitale externe fără săpun;
• atunci când se frotează din uretră, nu ar trebui să fie urinare cu 2-3 ore înainte de a lua biomaterialul.

Descifrarea rezultatelor

Odată ce virusul intră în organism, sistemul imunitar îl recunoaște și începe să lupte. În același timp, se produc anticorpi de protecție împotriva virusului - imunoglobuline, prescurtate ca Ig. Prin prezența acestor imunoglobuline în sânge, medicul judecă infecția pacientului cu unul sau altul virus herpes.

În primul rând, apar imunoglobulinele din clasa Ig M, durata medie a circulației lor în sânge este de la 2 săptămâni la 2 luni. Dezvoltați pentru virusul herpesului de tip 4, anticorpii durează mai mult. Dacă analiza arată prezența Ig M, atunci infecția cu virusul a fost recentă sau a fost activat herpesul cronic.

Apoi se produce Ig G. Ele încep să se fixeze în sânge la o lună de la introducerea virusului și sunt uneori prezente pe tot parcursul vieții, ceea ce indică o evoluție cronică a bolii.

Ce să faceți dacă herpesul este găsit în organism

Testele pozitive pentru herpes indică prezența acestei boli. Este necesar să fie observat de un imunolog care va selecta tactica de tratament. Un curs profilactic de terapie în faza inactivă ar trebui să aibă loc cel puțin 1 dată pe an.

Cât costă o examinare în centrele de diagnostic din Moscova

O examinare cuprinzătoare pentru clasa M și G de Ig pentru un tip de virus costă aproximativ 1200-1600 de ruble. Diagnosticarea PCR a unui tip de herpes dintr-o anumită localizare variază în listele de prețuri ale laboratoarelor din Moscova de la 250 la 400 de ruble.

Câte cercetări se fac

Diagnosticul prin ELISA este foarte rapid. Acest studiu este efectuat pe analizoare și durează 20-40 de minute. Metoda PCR și RIF necesită o anumită pregătire a biomaterialului, astfel încât analizele se efectuează în câteva ore.

Herpesul este una dintre cele mai frecvente boli virale de pe planetă. Potrivit statisticilor, cel puțin 90% din populație este purtătoare a acestui virus. Semnele clinice diferă pentru diferite tipuri de herpes, boala se poate manifesta pe piele și mucoase. Tipurile 1 și 2 și descifrarea datelor reprezintă o modalitate de a identifica agentul patogen, de a determina tipul acestuia și de a alege regimul de tratament adecvat.

Ce este un agent patogen?

Infecția poate apărea în unul dintre următoarele moduri:

• contact (inclusiv atunci când se utilizează articole de uz casnic și igiena personală);
• în aer;
• sexual;
• verticală (de la mamă la copil în timpul sarcinii și nașterii).

După intrarea în organism, virusul poate să nu se manifeste clinic pentru o lungă perioadă de timp. Sistemul imunitar uman ține sub control populația agentului patogen și nu este capabilă să se înmulțească. Primele simptome apar odată cu scăderea nivelului de protecție imunitară, inclusiv a imunodeficiențelor sezoniere. Prin urmare, herpesul însoțește adesea alte boli virale și bacteriene, infecții fungice.

Poate că pacientul nu știe că este purtător de virus, dar în același timp îi infectează pe alții.

Herpesvirus tip 1

Cel mai adesea, boala este localizată pe pielea feței și a corpului și se manifestă prin următoarele simptome:

• roșeață a pielii la locul de activare a virusului;
• apariția unei mici erupții cutanate (veziculele se deschid singure, iar în locul lor se formează ulcere);
• mâncărime și umflături.

Boala se manifestă local, dar unii pacienți se plâng și de febră, frisoane, slăbiciune și dureri musculare. În perioada de recurență a herpesului, pacientul este cel mai periculos pentru alții, deoarece agentul patogen se află în conținutul veziculelor.

Herpesvirus tip 2

Herpesul de tip 2 este clasificat ca o boală cu transmitere sexuală. În plus, există și căi de transmisie de contact, casnice și verticale. Clinic, boala se manifestă printr-o erupție cutanată pe organele genitale și pe pielea coapselor. Cercetarea asupra herpesvirusului este obligatorie în timpul sarcinii. Virusul este periculos pentru făt: există riscul de a dezvolta patologii, precum și de infectare a copilului în timpul nașterii.

Când trebuie să contactați laboratorul?

În timpul unei recidive a bolii, virusul herpes tip 1 și 2 poate fi determinat printr-o simplă examinare. O erupție cutanată cu mâncărime caracteristică care are o localizare specifică este singurul simptom care va sta la baza unui diagnostic. În plus, bulele apar adesea în același loc, pe aceeași parte.

Este necesar să se doneze sânge la laborator pentru analiză doar în câteva cazuri:

1. dacă herpesul se manifestă nestandard, într-o formă ștearsă sau cu complicații;
2. în timpul planificării sarcinii;
3. dacă trebuie să aflați perioada de infecție (de exemplu, în timpul sarcinii pentru a evalua riscul potențial pentru făt).

O erupție cutanată poate fi un semn al unui număr mare de boli de origine infecțioasă și neinfecțioasă. Conform testului de sânge, puteți determina tipul de virus, puteți verifica diagnosticul și, dacă este necesar, puteți prescrie tratament.

Metode de determinare a virusului herpes în sânge

Există mai multe metode de detectare. Sunt eficiente în situații controversate, precum și în cazurile în care boala este asimptomatică. În timpul unei recidive, se poate examina și conținutul veziculelor, răzuiturilor cutanate sau tampoane ale membranelor mucoase. Medicul curant va stabili ce teste să facă, în funcție de capacitățile laboratorului și de situația financiară a pacientului.

Există mai multe reguli standard care vă vor permite să obțineți cel mai precis rezultat. Testele se fac pe stomacul gol. Cel mai adesea, sângele se recoltează dimineața, de la 8 la 10 ore. În ajun, nu trebuie să mâncați alimente grase și alcool. De asemenea, rezultatul testelor poate fi afectat de stres sau de orice altă suprasolicitare emoțională.

Analiza herpesului tip 1 și 2 este cel mai adesea efectuată prin două metode - PCR (reacție în lanț a polimerazei) și ELISA (imunotest enzimatic). Pot fi utilizate și alte metode, în funcție de echipamentul laboratorului și de capacitățile sale tehnice.

Reacția în lanț a polimerazei (PCR)

PCR este o reacție sensibilă care vă permite să detectați ADN-ul celulelor virale din materialul de testat. Esența metodei este că o anumită genă este copiată în mod repetat, în urma căreia prezența și tipul agentului patogen pot fi detectate. Este important ca reacția să nu aibă loc dacă ADN-ul studiat nu este prezent în material.

Reacția în lanț a polimerazei face posibilă detectarea virusului imediat după infecție, cu mult înainte ca boala să înceapă să se manifeste clinic. De asemenea, este prescris în cazurile în care este necesar să se determine un anumit tip de virus și nu doar prezența acestuia.

Laboratorul oferă formulare cu indicatori care sunt ușor de descifrat pe cont propriu. rezultatul indică prezența virusului în sânge, negativ - absența. Aceasta este cea mai fiabilă și sensibilă analiză care detectează chiar și cea mai mică concentrație de agent patogen. Reacția în lanț a polimerazei dă unul dintre cele mai fiabile rezultate, prin urmare este considerată scumpă. Formularele conțin și informații despre tipul de herpes.

Imunotestul enzimatic (ELISA)

ELISA este o reacție care se bazează pe izolarea unui complex antigen-anticorp. Virusul herpes tip 1 sau 2 este un antigen pentru organism (substanță străină), ca răspuns la care sistemul imunitar eliberează proteine ​​speciale - anticorpi (imunoglobuline sau Ig).

Anticorpii sunt transportați în sânge prin organism până la focarul bolii și acolo încep să lupte împotriva infecției. Există mai multe clase principale de imunoglobuline care pot fi detectate în timpul unui test de herpes:

• IgM sunt primii anticorpi care se formează în corpul pacientului. Ele pot fi găsite în sângele pacientului în decurs de 2 săptămâni de la momentul infecției. În plus, aceste proteine ​​apar în timpul trezirii virusului în herpesul cronic.
• IgG sunt anticorpi, pe baza cărora putem vorbi despre o infecție cronică care se află de mult timp în corpul pacientului. Numărul de imunoglobuline din această clasă crește brusc odată cu următoarea recidivă a herpesului.
• IgG față de proteinele timpurii timpurii ale virusului herpes sunt proteine ​​​​anticorpi care apar în sânge după IgM și indică, de asemenea, prezența bolii într-o formă acută sau cronică.
• Ei evaluează, de asemenea, un astfel de indicator ca. Caracterizează capacitatea acestei imunoglobuline de a se lega de virus și de a forma un complex antigen-anticorp. La începutul bolii, acest indicator este slab exprimat, dar în faza activă a bolii crește brusc.

Medicul va interpreta rezultatele. Fiecare laborator are propriile valori standard. Pacientul primește o formă în care sunt indicate valorile anticorpilor lui, precum și cele din care este necesar să se bazeze. Dacă cantitatea de imunoglobuline este sub normal, rezultatul este negativ; dacă este mai mare, este pozitiv.

Separat, se realizează decodificarea analizelor pentru aviditatea IgG. Rezultatele posibile sunt prezentate în tabel:

Rezultatele testelor pot varia de la laborator la laborator. Acestea depind de echipament și de alți factori, dar, în general, sunt de încredere.

Reacția de imunofluorescență (RIF)

RIF este o altă modalitate de a detecta un virus în materialul de testat, inclusiv în sânge. Această reacție arată cel mai precis rezultat dacă concentrația agentului patogen este mare. Esența metodei este adăugarea de coloranți speciali cu anticorpi la substrat (sânge) și microscopia acestuia ulterioară. Dacă virusul este prezent, acesta reacționează chimic cu anticorpii și strălucește la microscop.

Descifrarea unui test de sânge pentru herpes prin RIF este rezultatul microscopiei. O strălucire caracteristică indică prezența unui agent patogen. Acuratețea datelor va fi afectată nu numai de cantitatea de virus herpes, ci și de prezența unei alte infecții în sânge. Dacă este acolo în concentrație mare, puteți obține un rezultat fals pozitiv.

Această metodă constă în izolarea virusului din materialul de testat și infectarea obiectelor biologice (culturi celulare, embrioni de pui) în laborator. Metoda este consumatoare de timp și nu este utilizată în situații normale. Cel mai adesea este folosit pentru cercetare științifică. Pentru implementarea sa, este necesar un laborator virologic special echipat pentru a izola agentul patogen din cameră și a preveni răspândirea acestuia.

Concluzie

Virusul herpes simplex (HSV) este un virus care conține ADN virusul herpes simplex familii herpesviridae subfamilii Alphaherpesvirinae. Potrivit statisticilor OMS, infecțiile cauzate de HSV sunt a doua ca frecventă printre bolile virale umane. Există două serotipuri de HSV - HSV-1 și HSV-2. Ambele tipuri de virus cauzează boli infecțioase umane de severitate diferită, de la erupții cutanate veziculoase sau pustuloase caracteristice pe piele și mucoase până la leziuni ale SNC. HSV-1 este cauza herpesului oftalmic, care apare sub formă de keratită sau keratoiridociclită, mai rar uveită, în cazuri izolate - retinită, blefaroconjunctivită. Boala poate duce la tulburarea corneei și glaucom secundar. HSV-1 este cauza principală a encefalitei la populația adultă din zonele cu climă temperată, doar 6-10% dintre pacienți prezentând leziuni cutanate simultane.

În cursul studiilor epidemiologice, prezența anticorpilor specifici pentru HSV a fost constatată la 90–95% dintre persoanele examinate din populația adultă, în timp ce infecția primară apare în mod evident doar la 20–30% dintre cei infectați.

HSV se caracterizează printr-un ciclu scurt de reproducere în culturile celulare și are un puternic efect citopatic. Este capabil de reproducere în diferite tipuri de celule, mai des persistă în SNC, în principal în ganglioni, menținând o infecție latentă cu posibilitatea reactivării periodice. Cel mai adesea provoacă forme mucocutanate ale bolii, precum și leziuni ale sistemului nervos central și ale ochilor. Genomul HSV se poate integra cu genele altor virusuri (inclusiv HIV), provocând activarea acestora; este, de asemenea, posibilă trecerea la o stare activă pe fondul dezvoltării altor infecții virale și bacteriene.

Modalități de transmitere a HSV: aerian, sexual, contact-gospodăresc, vertical, parenteral. Factorii de transmitere pentru HSV sunt sângele, saliva, urina, secrețiile veziculare și vaginale și materialul seminal. Porțile de intrare sunt membranele mucoase și pielea deteriorate. Prin nervii periferici, virusul ajunge la ganglioni, unde persistă toată viața. Când HSV este activat, se răspândește de-a lungul nervului până la leziunea inițială (mecanismul „ciclului închis” este migrarea ciclică a virusului între ganglion și suprafața pielii). Poate avea loc diseminarea limfogenă și hematogenă a agentului patogen, ceea ce este tipic în special pentru nou-născuții prematuri și persoanele cu imunodeficiență severă (inclusiv cu infecție cu HIV). HSV se găsește pe limfocite, eritrocite, trombocite; atunci când virusul pătrunde în țesuturi și organe, acestea pot fi deteriorate din cauza efectului său citopatic. Anticorpii de neutralizare a virusului (chiar și la titruri mari) care persistă pe tot parcursul vieții unei persoane, deși previn răspândirea infecției, nu previn recăderile.

Izolarea HSV continuă o perioadă semnificativă în timpul infecției primare (ADN-ul este detectat în plasma sanguină timp de 4-6 săptămâni), cu recăderi - nu mai mult de 10 zile. Formarea imunității antiherpetice are loc atât în ​​cursul manifest, cât și în cursul asimptomatic al infecției. La primul contact al AG cu celulele sistemului imunitar, în decurs de 14-28 de zile, se formează un răspuns imun primar, care la indivizii imunocompetenți se manifestă prin formarea de interferoni, producția de anticorpi specifici (inițial - IgM, mai târziu - IgA și IgG), o creștere a activității ucigașilor naturali - celulele NK și formarea unui grup puternic de ucigași înalt specializati. În cazul reactivării sau reinfectării, are loc contactul repetat al celulelor sistemului imunitar cu AG, se formează AT și T-killers. Reactivarea este însoțită de producerea de anticorpi IgM (rar chiar și în prezența erupțiilor cutanate tipice), anticorpi IgA (mai des) și IgG.

HSV (în primul rând HSV-2) provoacă herpes genital, o boală cronică recidivante. Manifestările clinice ale episodului primar de infecție cauzate de diferite tipuri de virus sunt similare, dar infecția cauzată de HSV-2 este mult mai recurentă. Transmiterea virusului are loc în timpul actului sexual, focarul infecției este localizat pe membrana mucoasă și pielea organelor genitale și a zonei perigenitale. Reproducerea virusului în celulele epiteliale duce la formarea unui focar de vezicule grupate (papule, vezicule), care conțin particule virale, însoțite de roșeață, mâncărime. Episodul inițial este mai acut (de obicei cu simptome de intoxicație) decât recăderile ulterioare. Adesea există simptome de disurie, semne de eroziune a colului uterin.

În stadiile incipiente ale infecției cu HIV, cursul bolii cauzate de HSV-1 sau HSV-2 este scurt și tipic. Un semn frecvent de aprofundare a imunosupresiei și de tranziție a stadiului latent al infecției cu HIV la stadiul de boli secundare este dezvoltarea herpesului zoster. Prezența leziunilor cutanate virale profunde persistente, herpes zoster recurent sau diseminat, sarcomul Kaposi localizat sunt câteva dintre criteriile clinice pentru stadiul infecției secundare cu HIV. Pacienții cu un număr de celule CD4+ mai mic de 50 de celule/µl nu au tendință de auto-vindecare a defectelor erozive și ulcerative. Frecvența encefalitei herpetice în rândul leziunilor SNC în infecția cu HIV este de aproximativ 1-3%. La pacienții cu SIDA cu imunodeficiență profundă, boala decurge adesea atipic: boala începe subacut și progresează lent până la cele mai severe manifestări ale encefalitei.

Infecția herpetică, chiar și cu un curs asimptomatic, poate provoca o serie de patologii la o femeie însărcinată și un nou-născut. Cea mai mare amenințare la adresa funcției de reproducere este herpesul genital, care în 80% din cazuri este cauzat de HSV-2 și în 20% de HSV-1. Cursul asimptomatic apare mai des la femei și este mai tipic pentru HSV-2 decât pentru HSV-1. Infecția primară sau recidivele în timpul sarcinii sunt cele mai periculoase pentru făt, deoarece pot duce la avort spontan, moarte fetală, naștere morta și malformații. Infecția fătului și a nou-născutului este mai des observată cu herpes genital asimptomatic decât cu un curs tipic pronunțat clinic. Un nou-născut poate dobândi o infecție cu herpes in utero, în timpul nașterii (în 75-80% din cazuri) sau postnatal.

HSV-2 poate pătrunde în cavitatea uterină prin canalul cervical, afectând fătul în 20-30% din cazuri; infecția transplacentară poate apărea în 5-20% din cazuri, infecția în timpul nașterii - în 40% din cazuri. Este posibilă transmiterea virusului în timpul procedurilor medicale. Cu manifestări clinice tipice, diagnosticul de infecție cu herpes nu este dificil, în timp ce la formele atipice se verifică pe baza rezultatelor testelor de laborator, în timp ce studiile care vizează identificarea markerilor infecției actuale (active) ar trebui să fie prioritare. Activarea procesului infecțios în timpul infecției herpetice, chiar și în prezența manifestărilor clinice în stadiul acut, este rareori însoțită de producerea de anticorpi HSV IgM (mai des în timpul infecției primare sau reinfectării), de regulă, apariția HSV IgA. se notează anticorpii.

Studiile de diagnosticare sunt adecvate pentru a detecta HSV sau markerii săi dacă istoricul pacientului indică o infecție recurentă sau debutul unei infecții cu herpes în timpul sarcinii.

Diagnostic diferentiat.În prezența unui sindrom infecțios (febră prelungită de grad scăzut, limfadenopatie, hepato- sau hepatosplenomegalie) - toxoplasmoză, infecție cu citomegalovirus și infecție cauzată de EBV; dermatită de contact, boli infecțioase însoțite de erupții veziculoase pe piele și mucoase (varicela, herpes zoster, piodermie etc.); leziuni erozive și ulcerative ale organelor genitale, cauzate de Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi; boala Crohn, sindromul Behcet, toxicodermia fixa, meningoencefalita si meningita de etiologie necunoscuta, uveita si keratoconjunctivita de etiologie necunoscuta).

Indicații pentru examinare

• Planificarea sarcinii;
• femei cu antecedente sau la momentul tratamentului erupții herpetice tipice de orice localizare, inclusiv herpes genital recurent, sau prezența erupțiilor veziculoase și/sau erozive pe piele, fese, coapse, secreții mucopurulente din vagin;
• prezența contactului sexual cu un partener care are herpes genital;
• formă atipică a bolii: fără mâncărime sau arsură, fără vezicule, noduli verucoși; leziuni cutanate extinse (până la 10% din cazurile de herpes zoster suspectat nu sunt cauzate de VZV, ci de HSV);
• femei cu antecedente obstetricale împovărate (pierderi perinatale, nașterea unui copil cu malformații congenitale);
• femeile gravide (în primul rând cele cu semne ecografice de infecție intrauterină, limfadenopatii, febră, hepatită și hepatosplenomegalie de origine necunoscută);
• copii cu semne de infecție intrauterină, malformații congenitale sau prezența veziculelor sau a crustelor pe piele sau mucoase;
• copii născuți din mame care au avut herpes genital în timpul sarcinii;
• pacienți (în primul rând nou-născuți) cu sepsis, hepatită, meningoencefalită, pneumonie, leziuni oculare (uveită, keratită, retinită, necroză retiniană), leziuni ale tractului gastrointestinal.

Material de cercetare

• Conținutul veziculelor / veziculelor din mucoasele și pielea organelor genitale ale bărbaților și femeilor - examen microscopic, studii culturale, detectarea hipertensiunii arteriale, detectarea ADN-ului;
• frotiuri (răzuire) din mucoasele canalului cervical, uretrei (în absența erupțiilor cu bule vizibile sau a leziunilor erozive și ulcerative) - detectarea ADN-ului;
• ser sanguin, LCR (după indicații) - depistarea anticorpilor.

Diagnosticul de laborator etiologic include examinarea microscopică, izolarea și identificarea virusului în cultura celulară, detectarea AG sau ADN-ului patogen, determinarea anticorpilor specifici.

Caracteristici comparative ale metodelor de diagnostic de laborator (virus herpes simplex - analiză). Dintre metodele de diagnosticare de laborator, izolarea HSV în cultura celulară din sânge, LCR, conținutul erupțiilor veziculare sau pustuloase și alți loci (nazofaringe, conjunctivă, uretră, vagin, canal cervical) a fost mult timp considerat „standardul de aur”. ”. Această metodă implică izolarea virusului atunci când este infectat cu culturi celulare sensibile la material biologic, cu identificarea ulterioară a acestuia. Avantajele incontestabile ale metodei includ: capacitatea de a determina activitatea infecției în prezența manifestărilor clinice și tipărirea virusului, precum și stabilirea sensibilității la medicamentele antivirale. Cu toate acestea, durata analizei (1-8 zile), intensitatea muncii, costul ridicat și necesitatea anumitor condiții de cercetare fac dificilă utilizarea acestei metode pentru diagnosticul de rutină de laborator al bolii. Sensibilitatea ajunge la 70-80%, specificitatea - 100%.

Materialul de la suprafața leziunilor poate fi utilizat pentru studii microscopice (colorație Romanovsky–Giemsa) sau citologice (colorație Tzanck și Papanicolaou). Aceste proceduri au specificitate diagnostică scăzută (nu permit diferențierea HSV de alte virusuri herpetice) și sensibilitate (nu mai mult de 60%), prin urmare, nu pot fi considerate metode de diagnostic fiabile.

Identificarea HSV AG în sânge, LCR, conținutul de erupții veziculare sau pustuloase și alți loci (nazofaringe, conjunctivă, uretră, vagin, canal cervical) se realizează prin metodele RIF și RNIF folosind anticorpi monoclonali sau policlonali foarte purificați. Când se utilizează metoda ELISA, sensibilitatea studiului crește la 95% sau mai mult, specificitatea pentru herpesul evident variază de la 62 la 100%. Cu toate acestea, majoritatea truselor de reactivi pentru detectarea antigenului HSV prin ELISA nu permit diferențierea serotipurilor virale.

Detectarea ADN-ului HSV-1 și/sau HSV-2 utilizând PCR în diferite materiale biologice este superioară sensibilității detectării HSV prin testarea virologică. Detectarea HSV în răzuirea din mucoasele cavității bucale, a tractului urogenital, în evacuarea erupțiilor cu bule (vezicule) și a leziunilor cutanate erozive și ulcerative prin PCR este metoda de elecție. Determinarea cantității de ADN HSV prin PCR în timp real este de o valoare incontestabilă; rezultatele studiului pot fi utilizate atât în ​​scop diagnostic, cât și pentru evaluarea eficacității tratamentului.

Pentru a detecta anticorpi la HSV din diferite clase de IgA, IgG, IgM, total la antigene HSV de ambele tipuri sau specifice de tip, sunt utilizate metode RNIF sau ELISA, pentru a determina aviditatea IgG AT, se utilizează metoda ELISA. Detectarea anticorpilor IgM ca indicator al activității procesului are cea mai mare valoare diagnostică; detectarea lor poate indica o boală acută, reinfecție, suprainfectie sau reactivare. Cu toate acestea, în cazuri semnificative clinic, inclusiv în cursul tipic al herpesului genital sau neonatal, anticorpii specifici IgM sunt rar detectați (în 3-6% din cazuri). Determinarea avidității IgG AT-HSV poartă o încărcătură informațională scăzută: reactivarea în cazurile pronunțate clinic a fost însoțită de prezența anticorpilor foarte avidi. Testul pentru detectarea AT-HSV IgA este metoda de elecție împreună cu determinarea ADN-ului sau a antigenului HSV în determinarea activității procesului infecțios.

Indicații pentru utilizarea diferitelor teste de laborator. Determinarea AT este recomandabil să se efectueze pentru a confirma infecția primară, precum și pentru a stabili un diagnostic la pacienții cu evoluție asimptomatică și atipică a bolii.

La femeile însărcinate (screening), este recomandabil să se efectueze studii pentru detectarea IgM AT-HSV, precum și identificarea IgA AT-HSV. Pentru femeile însărcinate cu risc infecțios ridicat, se recomandă suplimentar determinarea ADN-ului și AH al HSV într-o suspensie de leucocite sau într-un material dintr-un focar suspectat.

Dacă se suspectează infecția intrauterină, se recomandă detectarea ADN-ului virusului în sângele din cordonul ombilical, la nou-născuți - detectarea ADN-ului virusului în diverse probe biologice (vezicule separate (vezicule) de leziuni erozive și ulcerative ale pielii și mucoaselor, orofaringe, conjunctivă ; sânge periferic, LCR, urină și etc.), precum și determinarea IgM și IgA AT-HSV în sânge. Având în vedere valoarea diagnostică ridicată a detectării ADN virusului prin PCR și relația dintre mortalitatea neonatală și viremia indusă de HSV, unii cercetători recomandă utilizarea acestei metode pentru screening-ul de laborator al infecției cu herpes generalizat la copiii cu risc ridicat.

Detectarea HSV-AG în diverse probe biologice este propusă a fi utilizată ca teste rapide pentru diferențierea tipurilor de virus în screeningul populațiilor cu o rată de incidență ridicată, precum și în monitorizarea bolii.

La pacientii cu infectie HIV cu manifestari clinice atipice ale leziunilor cutanate in diagnostic, se prefera detectarea ADN-ului HSV prin PCR ca metoda cea mai sensibila de diagnostic de laborator.

Caracteristici ale interpretării rezultatelor. Detectarea anticorpilor IgM specifici virusului poate indica o infecție primară, mai rar - reactivare sau reinfectare, detectarea anticorpilor IgA HSV - activitatea procesului infecțios (curs prelungit la debutul unei infecții cu herpes, reinfecție sau reactivare). Infecția congenitală (herpes neonatal) este indicată de prezența IgM și (sau) IgA AT-HSV. Detectarea anticorpilor IgG reflectă o infecție latentă (infecție).

Detectarea ADN-ului HSV indică prezența unui stadiu activ (replicativ) al unei infecții virale, ținând cont de severitatea manifestărilor clinice. Detectarea ADN-ului HSV-1 și/sau HSV-2 prin PCR permite, cu un singur test, stabilirea faptului infecției intrauterine a fătului; la efectuarea unei examinări în primele 24-48 de ore după naștere, laboratorul confirmă infecția congenitală cauzată de HSV.

Valoarea diagnostică (specificitatea și sensibilitatea) a detectării ADN-ului HSV în LCR la pacienții infectați cu HIV cu afectare a SNC nu a fost pe deplin stabilită. Poate că, pentru a confirma etiologia herpetică a encefalitei, este necesar să se determine concentrația ADN-ului HSV în LCR. Studiul pentru detectarea ADN-ului HSV în sânge nu este foarte informativ din cauza prezenței pe termen scurt a HSV în patul vascular, prin urmare, este posibil să se obțină un rezultat negativ în ciuda dezvoltării unei boli pronunțate clinic.

Sunt unul dintre cele mai comune herpesvirusuri în rândul populației din multe țări. Potrivit statisticilor OMS, agentul patogen se află în organism în stare latentă la 90%, respectiv 60% dintre oameni din întreaga lume. Virusul de primul tip provoacă - erupții veziculare pe buze, pielea triunghiului nazolabial, mai rar pe membrana mucoasă a cavității bucale. Un virus de al doilea tip duce la formarea unei erupții veziculare pe colul uterin, mucoasa vaginală, pielea vulvei și perineu. Agentul cauzal după primul contact cu corpul pătrunde în celulele nervoase ale ganglionilor spinali și se află într-o stare de „adormit”, fără a dăuna sănătății. Încălcarea sistemului imunitar duce la activarea virusului herpes și la un curs sever de infecție cu afectare a organelor interne. Pentru a identifica agentul patogen și a evalua severitatea evoluției bolii, se efectuează un test de sânge pentru herpesul tip 1 și 2, iar medicul curant este implicat în descifrarea rezultatelor testului.

Un sistem imunitar sănătos poate ține virusul sub control pe tot parcursul vieții unei persoane. Virusul se află în celulele nervoase într-o stare inactivă - nu se înmulțește, nu perturbă activitatea vitală a organismului, nu distruge celulele. Cu scăderea imunității: suprasolicitare fizică, stres, răceli, menstruație, exacerbarea bolilor cronice, agentul patogen dobândește proprietăți patogene și provoacă formarea unei erupții cutanate herpetice pe buze sau organe genitale. O inhibare accentuată a apărării organismului provoacă forme severe de infecție cu afectare a organelor interne.

Diagnosticul primar se efectuează în funcție de semnele clinice, în primul rând, în funcție de natura și localizarea erupției cutanate. În cele mai multe cazuri, boala nu necesită tratament etiologic sau medicamentele antivirale sunt utilizate ca terapie locală. Pentru a verifica virusul, în unele cazuri, este prescris un studiu al fluidelor biologice: sânge, urină, spută, răzuire din vagin și col uterin, conținutul veziculelor veziculare. Diagnosticul de laborator este necesar înainte de numirea medicamentelor antivirale.

Testele pentru herpes sunt cel mai adesea prescrise persoanelor cu tulburări de imunodeficiență (IDS).

O analiză pentru virusul herpes trebuie efectuată în următoarele cazuri:

• identificarea cauzei unei boli virale;
• verificarea tipului de virus herpes;
• selectarea medicamentelor antivirale;
• planificarea sarcinii și a perioadei de gestație;
• exacerbarea frecventă a infecției (mai mult de 3-4 ori pe an).

Un test de herpes este de obicei prescris pacienților cu imunodeficiențe (în primul rând HIV/SIDA), oncologie, boli cronice severe, în timpul radioterapiei și chimioterapiei și tratament cu imunosupresoare. La astfel de pacienți, imunitatea este suprimată, ceea ce poate duce la forme severe de herpes care apar cu leziuni ale ochilor, creierului și organelor interne.

Tipuri de diagnostic de laborator pentru detectarea virusurilor herpetice

Pentru a studia fluidele biologice pentru prezența agentului cauzal al herpesului de primul și al doilea tip, se prescriu diagnostice de laborator: (test imunoenzimatic), PCR (reacție în lanț a polimerazei) și metoda culturală. Utilizarea unei examinări cuprinzătoare crește eficacitatea verificării virusului în diferite stadii ale manifestării bolii.

ELISA

Diagnosticul imunologic are ca scop identificarea proteinelor specifice din sânge - imunoglobulinele (Ig), care sunt anticorpi și sunt produse de sistemul imunitar ca răspuns la invazia virusului în organism. Anticorpii specifici sunt sintetizați pentru un anumit tip de virus herpes. Prezența, cantitatea și tipul de imunoglobuline indică cauza infecției, perioada și severitatea bolii.

Tipuri de imunoglobuline:

• Ig M - sintetizată de celulele imunocompetente în primele zile după infecția primară, cu o exacerbare a infecției, păstrată în sânge timp de 1-2 luni;
• Ig G - sintetizate la 7-14 zile de la infecție, stocate în cantitate mică în sânge de-a lungul vieții unei persoane, sunt indicatori ai memoriei imunologice.

Diagnosticul de laborator este necesar înainte de numirea medicamentelor antivirale.

Pentru a determina stadiul de dezvoltare a unei infecții cu herpes, se prelevează sânge pentru a studia indicele de aviditate - capacitatea Ig G de a se lega de virusul herpes pentru a-l neutraliza. La începutul bolii sau în perioada de exacerbare, indicele de aviditate este scăzut, pe măsură ce infecția se dezvoltă, aceasta crește.

Descifrarea rezultatelor studiului:

• Ig M - negativ, Ig G - negativ - organismul nu este infectat cu herpesvirus;
• Ig M - pozitiv, Ig G - negativ - infecție primară, perioada precoce de infecție cu herpes;
• Ig M - pozitiv, Ig G - pozitiv, indice de aviditate - mai mic de 50% - infecție primară în stadiul de vârf;
• Ig M - pozitiv, Ig G - pozitiv, indice de aviditate peste 60% - exacerbarea infecției cu herpes;
• Ig M - negativ, Ig G - pozitiv, indice de aviditate mai mare de 60% - curs cronic al bolii sau transport.

Dacă în analizele de sânge este detectat un indice de aviditate la nivelul de 50-60%, ceea ce corespunde unui rezultat îndoielnic, studiul se repetă după 10-14 zile.

ELISA se realizează printr-o metodă calitativă și cantitativă. În primul caz, se detectează prezența și tipul de imunoglobuline la virusul herpes tip 1 și 2, în al doilea caz, titrul de anticorpi, care indică severitatea bolii și nivelul de imunitate la infecție.

ELISA se efectuează direct și indirect. Metoda directă constă în introducerea unei componente în serul de testare - un antigen cu etichetă, care formează un complex antigen-anticorp cu o imunoglobulină specifică. După adăugarea enzimei în ser, apare colorarea, a cărei intensitate determină concentrația de complexe în sânge. În metoda indirectă, în ser se adaugă două componente - un antigen-anticorp. Un antigen specific din sânge este fixat de anticorpi pe ambele părți (metoda sandwich). Această metodă este mai sensibilă și mai precisă, ceea ce vă permite să determinați imunoglobulinele în concentrații scăzute.

PCR

PCR este o metodă de diagnostic de laborator care detectează materialul genetic al virusului (ADN, ARN) în fluidul biologic studiat. Cu ajutorul analizei, este posibilă identificarea cantității minime de ADN/ARN a unui anumit virus herpes, astfel încât examinarea este foarte specifică și informativă. Diagnosticul este prescris pentru a verifica agentul cauzal al bolii în timpul perioadei de infecție primară sau exacerbare.

Descifrarea unui test de sânge pentru herpes prin PCR:

• pozitiv - materialul genetic al virusului a fost găsit în fluidul biologic;
• negativ - materialul genetic al virusului nu a fost găsit în fluidul biologic.

Cercetarea PCR se realizează printr-o metodă calitativă și cantitativă. În primul caz, prezența ADN-ului virusului este detectată, în al doilea, cantitatea de material genetic din fluidul biologic, ceea ce indică activitatea și severitatea infecției.

În timpul analizei PCR, materialul genetic detectat al virusului este supus copierii repetate prin intermediul ADN-ului monocatenar (primeri) și enzimelor (ADN polimerază). După obținerea unei cantități suficiente de material genetic, se oferă o transcriere a rezultatelor diagnosticului.

Metoda culturală

Metoda culturii biologice este rar utilizată atunci când rezultatele analizelor imunologice și PCR sunt îndoielnice. Pentru a identifica agentul cauzal al infecției, se efectuează însămânțarea pe medii nutritive, apoi se monitorizează creșterea virusului herpes. Pentru cultivarea virusului folosind celule vii de embrioni de pui. Semănatul se efectuează pe membrana corion-alantoidiană, în cavitatea alantoică, în sacul vitelin, în cavitatea amniotică. Rezultatul analizei se obține în 10-14 zile.

Descifrarea analizei pentru herpes prin metoda culturală:

• pozitiv - însămânțarea a dat modificări caracteristice în mediul nutritiv;
• negativ - însămânțarea nu a provocat modificări caracteristice în mediul nutritiv.

Puteți dona biomaterial în orice moment în timpul infecției. Creșterea pe termen lung a virionilor pe medii nutritive nu permite ca studiul să fie utilizat pentru diagnosticarea rapidă a bolii.

Pregătirea pentru examen

Înainte de a trimite biomaterialul pentru cercetare, este necesar să vă pregătiți corespunzător. Un test de sânge se efectuează pe stomacul gol după foame timp de cel puțin 6-8 ore. Cu o zi înainte, nu ar trebui să supraîncărcați dieta cu alimente grase, prăjite, picante. Se recomanda evitarea situatiilor stresante si a suprasolicitarii fizice. Cu o oră înainte de colectarea biomaterialului, se recomandă să se abțină de la fumat.

Pregătirea corespunzătoare pentru testele herpesului va asigura fiabilitatea maximă a acestora.

Urina (portiunea mijlocie) este colectata intr-un recipient curat dupa toaleta organelor genitale externe. Sputa se scuipa intr-un recipient steril, inainte de analiza nu mananca si nu se spala pe dinti. Răzuirea din vagin și col uterin se efectuează cu o spatulă ginecologică sterilă. Cu o zi înainte de studiu, este necesar să se abțină de la actul sexual, de la utilizarea supozitoarelor și tabletelor vaginale și de la dușuri. Predați frotiurile după o toaletă a unui picioare.

Diagnosticul de laborator al herpesului tip 1 și 2 nu este indicat pentru toți pacienții. Numirea examinării este efectuată de medic după interogarea și examinarea pacientului. Ce teste trebuie făcute, specialistul decide în funcție de tabloul clinic, severitatea evoluției bolii, perioada de curs a bolii.

Mai multe despre acest subiect: