Кровь на впг 1 и 2. Поговорим об анализах на герпес: какие они бывают и как расшифровать их результаты. Полимеразная цепная реакция

Анализ на герпес проводится для выявления этого вируса при клинических проявлениях или при подозрении на то, что инфекция уже долго живет в организме. С помощью анализов можно выяснить, болел ли человек ранее герпесом или вирус активен в настоящее время, предположить давность заболевания. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет обнаружить генетический код инфекции в разных биологических материалах – в сыворотке, в цельной крови, слюне, моче, на слизистой ротоглотки, на половых органах и т.д. Обнаружение РНК позволяет судить об активном процессе. Лабораторные анализы важны для дифференциальной диагностики, определения тактики лечения.

Масштабы проблемы

Главная проблема заключается в том, что излечиться от многих типов герпесной инфекции невозможно. Годами люди болеют, не зная об этом. В это время болезнь клинически не проявляется, но поражает клетки органов и слизистых, ослабляет иммунитет. На медицинских семинарах ученые выдвигают теорию о том, что пациенты, длительно болеющие герпесвирусами, в большей степени подвержены онкологическим заболеваниям. Опасно болеть ВПГ (первый и второй тип) или (пятый тип) беременным женщинам. Если вирус проникнет через плацентарный барьер, плод может погибнуть или родиться с тяжелыми патологиями.

Когда необходимо сдавать анализ на ВПГ

Анализы на вирус герпеса сдают в ряде случаев:

• При лихорадке неясного происхождения для выяснения ее причины, особенно при субфебрильных цифрах.
• При беременности на ранних сроках и перед родами.
• При отклонениях в общем анализе крови (повышенной СОЭ, лейкоцитозе, изменениях в лейкоцитарной формуле).
• Для диагностирования рецидива болезни.
• При иммунодефицитных состояниях.
• При высыпаниях на коже и слизистых неаллергического происхождения.
• Женщинам при зуде и обильных вагинальных выделениях, когда не подтверждены другие половые инфекции.

ВПГ у взрослых чаще проявляется в виде ранок на губах или слизистой носа, диагностируется врачом при простом осмотре. Примерно у 30% зараженных людей болезнь протекает бессимптомно. Поэтому обследоваться на антитела к вирусам герпеса разных типов рекомендуется в любом случае, даже когда нет определенных показаний.

Признаки герпеса

Семейство герпесов включает в себя десятки типов: вирус простого герпеса 1 и 2 (ВПГ), цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ, или 5 тип), вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ, или 4 тип), третий тип, вызывающий ветрянку и опоясывающий лишай, и т.д.

У детей заболевания, вызванные герпесом, имеют выраженную картину. При поражении ВЭБ развивается инфекционный мононуклеоз. При этом увеличиваются шейные или другие лимфатические узлы, повышается температура тела до 40 градусов, в клиническом анализе крови обнаруживаются атипичные мононуклеары. При ЦМВИ чаще поражаются ротоглотка, мочевыделительная система, печень. Может сформироваться киста в печени, которая трудно поддается лечению.

Инфекция протекает у каждого пациента по-разному в зависимости от стойкости иммунитета, наличия сопутствующих хронических болезней и возраста. Выделяют несколько признаков активного течения персистирующей (длительной) инфекции или первичного заражения:

• Повышение температуры до различных цифр. Одни пациенты переносят вирус с субфебрильной температурой, у других она поднимается до очень высоких цифр.
• Наличие у пациента волдырей на губах, которые быстро покрываются коркой, характерно для ВПГ 1.
• Высыпания на гениталиях чаще связаны с ВПГ-2 или ЦМВИ.
• Увеличение одного или нескольких лимфоузлов характерно для ВЭБ.
• Цитомегаловирусная инфекция может протекать с частыми обострениями цистита, пиелонефрита, конъюнктивита, так как поражает эпителиальную ткань.

Чем сильнее иммунная система, тем быстрее проходят клинические проявления. Дети болеют чаще и сильнее, так как их неустойчивый иммунитет не способен быстро нейтрализовать вирус и перевести его в «спящее» состояние.

Вирусы 1, 2 и 5 типов могут передаваться во время беременности от матери ребенку. В этом случае у новорожденных на теле имеются одиночные прыщики или множественные высыпания, наблюдаются отклонения со стороны нервной системы. В тяжелых случаях поражение приводит к внутриутробной гибели.

Чтобы вовремя назначить лечение матери и ребенку, необходимо периодически сдавать анализы на выявление антител.

Анализы на вирус герпеса у беременных

При постановке на учет по беременности врач назначает женщине ряд исследований. В их числе обязательно анализы на TORCH-инфекции. Эта группа заболеваний, которая радикально влияет на течение беременности и развитие плода. В обследование на TORCH-инфекции входят анализы на герпес. Оптимально сдавать эти анализы во время планирования беременности обоим супругам.

Какой анализ сдать на герпес:

• Иммуноглобулины M и G по отношению к ВПГ 1, 2 и ЦМВИ.
• Если положительны Ig M, необходимо пройти исследование методом ПЦР на простой герпес и цитомегаловирус. Информативная биологическая среда для исследования – сыворотка крови.
• При наличии в анамнезе ВЭБ, герпеса 6 или 8 типа необходимо наблюдать титр антител к этим вирусам.
• Если женщина больна генитальным герпесом, то рекомендуется исследование крови на Ig М и G к ВПГ2. Еще делается соскоб со слизистой половых органов для исследования методом ПЦР на обнаружение генного кода ВПГ-2.

При положительном результате на первичное обследование антител к вирусу какого-либо типа, дальнейшую тактику диагностики определяет иммунолог или инфекционист. Конечный диагноз ставится после комплексного обследования.

Виды анализов на герпес

Какие анализы сдают на генитальный герпес:

1. Кровь на Ig М при подозрении на недавнее заражение или на Ig G при диагностировании хронической инфекции. Информативнее сдавать суммарный тест на оба вида антител. По этим анализам обнаруживается иммунный ответ к инфекции, то есть «след» заболевания.
2. Анализ крови на авидность к генитальному ВПГ-2 позволяет предположить долю вероятности заражения вирусом месяц назад или раньше.
3. Анализ ПЦР мазка из урогенитального тракта показывает наличие или отсутствие ВПГ на момент исследования, то есть оценивается в режиме реального времени.
4. Метод РИФ исследует свечение, которое дает вирус герпеса.

При разных ситуациях врач направляет на анализ крови или исследования мазка. Тактику обследования при генитальном герпесе определяет гинеколог или инфекционист.

Анализ крови на ПЦР

ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Этот метод молекулярной биологии направлен на выявление ДНК или РНК возбудителя.

В отличие от определения антигена вируса, ПЦР позволяет обнаружить генный код самого герпеса. Информативность метода свыше 90%.

Используется для диагностирования активной фазы заболевания, то есть когда вирус размножается и растет не в клетке, а за ее пределами, и способен нанести вред организму.

Для выявления герпеса исследуются различные биологические вещества. Врач может назначить анализ на ПЦР с любых слизистых оболочек (конъюнктива, ротоглотка, верхние дыхательные пути, уретра, влагалище, цервикальный канал и т.д.), сыворотки или цельной крови. При необходимости лаборатории могут исследовать методом ПЦР ликвор (спинномозговую жидкость) и другой биоматериал, полученный при хирургическом проколе органа.

Заключение анализа может быть качественным (обнаружен / не обнаружен) или количественным, то есть сколько копий найдено в условной единице биоматериала. Количественный результат необходим врачу для подбора соответствующей дозы лекарства.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) основан на специфической реакции «антиген – антитело». Метод обнаруживает различные низкомолекулярные соединения, которые образовались в организме в ответ на инфекцию. Обнаруженная специфическая молекула называется антителом и входит в состав иммуноглобулина, выработанного при инфицировании герпесом.

В первые 2 недели образуются Ig А или М. Срок их нахождения в крови – около 1-2 месяцев. Постепенно они замещаются Ig G, которые обычно диагностируются со второго месяца болезни. Их титр нарастает при длительном рецидивирующем герпесе. Сроки жизни антител примерные, зависят от индивидуальности иммунитета.

Анализ проводится из сыворотки крови. Сначала у пациента берут венозную кровь, отстаивают ее и откручивают в центрифуге.

При генитальном герпесе назначается ИФА на Ig М и G к ВПГ-1 и 2. Этим способом диагностики герпетической инфекции врач пользуется для определения первичного заражения и хронического течения. По снижению количества иммуноглобулинов специалист может судить о благополучном лечении. При рецидиве болезни титр антител возрастает.

РИФ (реакция иммунофлюоресценции)

Это экспресс-метод для обнаружения антигена или антител. Анализ основан на способности специфической сыворотки светиться в ультрафиолете при соединении с вирусом. Информативность метода менее 50%. Это устаревший способ диагностики, который в современной медицине используется крайне редко.

Если герпес появился на губах, то для первичной быстрой диагностики можно использовать слюну. Методом РИФ можно обнаружить флюоресцентное свечение при добавлении в слюну специального реактива на выявление ВПГ-1. Чтобы поставить окончательный диагноз, необходимо выявить герпес в организме методом ПЦР.

Другие методы диагностики герпеса

При установлении у пациента диагноза ВПГ, инфекционного мононуклеоза или цитомегаловируса, необходимо периодически сдавать анализы для оценки динамики течения.

При необходимости выяснить, как давно произошло заражение, врач назначает анализ на авидность к герпесу. Авидность можно определить к ВПГ 1, 2, к ВЭБ или к ЦМВИ.

Как сдать анализы на герпес: подготовка и забор материала

Сдают анализ крови на герпес утром натощак. Допускается взятие крови в течение дня через 4 часа после приема легкой пищи.

Мазок на герпес в интимной зоне сдается при следующих условиях:

• накануне нельзя жить половой жизнью;
• женщины не должны спринцеваться, допустимо только обмывание наружных половых органов без мыла;
• при мазке из уретры не должно быть мочеиспускания за 2-3 часа до взятия биоматериала.

Расшифровка результатов

После попадания вируса в организм иммунная система распознает его и начинает бороться. При этом вырабатываются защитные антитела к вирусу – иммуноглобулины, сокращенно Ig. По наличию в крови этих иммуноглобулинов врач судит о заражении пациента тем или иным вирусом герпеса.

Сначала появляются иммуноглобулины класса Ig M, средняя продолжительность их циркулирования в крови – от 2 недель до 2 месяцев. Выработанные к вирусу герпеса 4 типа антитела сохраняются дольше. Если анализ показывает присутствие Ig M, значит, заражение вирусом было недавно или активировался хронический герпес.

Затем вырабатываются Ig G. Они начинают фиксироваться в крови через месяц после внедрения вируса и иногда присутствуют всю жизнь, что свидетельствует о хроническом течении болезни.

Что делать, если в организме обнаружен герпес

Положительные анализы на герпес указывают на наличие этого заболевания. Необходимо наблюдаться у иммунолога, который подберет тактику лечения. Профилактический курс терапии при неактивной фазе положено проходить как минимум 1 раз в год.

Сколько стоит обследование в диагностических центрах Москвы

Комплексное обследование на Ig класса M и G к одному виду вируса стоит примерно 1200-1600 руб. ПЦР-диагностика одного типа герпеса из определенной локализации варьируется в прейскурантах московских лабораторий от 250 до 400 рублей.

Сколько делается исследование

Диагностика методом ИФА выполняется очень быстро. Это исследование проводится на анализаторах и занимает 20-40 минут. Метод ПЦР и РИФ требует определенной подготовки биоматериала, поэтому анализы выполняются за несколько часов.

Герпес - это одно из наиболее распространенных вирусных заболеваний на планете. По данным статистики, не менее 90% населения является носителями этого вируса. Клинические признаки отличаются при разных типах герпеса, болезнь может проявляться на коже и слизистых оболочках. 1 и 2 типа и расшифровка данных - это способ выявить возбудителя, определить его тип и выбрать подходящую схему лечения.

Что представляет собой возбудитель?

Заражение может происходить одним из следующих способов:

• контактным (в том числе при использовании общих предметов быта и личной гигиены);
• воздушно-капельным;
• половым;
• вертикальным (от матери к ребенку при беременности и в процессе родов).

После проникновения в организм вирус может не проявляться клинически в течение длительного времени. Иммунная система человека держит популяцию возбудителя под контролем, и он не способен размножаться. Первые симптомы возникают при снижении уровня иммунной защиты, в том числе при сезонных иммунодефицитах. Поэтому герпес часто сопровождает другие вирусные и бактериальные заболевания, грибковые инфекции.

Больной может не знать, что является вирусоносителем, но при этом заражать окружающих.

Герпесвирус 1 типа

Чаще всего болезнь локализуется на коже лица и тела и проявляется следующими симптомами:

• покраснение кожи в месте активизации вируса;
• появление мелкой сыпи (пузырьки вскрываются самостоятельно, а на их месте образуются язвы);
• зуд и отечность.

Заболевание проявляется локально, но некоторые пациенты жалуются также на повышение температуры, озноб, слабость и мышечную боль. В период рецидива герпеса больной максимально опасен для окружающих, так как возбудитель находится в содержимом пузырьков.

Герпесвирус 2 типа

Герпес второго типа относят к заболеваниям, передающимся половым путем. Кроме того, существуют еще контактный, бытовой и вертикальный пути передачи. Клинически болезнь проявляется сыпью на половых органах и коже бедер. Исследования на герпесвирус обязательны при беременности. Вирус опасен для плода: существует риск развития патологий, а также инфицирования младенца во время родов.

В каких случаях нужно обращаться в лабораторию?

Во время рецидива болезни вирус герпеса 1 и 2 типа можно определить путем простого осмотра. Характерная зудящая сыпь, которая имеет определенную локализацию, - это единственный признак, который будет являться основанием для постановки диагноза. Кроме того, пузырьки часто появляются на одном и том же месте, с одинаковой стороны.

Сдавать кровь в лабораторию для анализа нужно только в нескольких случаях:

1. если герпес проявляется нестандартно, в стертой форме или с осложнениями;
2. во время планирования беременности;
3. если нужно выяснить срок заражения (например, при беременности для оценки потенциального риска для плода).

Сыпь может служить признаком большого количества заболеваний инфекционного и незаразного происхождения. По данным анализа крови можно определить тип вируса, убедиться в диагнозе и назначить лечение по необходимости.

Методы определения вируса герпеса в крови

Существует несколько методик обнаружения . Они эффективны при спорных ситуациях, а также в тех случаях, если болезнь протекает бессимптомно. Во время рецидива можно также исследовать содержимое пузырьков, соскобы кожи или мазки слизистых оболочек. Лечащий врач определит, какие анализы нужно сдать, исходя из возможностей лаборатории и финансового положения пациента.

Существует несколько стандартных правил, которые позволят получить наиболее точный результат. Анализы сдают на голодный желудок. Чаще всего кровь собирают утром, с 8 до 10 часов. Накануне не стоит употреблять жирную пищу и алкоголь. Также на результат анализов могут повлиять стрессы или любое другое эмоциональное перенапряжение.

Анализ на герпес 1 и 2 типа чаще всего проводят двумя методами - ПЦР (полимеразная цепная реакция) и ИФА (иммуноферментный анализ). Также могут использоваться другие способы, в зависимости от оснащения лаборатории и ее технических возможностей.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР - это чувствительная реакция, которая позволяет обнаружить в исследуемом материале ДНК вирусных клеток. Суть метода сводится к тому, что определенный ген многократно копируют, в результате чего можно выявить наличие и тип возбудителя. Важно, что реакция не произойдет, если исследуемой ДНК в материале нет.

Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружить вирус непосредственно после заражения, задолго до того, как болезнь начнет проявляться клинически. Также ее назначают в тех случаях, когда нужно определить конкретный тип вируса, а не просто его наличие.

Лаборатория предоставляет бланки с показателями, которые легко расшифровать самостоятельно. результат свидетельствует о присутствии вируса в крови, отрицательный - об отсутствии. Это наиболее достоверный и чувствительный анализ, который выявляет даже самую малую концентрацию возбудителя. Полимеразная цепная реакция дает один из наиболее достоверных результатов, поэтому считается дорогостоящей. Также в бланках содержится информация о типе герпеса.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

ИФА - это реакция, которая основана на выделении комплекса антиген-антитело. Вирус герпеса 1 или 2 типа- это антиген для организма (чужеродное вещество), в ответ на который иммунная система выделяет специальные белки - антитела (иммуноглобулины или Ig).

Антитела переносятся в током крови по организму в очаг заболевания и там начинают бороться с инфекцией. Существует несколько основных классов иммуноглобулинов, которые можно обнаружить по время анализа на герпес:

• IgM - это первые антитела, которые формируются в организме больного. В крови пациента их можно найти в течение 2-х недель с момента инфицирования. Кроме того, эти белки появляются в период пробуждения вируса при хроническом герпесе.
• IgG - это антитела, на основании которых можно говорить о хронической инфекции, которая находится в организме больного уже в течение длительного времени. Количество иммуноглобулинов этого класса резко возрастает при очередном рецидиве герпеса.
• IgG к предранним белкам вируса герпеса - это белки-антитела, которые возникают в крови вслед за IgM и также указывают на наличие заболевания в острой или хронической форме.
• Оценивают и такой показатель, как . Он характеризует способность этого иммуноглобулина связываться с вирусом и образовывать комплекс антиген-антитело. В начале болезни этот показатель слабо выражен, но в активную фазу заболевания резко возрастает.

Расшифровку результатов проводит врач. В каждой лаборатории существуют собственные показатели нормы. Больной получает бланк, в котором указаны его значения антител, а также те, от которых необходимо отталкиваться. Если количество иммуноглобулинов ниже нормы - результат отрицательный, если выше - положительный.

Отдельно проводится расшифровка анализов на авидность IgG. Возможные результаты представлены в таблице:

Результаты анализов могут отличаться в разных лабораториях. Они зависят от оборудования и других факторов, но, в основном, бывают достоверными.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

РИФ - это еще один способ обнаружить вирус в исследуемом материале, в том числе в крови. Эта реакция показывает наиболее точный результат, если концентрация возбудителя высока. Суть метода сводится к добавлению в субстрат (кровь) специальных красителей с антителами и его последующей микроскопии. Если вирус присутствует, он вступает в химические реакции с антителами и светится под микроскопом.

Расшифровка анализа крови на герпес путем РИФ - это результаты микроскопии. Характерное свечение говорит о наличии возбудителя. На точность данных повлияет не только количество вируса герпеса, но и наличие другой инфекции в крови. Если она там находится в высокой концентрации, можно получить ложноположительный результат.

Этот метод заключается в выделении вируса из исследуемого материала и заражении биологических объектов (культуры клеток, куриных эмбрионов) в лабораторных условиях. Способ требует больших затрат времени и не используется в обычных ситуациях. Чаще всего его применяют для научных исследований. Для его выполнения необходима специально оборудованная вирусологическая лаборатория для изоляции возбудителя в помещении и предотвращения его распространения.

Заключение

Вирус простого герпеса (ВПГ) – ДНК–содержащий вирус Herpes simplex virus семейства Herpesviridae подсемейства Alphaherpesvirinae . Согласно статистическим данным ВОЗ, инфекции, обусловленные ВПГ, занимают второе место по распространенности среди вирусных заболеваний человека. Различают два серотипа ВПГ – ВПГ-1 и ВПГ-2. Оба типа вируса вызывают инфекционные заболевания человека различной степени тяжести от характерных везикулезных или пустулезных высыпаний на коже и слизистых до поражений ЦНС. ВПГ-1 – причина офтальмогерпеса, протекающего в форме кератита или кератоиридоциклита, реже увеита, в единичных случаях - ретинита, блефароконъюнктивита. Заболевание может привести к помутнению роговицы и вторичной глаукоме. ВПГ-1 - основная причина энцефалита у взрослого населения стран умеренного климата, при этом только у 6–10% больных отмечается одновременное поражение кожи.

В ходе проведения эпидемиологических исследований установлено наличие специфических АТ к ВПГ у 90–95% обследуемых лиц среди взрослого населения, при этом первичная инфекция манифестно протекает лишь у 20–30% инфицированных.

ВПГ характеризуется коротким циклом репродукции в клеточных культурах и оказывает сильное цитопатическое действие. Он способен к репродукции в различных типах клеток, чаще персистирует в ЦНС, преимущественно в ганглиях, поддерживая латентную инфекцию с возможностью периодической реактивации. Наиболее часто вызывает кожно-слизистые формы заболевания, а также поражение ЦНС и глаз. Геном ВПГможет интегрироваться с генами других вирусов (включая ВИЧ), вызывая их активацию, также возможен его переход в активное состояние на фоне развития иных вирусных и бактериальных инфекций.

Пути передачи ВПГ: воздушно-капельный, половой, контактно-бытовой, вертикальный, парентеральный. Факторами передачи ВПГ служат кровь, слюна, моча, везикулярный и вагинальный секрет, сперма. Входными воротами являются поврежденные слизистые оболочки и кожа. По периферическим нервам вирус доходит до ганглиев, где сохраняется пожизненно. При активации ВПГ распространяется по нерву к первоначальному очагу поражения (механизм “замкнутого цикла” – циклическая миграция вируса между ганглием и поверхностью кожи). Может происходить лимфогенная и гематогенная диссеминация возбудителя, что особенно характерно для недоношенных новорожденных и лиц с выраженным иммунодефицитом (в т. ч. при ВИЧ-инфекции). ВПГ обнаруживается на лимфоцитах, эритроцитах, тромбоцитах, при проникновении вируса в ткани и органы возможно их повреждение вследствие его цитопатического действия. Сохраняющиеся в течение всей жизни у человека вируснейтрализующие АТ (даже в высоких титрах), хотя и препятствуют распространению инфекции, но не предупреждают рецидивов.

Выделение ВПГ продолжается значительное время при первичном инфицировании (ДНК выявляется в плазме крови в течение 4–6 недель), при рецидивах – не более 10 дней. Формирование противогерпетического иммунитета происходит как при манифестном, так и при бессимптомном течении инфекции. При первом контакте АГ с клетками иммунной системы в течение 14–28 дней формируется первичный иммунный ответ, который у иммунокомпетентных лиц проявляется образованием интерферонов, выработкой специфических АТ (вначале – IgM, впоследствии – IgA и IgG), повышением активности естественных киллеров – NK-клеток и формированием мощного пула высокоспециализированных киллеров. В случае реактивации или реинфекции возникает повторный контакт клеток иммунной системы с АГ, образуются АТ и Т-киллеры. Реактивация сопровождается продукцией АТ IgM (редко даже при наличии типичных высыпаний), АТ IgА (чаще) и IgG.

ВПГ (преимущественно ВПГ-2) вызывает генитальный герпес – хроническое рецидивирующее заболевание. Клинические проявления первичного эпизода инфекции, вызванной разными типами вируса сходны, однако инфекции, вызванной ВПГ-2, в гораздо большей степени свойственен рецидивирующий характер. Передача вируса происходит при половых контактах, очаг инфекции локализуется на слизистой и коже половых органов и перигенитальной зоны. Размножение вируса в клетках эпителия приводит к образованию очага сгруппированных пузырьков (папул, везикул), в которых содержатся вирусные частицы, сопровождается покраснением, зудом. Первичный эпизод протекает острее (обычно с симптомами интоксикации), чем последующие рецидивы. Часто возникают симптомы дизурии, признаки эрозии шейки матки.

На ранних стадиях ВИЧ-инфекции течение заболеваний, вызванных ВПГ-1 или ВПГ-2, короткое и типичное. Частым признаком углубления иммуносупрессии и перехода латентной стадии ВИЧ-инфекции в стадию вторичных заболеваний служит развитие опоясывающего лишая. Наличие стойких глубоких вирусных поражений кожи, повторный или диссеминированный опоясывающий лишай, локализованная саркома Капоши - одни из клинических критериев стадии вторичных заболеваний ВИЧ-инфекции. У больных с количеством CD4+-клеток менее 50 клеток/мкл отсутствует тенденция к самостоятельному заживлению эрозивно-язвенных дефектов. Частота герпетического энцефалита среди поражений ЦНС при ВИЧ-инфекции - около 1–3%. У больных СПИДом с наличием глубокого иммунодефицита заболевание нередко протекает атипично: болезнь начинается подостро и медленно прогрессирует до тяжелейших проявлений энцефалита.

Герпетическая инфекция даже при бессимптомном течении способна вызвать целый ряд патологий у беременной и новорожденного. Наибольшую угрозу репродуктивной функции представляет генитальный герпес, который в 80% случаев обусловлен ВПГ-2 и в 20% – ВПГ-1. Бессимптомное течение чаще имеет место у женщин и более типично для ВПГ-2, чем для ВПГ-1. Первичное инфицирование или рецидивы во время беременности наиболее опасны для плода, поскольку могут привести к самопроизвольному выкидышу, гибели плода, мертворождению, порокам развития. Заражение плода и новорожденного чаще отмечается при бессимптомном течении генитального герпеса, чем при клинически выраженном типичном течении. Новорожденный может приобрести герпетическую инфекцию внутриутробно, во время родов (в 75–80% случаев), либо постнатально.

ВПГ-2 может проникать в полость матки через цервикальный канал с поражением плода в 20–30% случаев; трансплацентарное инфицирование может происходить в 5–20% случаев, инфицирование во время родов – в 40% случаев. Возможна передача вируса при выполнении медицинских процедур. При типичных клинических проявлениях диагноз герпетической инфекции трудностей не представляет, тогда как при атипичных формах верифицируется на основании результатов лабораторных исследований, при этом приоритетными должны быть исследования, направленные на выявление маркеров текущей (активной) инфекции. Активация инфекционного процесса при герпетической инфекции, даже при наличии клинических проявлений в стадии обострения, редко сопровождается выработкой АТ-ВПГ IgM (чаще – при первичной инфекции либо реинфекции), как правило, при этом отмечают появление АТ-ВПГ IgА.

Целесообразными являются диагностические исследования для обнаружения ВПГ или его маркеров при наличии в анамнезе пациента указаний на рецидивирующую инфекцию либо на дебют герпетической инфекции в период беременности.

Дифференциальная диагностика. При наличии инфекционного синдрома (длительный субфебрилитет, лимфаденопатия, гепато- или гепатоспленомегалия) – токсоплазмоз, цитомегаловирусная инфекция и инфекция, вызванная ВЭБ; контактный дерматит, инфекционные заболевания, сопровождающиеся везикулезными высыпаниями на коже и слизистых оболочках (ветряная оспа, опоясывающий герпес, пиодермия и др.); эрозивно–язвенные поражения гениталий, обусловленные Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi; болезнь Крона, синдром Бехчета, фиксированная токсикодермия, менингоэнцефалиты и менингиты неясной этиологии, увеиты и кератоконъюнктивиты неясной этиологии).

Показания к обследованию

• Планирование беременности;
• женщины, имеющие в анамнезе либо на момент обращения типичные герпетические высыпания любой локализации, в т. ч. рецидивирующий генитальный герпес, или наличие пузырьковых и/или эрозивных высыпаний на коже, ягодицах, бедрах, слизисто–гнойные выделения из влагалища;
• наличие полового контакта с партнером, имеющим генитальный герпес;
• атипичная форма заболевания: отсутствие зуда или жжения, отсутствие везикул, веррукозные узелки; обширные кожные поражения (до 10% случаев предполагаемого опоясывающего герпеса обусловлено не ВЗВ, а ВПГ);
• женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
• беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоаденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
• дети с признаками внутриутробной инфекции, врожденными пороками развития или наличием на коже или слизистых оболочках везикул или корочек;
• дети, рожденные от матерей, перенесших генитальный герпес во время беременности;
• ациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением глаз (увеит, кератит, ретинит, ретинальный некроз), поражением ЖКТ.

Материал для исследования

• Содержимое пузырьков/везикул со слизистых оболочек и кожи половых органов мужчин и женщин – микроскопические исследования, культуральные исследования, выявление АГ, выявление ДНК;
• мазки (соскобы) со слизистых оболочек цервикального канала, уретры (при отсутствии видимых пузырьковых высыпаний или эрозивно-язвенных поражений) – выявление ДНК;
• сыворотка крови, СМЖ (по показаниям) – выявление АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопическое исследование, выделение и идентификация вируса в культуре клеток, выявление АГ или ДНК возбудителя, определение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики (вирус простого герпеса - анализ). Среди методов лабораторной диагностики “золотым стандартом” долгое время считали выделение ВПГ в культуре клеток из крови, СМЖ, содержимого везикулезных или пустулезных высыпаний и других локусов (носоглотки, конъюнктивы, уретры, влагалища, цервикального канала). Данный метод предполагает изоляцию вируса при заражении биологическим материалом чувствительных культур клеток с его последующей идентификацией. К неоспоримым преимуществам метода относятся: возможность определения активности инфекции при наличии клинических проявлений и проведения типирования вируса, а также установления чувствительности к противовирусным препаратам. Однако длительность анализа (1–8 дней), трудоемкость, высокая стоимость и необходимость определенных условий проведения исследований затрудняет применение данного метода для рутинной лабораторной диагностики заболевания. Чувствительность достигает 70–80%, специфичность – 100%.

Материал с поверхности высыпаний может быть использован для микроскопических (окраска препаратов по Романовскому–Гимзе) или цитологических (окраска препаратов по Тцанку и Папаниколау) исследований. Названные процедуры имеют низкую диагностическую специфичность (не позволяют дифференцировать ВПГ от других герпес-вирусов) и чувствительность (не более 60%), поэтому не могут считаться надежными методами диагностики.

Выявление АГ ВПГ в крови, СМЖ, содержимом везикулезных или пустулезных высыпаний и других локусов (носоглотки, конъюнктивы, уретры, влагалища, цервикального канала) проводят методами РИФ и РНИФ с использованием моноклональных или высокоочищенных поликлональных АТ. При использовании метода ИФА чувствительность исследования возрастает до 95% и более, специфичность при манифестном герпесе варьирует от 62 до 100%. Однако большинство наборов реагентов для выявления антигена ВПГ методом ИФА не позволяют провести дифференцирование серотипов вируса.

Обнаружение ДНК ВПГ-1 и/или ВПГ-2 при использовании ПЦР в различном биологическом материале превосходит чувствительность обнаружения ВПГ при использовании вирусологического исследования. Выявление ВПГ в соскобах со слизистых оболочек полости рта, урогенитального тракта, в отделяемом пузырьковых высыпаний (везикул) и эрозивно–язвенных поражений кожи с помощью ПЦР является методом выбора. Несомненную ценность имеет определение количества ДНК ВПГ методом ПЦР в режиме реального времени, результаты исследования можно использовать как с диагностической целью, так и для оценки эффективности лечения.

Для выявления АТ к ВПГ разных классов IgА, IgG, IgM, суммарных к антигенам ВПГ обоих типов или типоспецифичных, применяют методы РНИФ или ИФА, для определения авидности АТ IgG – метод ИФА. Наибольшее диагностическое значение имеет детекция АТ IgM как показателя активности процесса, их выявление может свидетельствовать об остром заболевании, реинфекции, суперинфекции или реактивации. Однако в клинически выраженных случаях, в т. ч. при типичном течении генитального или неонатального герпеса, специфические АТ IgM выявляются редко (в 3–6% случаев). Определение авидности АТ-ВПГ IgG несет низкую информационную нагрузку: реактивация при клинически выраженных случаях сопровождалась наличием высокоавидных АТ. Тест на выявление АТ-ВПГ IgА является методом выбора наряду с определением ДНК либо АГ ВПГ при определении активности инфекционного процесса.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Определение АТ целесообразно проводить для подтверждения первичной инфекции, а также установления диагноза у пациентов с бессимптомным и атипичным течением заболевания.

У беременных женщин (скрининг) целесообразно проведение исследований для выявления АТ-ВПГ IgМ, а также выявление АТ-ВПГ IgА. Для беременных высокого инфекционного риска дополнительно рекомендуется определение ДНК и АГ ВПГ в лейкоцитарной взвеси или в материале из предполагаемого очага.

При подозрении на внутриутробную инфекцию рекомендуется выявление ДНК вируса в пуповинной крови, у новорожденных – детекция ДНК вируса в различных биологических пробах (отделяемое пузырьковых высыпаний (везикул) эрозивно– язвенных поражений кожи и слизистых оболочек, ротоглотки, конъюнктивы; периферическая кровь, СМЖ, моча и др.), а также определение АТ-ВПГ IgМ и IgА в крови. Учитывая высокую диагностическую значимость определения ДНК вируса методом ПЦР и наличие зависимости между летальностью у новорожденных и виремией, вызванной ВПГ, некоторые исследователи рекомендуют использовать этот метод для лабораторного скрининга генерализованной герпетической инфекции детей, относящихся к группе высокого риска.

Выявление АГ-ВПГ в различных биологических пробах предлагается применять в качестве экспресс-тестов для дифференцирования типов вируса при скрининге популяций с высоким уровнем заболеваемости, а также при мониторинге заболевания.

У больных ВИЧ-инфекцией с атипичными клиническими проявлениями кожных поражений в диагностике отдается предпочтение выявлению ДНК ВПГ методом ПЦР как самому чувствительному методу лабораторной диагностики.

Особенности интерпретации результатов. Обнаружение вирусоспецифических АТ IgM может свидетельствовать о первичной инфекции, реже – о реактивации или реинфекции, выявление АТ-ВПГ IgА – об активности инфекционного процесса (затяжное течение при дебюте герпетической инфекции, реинфекции или реактивации). О врожденной инфекции (неонатальный герпес) свидетельствует присутствие АТ-ВПГ IgM и(или) IgА. Выявление АТ IgG отражает латентную инфекцию (инфицирование).

Выявление ДНК ВПГ свидетельствует о наличии активной (репликативной) стадии вирусной инфекции с учетом выраженности клинических проявлений. Выявление ДНК ВПГ-1 и/или ВПГ-2 методом ПЦР позволяет при однократном тестировании установить факт внутриутробного инфицирования плода; при проведении обследования в первые 24–48 ч после рождения лабораторно подтвердить врожденную инфекцию, вызванную ВПГ.

Диагностическое значение (специфичность и чувствительность) обнаружения ДНК ВПГ в СМЖ у больных ВИЧ-инфекцией с поражением ЦНС окончательно не установлены. Возможно, для подтверждения герпетической этиологии энцефалита необходимо определение концентрации ДНК ВПГ в СМЖ. Исследование для обнаружения ДНК ВПГ в крови малоинформативно в связи кратковременным нахождением ВПГ в сосудистом русле, следовательно, возможно получение отрицательного результата несмотря на развитие клинически выраженного заболевания.

Относятся к одним из самых распространенных герпесвирусов среди населения многих стран. По статистике ВОЗ возбудитель находится в организме в латентном состоянии у 90% и 60% людей во всем мире соответственно. Вирус первого типа вызывает – везикулярные высыпания на губах, коже носогубного треугольника, реже на слизистой оболочке ротовой полости. Вирус второго типа приводит к , когда везикулярная сыпь формируется на шейке матки, слизистой влагалища, коже наружных половых органов и промежности. Возбудитель после первого контакта с организмом проникает в нервные клетки спинномозговых ганглиев и находится в «спящем» состоянии без вреда для здоровья. Нарушение работы иммунной системы приводит к активации герпесвируса и тяжелое течение инфекции с поражением внутренних органов. Для выявления возбудителя и оценки тяжести течения болезни проводят анализ крови на герпес 1 и 2 типа, расшифровкой результатов анализов занимается лечащий врач.

Здоровая иммунная система может держать вирус под контролем в течение всей жизни человека. Вирус находится в нервных клетках в неактивном состоянии – не размножается, не нарушает жизнедеятельность организма, не разрушает клетки. При снижении иммунитета: физическом перенапряжении, стрессе, простудных заболеваниях, менструации, обострении хронических заболеваний возбудитель приобретает патогенные свойства и вызывает образование герпетической сыпи на губах или половых органах. Резкое угнетение защитных сил организма вызывает тяжелые формы инфекции с поражением внутренних органов.

Первичная диагностика проводится по клиническим признакам, в первую очередь, по характеру и локализации сыпи. В большинстве случае, заболевание не требует этиологического лечения или противовирусные препараты применяются в качестве местной терапии. Для верификации вируса в некоторых случаях назначают исследование биологических жидкостей: крови, мочи, мокроты, соскоба из влагалища и шейки матки, содержимого везикулярных пузырьков. Лабораторная диагностика необходима перед назначением противовирусных лекарственных веществ.

Анализы на герпес чаще всего назначаются людям с иммунодефицитными состояниями (ИДС).

Анализ на вирус герпеса необходимо сдавать в следующих случаях:

• выявление причины вирусного заболевания;
• верификация типа вирусгерпеса;
• подбор противовирусных препаратов;
• планирование беременности и период вынашивания плода;
• частое обострение инфекции (более 3-4 раз в год).

Анализ на герпес обычно назначают пациентам с иммунодефицитами (в первую очередь, ВИЧ/СПИД), онкологией, тяжелыми хроническими заболеваниями, во время лучевой и химиотерапии, лечения иммуносупрессорами. У таких больных происходит угнетение иммунитета, что может привести к тяжелым формам герпеса, которые протекают с поражение глаз, головного мозга, внутренних органов.

Виды лабораторной диагностики для выявления герпесвирусов

Для исследования биологических жидкостей на присутствие возбудителя герпеса первого и второго типа назначают лабораторную диагностику: (иммуноферментный анализ), ПЦР (полимеразную цепную реакцию), культуральный метод. Применение комплексного обследования повышает эффективность верификации вируса на разных стадиях проявления болезни.

ИФА

Иммунологическая диагностика направлена на выявление в крови специфических белков – иммуноглобулинов (Ig), которые представляют собой антитела и вырабатываются иммунной системой на вторжение вируса в организм. К определенному типу вирусгерпеса синтезируются специфические антитела. Присутствие, количество и вид иммуноглобулинов указывает на причину инфекции, период и тяжесть течения заболевания.

Виды иммуноглобулинов:

• Ig M – синтезируются иммунокомпетентными клетками в первые дни после первичного заражения, при обострении инфекции, сохраняются в крови в течение 1-2 месяцев;
• Ig G – синтезируются через 7-14 дней после заражения, сохраняются в небольшом количестве в крови в течение всей жизни человека, относятся к показателям иммунологической памяти.

Лабораторная диагностика необходима перед назначением противовирусных лекарственных веществ.

Для определения стадии развития герпетической инфекции сдают кровь на исследование индекса авидности – способности Ig G связываться с вирусгерпесом для его нейтрализации. В начале заболевания или периода обострения индекс авидности низкий, по мере развития инфекции – увеличивается.

Расшифровка результатов исследования:

• Ig M – отрицательный, Ig G – отрицательный – организм не заражен герпесвирусом;
• Ig M – положительный, Ig G – отрицательный – первичное заражение, ранний период герпетической инфекции;
• Ig M – положительный, Ig G – положительный, индекс авидности – менее 50% – первичная инфекция в стадии разгара;
• Ig M – положительный, Ig G – положительный, индекс авидности более 60% – обострение герпетической инфекции;
• Ig M – отрицательный, Ig G – положительный, индекс авидности более 60% – хроническое течение болезни или носительство.

При выявлении в анализах крови индекса авидности на уровне 50-60%, что соответствует сомнительному результату, исследование повторяют через 10-14 дней.

ИФА проводят качественным и количественным методом. В первом случае, выявляют наличие и вид иммуноглобулинов к вирусу герпеса 1 и 2 типа, во втором – титр антител, которые указывают на тяжесть болезни и уровень иммунитета к инфекции.

ИФА проводят прямым и непрямым способом. Прямой способ заключается в ведении в исследуемую сыворотку одного компонента – антигена с меткой, который образует со специфическим иммуноглобулином комплекс антиген-антитело. После добавления фермента в сыворотку появляется окрашивание, по интенсивности которого определяют концентрацию комплексов в крови. При непрямом методе в сыворотку добавляют два компонента – антиген-антитело. Специфический антиген в крови оказывается зажатым антителами с обеих сторон (сэндвич метод). Этот способ более чувствительный и точный, что позволяет определить иммуноглобулины в низкой концентрации.

ПЦР

ПЦР – метод лабораторной диагностики, который выявляет генетический материал вируса (ДНК, РНК) в исследуемой биологической жидкости. При помощи анализа можно выявить минимальное количество ДНК/РНК определенного герпесвируса, поэтому обследование обладает высокой специфичностью и информативностью. Диагностику назначают для верификации возбудителя заболевания в период первичного заражения или обострения.

Расшифровка анализа крови на герпес методом ПЦР:

• положительный – в биологической жидкости обнаружен генетический материал вируса;
• отрицательный – в биологической жидкости не обнаружен генетический материал вируса.

ПЦР исследование проводят качественным и количественным методом. В первом случае, выявляют наличие ДНК вируса, во втором – количество генетического материала в биологической жидкости, что свидетельствует об активности и тяжести течения инфекции.

При ПЦР анализе обнаруженный генетический материал вируса подвергают многократному копированию посредством одноцепочечных ДНК (праймеров) и ферментов (ДНК полимеразы). После получения достаточного количества генетического материала дают расшифровку результатов диагностики.

Культуральный метод

Биологический культуральный метод используется редко при сомнительных результатах иммунологического и ПЦР анализа. Для выявления возбудителя инфекции проводят посев на питательные среды, затем следят за ростом герпесвируса. Для культивирования вируса используют живые клетки куриных эмбрионов. Посев проводят на хорион-аллантоисную мембрану, в аллантоисную полость, в желточный мешок, в амниотическую полость. Результат анализа получают через 10-14 дней.

Расшифровка анализа на герпес культуральным методом:

• положительный – посев дал характерные изменения на питательной среде;
• отрицательный – посев не вызвал характерные изменения на питательной среде.

Сдать биоматериал можно в любой период инфекции. Длительный рост вирионов на питательных средах не позволяет применять исследование для быстрой диагностики заболевания.

Подготовка к обследованию

Перед тем, как сдать биоматериал на исследование, необходимо правильно подготовиться. Анализ крови выполняют натощак после голода не менее 6-8 часов. Накануне не следует перегружать рацион жирной, жаренной, острой пищей. Рекомендуют избегать стрессовые ситуации и физическое переутомление. За час до сбора биоматериала рекомендуют воздержаться от курения.

Правильная подготовка к анализам на герпес обеспечит их максимальную достоверность.

Мочу (среднюю порцию) собирают в чистый контейнер после туалета наружных половых органов. Мокроту сплевывают в стерильный контейнер, перед анализом не принимают пищу и не чистят зубы. Соскоб из влагалища и шейки матки проводят стерильным гинекологическим шпателем. За день до исследования необходимо воздержаться от сексуальных контактов, применения вагинальных свечей и таблеток, спринцевания. Сдают мазки после туалета промежности.

Лабораторная диагностика герпеса 1 и 2 типа показана не всем пациентам. Назначение обследования проводит врач после опроса и осмотра больного. Какие анализы необходимо пройти, решает специалист согласно клинической картине, тяжести течения болезни, периода течения заболевания.

Еще по этой теме: