HIV infekcijas testi: procedūras iezīmes un rezultātu interpretācija. Modernās metodes HIV infekcijas diagnosticēšanai Laboratorijas metodes HIV diagnosticēšanai

HIV infekcijas diagnoze agrīnā stadijā ir būtiska. Tas ir atkarīgs no terapijas sarežģītības un attīstības patoloģiskas komplikācijas. Šodien tādu ir daudz inovatīvas metodes pētījumi, lai noteiktu tik briesmīgu diagnozi. Par to tiks runāts tālāk.

Kādas metodes ir pieejamas HIV infekcijas diagnosticēšanai?

Laboratorijas diagnostika

• Tiek noteiktas antivielas, patogēnu antigēni un imūnkompleksi.
• Kad vīruss tiek atklāts, tas tiek kultivēts un tiek atklāts genoma materiāls un fermenti.
• Tiek novērtēta imūnsistēmas funkcionalitāte.
• Tiek veikta cilvēka imūndeficīta vīrusa izplatības epidemioloģiskā uzraudzība un monitorings.
• Tiek pētīta izplatības dinamika un noteikta populācija.
• Ir iespējams noteikt transplantācijas un asins pārliešanas drošības pakāpi.

Diferenciāldiagnoze

• Pie pirmajiem HIV infekcijas simptomiem, kas ir akūtā fāzē, īpaši, ja ir mononukleozei līdzīgs sindroms. Diagnozes pamatā ir tādas patoloģijas kā mononukleoze infekciozs raksturs, sifiliss, masaliņas, adenovīruss, leikēmija in akūta forma, jersinioze, hiperkeratoze.
• Ja HIV pāriet noturīgas ģeneralizētas limfadenopātijas stadijā, tad tiek diferencētas slimības, kurās Limfmezgli palielināt. Piemēram, limfoleikoze, sifiliss, toksoplazmoze, limfogranulomatoze. Šajā fāzē pacienta simptomi kļūst izteiktāki.
• Ja tiek konstatētas sekundāras patoloģijas, tiek diferencēts imūndeficīts, kas radies uz noteiktu zāļu grupu - staru terapijas, glikokortikosteroīdu un citostatisko zāļu lietošanas fona. Imunitāte ievērojami samazinās arī tādās slimībās kā mieloma, limfoleikoze, onkoloģiskās neoplazmas utt.
• Ja HIV atrodas mutes dobums, tad tiek diferencētas mutes gļotādas slimības.

Ekspress diagnostika

• Lielākā daļa precīzs tests ir imūnhromatogrāfija. Tests sastāv no īpašām sloksnēm, uz kurām tiek uzliktas kapilārās asinis, urīns vai siekalas. Ja tiek atklātas antivielas pret HIV, sloksnei ir krāsa un kontroles līnija. Ja atbilde ir nē, ir redzama tikai līnija.
• OraSure Technologies1 komplekti lietošanai mājās. Izstrādātājs - Amerika. Šo testu ir apstiprinājusi FDA.
• Ir arī citi ātrās testi, taču tiem nav speciālistu apstiprinājuma, tāpēc tie nav vēlami testam.

Ja ir atklāta pozitīva reakcija uz cilvēka imūndeficīta vīrusu, ir nepieciešams papildus veikt atbilstošu pārbaudi klīniskā vidē.

Agrīna diagnostika

Lai pašdiagnosticētu patoloģiju uz agrīnās stadijas, pievērsiet uzmanību simptomatoloģijai, kas pastāv šajā gadījumā:

polimerāzes ķēdes reakcija

Šī ir diezgan dārga diagnostika, taču dažos gadījumos tā var sniegt nepatiesu rezultātu. Tāpēc, veicot HIV skrīningu, papildus tiek izmantotas citas metodes.

imūnblotēšana

Rezultātu nosaka asins proteīnu saistīšanās ar proteīniem, kas uzklāti uz nitrocelulozes sloksnes. Ja pacienta ķermenī ir HIV, tad atsevišķas līnijas ir caurspīdīgas. Ir daži indikatori, lai identificētu līnijas, kas norāda uz HIV klātbūtni. Bet ir arī zemi skaitļi. Šajā gadījumā pastāv attīstības risks sākuma stadija cilvēka imūndeficīta vīruss, onkoloģisko audzēju veidošanās, tuberkuloze, asins pārliešana.

ELISA tests

Ir vairāki ELISA testu veidi, taču tiek izmantoti tikai jaunākie sasniegumi – 3. un 4. paaudze. Tehnikas pamatā ir asins šķidruma savākšana no vēnas. Ir noteikts preparāts - pacients nedrīkst ēst 8 stundas pirms pārbaudes. Tāpēc asinis tiek savāktas no rīta tukšā dūšā.

Kā tiek veikta diagnoze inkubācijas periodā?

Pēc tam visu gadu cilvēks atrodas ārstu uzraudzībā un tiek veiktas vairākas pārbaudes. Tikai pēc šī perioda ir iespējams precīzi noteikt diagnozi - HIV.

Diagnozes iezīmes bērniem

Pirmie HIV testi bērnam tiek veikti otrajā dienā pēc dzimšanas. Tad pēc 2 mēnešu sasniegšanas, tad ik pēc 4 mēnešiem.

Lai atklātu patoloģiju bērnība tiek izmantotas seroloģiskās izmeklēšanas metodes, PCR. Tieši pēdējais slimības diagnostikas veids ļauj identificēt vīrusa DNS un RNS pirmajos mazuļa dzīves mēnešos. Šim nolūkam no bērna tiek savāktas asinis, kuras pēc tam ievieto mēģenē, kurā ir EDTA konservants. Tālāk materiāls tiek uzglabāts 2 dienas temperatūrā, kas nepārsniedz 8 grādus. Bet asiņu sasaldēšana nav pieņemama. Var izmantot arī sauso asins šķidrumu, ko iegūst no pilnām asinīm un izžāvē.

Diagnostikas stadijas

• Iepriekšēja šķirošana, jeb skrīnings.
• Atsauces diagnostika.
• Apstiprinošais posms vai ekspertu diagnostika.

Skrīnings – iepriekšēja šķirošana

Jums jāzina, ka ELISA noteiktos apstākļos var dot viltus pozitīvu rezultātu. Tas var būt bērna piedzimšanas periodā ar autoimūnām slimībām (psoriāzi, reimatismu, sarkano vilkēdi utt.), Epšteina-Bara slimību un citām patoloģijām.

Atsauces diagnostika

Apstiprinājuma posms - eksperts

Kļūdas diagnostikas laikā

Lai cik paradoksāli tas nešķistu, pastāv iespēja iegūt viltus pozitīvu rezultātu. Tas parasti notiek mājas testēšanas laikā, īpaši gadījumos, kad tiek izmantotas ātrās pārbaudes. Klīniskā vidē tas ir iespējams tikai ar noteiktām slimībām vai stāvokļiem:

• grūtniecības periods;
• ķermeņa krusteniskā reakcija;
• autoimūnas patoloģiski traucējumi;
• saaukstēšanās akūtā stadijā;
• onkoloģiskās neoplazmas;
• tuberkuloze;
• skleroze.

Iezīme – ja cilvēks ir inficēts ar vīrusiem un sēnītēm, tad arī testa rezultāts var būt nepatiess. Tas jo īpaši attiecas uz alerģiskiem stāvokļiem.

Sagatavošanās testēšanai

• Vispirms jāapmeklē atbilstošs speciālists, lai viņš varētu sniegt precīzus norādījumus par sagatavošanās darbībām.
• Asins analīzes vienmēr tiek ņemtas tukšā dūšā. Tāpēc, pirms došanās uz klīniku, jūs nevarat ēst neko. Jūsu pēdējai ēdienreizei jābūt ne vēlāk kā pulksten 21:00.
• Pārbaudes dienā ir aizliegts smēķēt.
• Nelietojiet alkoholu iepriekšējā vakarā.
• Ja lietojat kādas zāles, noteikti iepriekš konsultējieties ar savu ārstu. Tā kā daudzas zāles ir aizliegtas pirms HIV testu veikšanas.
• Dažas dienas pirms analīzes savākšanas nav ieteicams veikt ultraskaņas izmeklēšanu.
• Dienu vai divas pirms procedūras nav vēlams ēst pārlieku treknu pārtiku un lietot daudz saldumu.

HIV infekcijas diagnostika (video)

Šobrīd jaunās diagnostikas tehnoloģijas ļauj identificēt daudzu slimību etioloģiskos un patoģenētiskos cēloņus un radikāli ietekmēt ārstēšanas rezultātus. Iespējams, iespaidīgākie šo tehnoloģiju ieviešanas rezultāti klīniskajā praksē ir sasniegti imunoloģijas un diagnostikas jomā. infekcijas slimības.

Testu sistēmas, kas balstītas uz enzīmu imūntestu un imūnķīmiluminiscences analīzi, ļauj noteikt dažādu klašu antivielas, kas būtiski palielina infekcijas slimību diagnostikas klīniskās, analītiskās jutības un specifiskuma metožu informācijas saturu. Jāatzīmē, ka būtiskākie sasniegumi infekciju diagnostikā ir saistīti ar polimerāzes ķēdes reakcijas metodes ieviešanu laboratorijas praksē, kas tiek uzskatīta par "zelta standartu" slimību diagnostikā un ārstēšanas efektivitātes novērtēšanā. infekcijas slimību skaits.

Pētījumiem var izmantot dažādus bioloģiskos materiālus: serumu, asins plazmu, skrāpēšanu, biopsiju, pleiras vai cerebrospinālais šķidrums(CSJ). Pirmkārt, metodes laboratorijas diagnostika infekcijas ir vērstas uz tādu slimību identificēšanu kā vīrusu B, C, D hepatīts, citomegalovīrusa infekcija, seksuāli transmisīvās infekcijas (gonoreja, hlamīdijas, mikoplazma, ureaplazma), tuberkuloze, HIV infekcija u.c.

HIV infekcija ir slimība, ko izraisa cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV), ilgu laiku saglabājas limfocītos, makrofāgos, nervu audu šūnās, izraisot lēni progresējošus imūnsistēmas un nervu sistēmas organismu, kas izpaužas ar sekundārām infekcijām, audzējiem, subakūtu encefalītu un citām patoloģiskām izmaiņām.

Infekcijas izraisītāji - 1. un 2. tipa cilvēka imūndeficīta vīrusi (HIV-1, HIV-2) - pieder retrovīrusu saimei, lēno vīrusu apakšdzimtai. Virioni ir sfēriskas daļiņas ar diametru 100-140 nm. Vīrusa daļiņai ir ārējais fosfolipīdu apvalks, kurā ietilpst glikoproteīni (strukturālie proteīni) ar noteiktu molekulmasu, ko mēra kilodaltonos. HIV-1 gadījumā tie ir gpl60, gpl20, gp41. Vīrusa iekšējo apvalku, kas aptver kodolu, attēlo arī proteīni ar zināmu molekulmasu - p17, p24, p55 (HIV-2 satur gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

HIV genoms satur RNS un enzīmu reverso transkriptāzi (revertāzi). Lai retrovīrusa genoms savienotos ar saimniekšūnas genomu, DNS vispirms tiek sintezēta uz vīrusa RNS šablona, ​​izmantojot reversetāzi. Pēc tam provīrusa DNS tiek integrēta saimniekšūnas genomā. HIV ir izteikta antigēnu mainība, kas ievērojami pārsniedz gripas vīrusa antigēnu mainīgumu.

Cilvēka organismā galvenais HIV mērķis ir T-limfocīti, kas atrodas uz virsmas lielākais skaits CD4 receptori. Pēc HIV iekļūšanas šūnā ar reversetāzes palīdzību vīruss sintezē DNS atbilstoši savas RNS shēmai, kas ir integrēta saimniekšūnas ģenētiskajā aparātā (CD4-limfocīti) un paliek tur visu mūžu provīrusa stāvoklī. . Papildus T-limfocītu palīgiem tiek ietekmēti makrofāgi, B-limfocīti, neiroglijas šūnas, zarnu gļotāda un dažas citas šūnas. T-limfocītu (CD4 šūnu) skaita samazināšanās iemesls ir ne tikai vīrusa tiešā citopātiskā iedarbība, bet arī to saplūšana ar neinficētām šūnām. Līdz ar T-limfocītu sakāvi pacientiem ar HIV infekciju tiek novērota B-limfocītu poliklonālā aktivācija, palielinot visu klašu imūnglobulīnu, īpaši IgG un IgA, sintēzi un sekojošu šīs imūnsistēmas sadaļas izsīkumu. Imūnprocesu regulēšanas traucējumi izpaužas arī kā α-interferona, β2-mikroglobulīna līmeņa paaugstināšanās un IL-2 līmeņa pazemināšanās. Imūnsistēmas disfunkcijas rezultātā, īpaši ar T-limfocītu (CD4) skaita samazināšanos līdz 400 šūnām uz 1 μl asiņu vai mazāk, rodas apstākļi nekontrolētai HIV replikācijai ar ievērojamu virionu skaita pieaugumu. dažādās ķermeņa vidēs. Daudzu imūnsistēmas daļu sakāves rezultātā ar HIV inficēts cilvēks kļūst neaizsargāts pret dažādu infekciju patogēniem.

Uz pieaugošas imūnsupresijas fona attīstās smagas progresējošas slimības, kas cilvēkam ar normāli funkcionējošu imūnsistēmu nenotiek. Šīs ir slimības, kuras Pasaules Veselības organizācija (PVO) ir definējusi kā AIDS marķieri vai AIDS definējošās slimības.

AIDS definējošas slimības

Pirmā grupa - slimības, kas raksturīgas tikai smagam imūndeficītam (CD4 līmenis<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Otrā grupa - slimības, kas var attīstīties gan uz smaga imūndeficīta fona, gan dažos gadījumos bez tā.

Tādēļ šajos gadījumos ir nepieciešams diagnozes laboratorisks apstiprinājums.

Pirmā grupa:

• barības vada, trahejas, bronhu kandidoze;
• ekstrapulmonāla kriptokokoze;
• kriptosporidioze ar caureju ilgāk par 1 mēnesi;
• citomegalovīrusa bojājumi dažādos orgānos, izņemot aknas, liesu vai limfmezglus pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi;
• herpes simplex vīrusa izraisīta infekcija, kas izpaužas kā čūlas uz ādas un gļotādām, kas saglabājas ilgāk par 1 mēnesi, kā arī jebkura ilguma bronhīts, pneimonija vai ezofagīts, kas skar pacientu, kas vecāks par 1 mēnesi;
• ģeneralizēta Kapoši sarkoma pacientiem, kas jaunāki par 60 gadiem;
• smadzeņu limfoma (primārā) pacientiem, kas jaunāki par 60 gadiem;
• limfocītu intersticiāla pneimonija un/vai plaušu limfoīdā displāzija bērniem līdz 12 gadu vecumam;
• diseminēta infekcija, ko izraisa netipiskas mikobaktērijas (mikobaktēriju komplekss M. avium intracellulare) ar ekstrapulmonālu lokalizāciju vai lokalizāciju (papildus plaušās) ādā, kakla limfmezglos, plaušu sakņu limfmezglos;
• pneumocystis pneimonija;
• progresējoša multifokāla leikoencefalopātija;
• smadzeņu toksoplazmoze pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi.

Otrā grupa:

• bakteriālas infekcijas, kombinētas vai recidivējošas, bērniem līdz 13 gadu vecumam (vairāk nekā divi gadījumi 2 gadu novērošanas laikā): sepse, pneimonija, meningīts, kaulu vai locītavu bojājumi, hemofilo baciļu izraisīti abscesi, streptokoki;
• izplatīta kokcidioidomikoze (ārpusplaušu lokalizācija);
• HIV encefalopātija (HIV demence, AIDS demence);
• histoplazmoze ar caureju, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi;
• izosporoze ar caureju, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi;
• Kapoši sarkoma jebkurā vecumā;
• smadzeņu limfoma (primārā) jebkura vecuma cilvēkiem;
• citas B-šūnu limfomas (izņemot Hodžkina slimību) vai nezināma imūnfenotipa limfomas: sīkšūnu limfomas (piemēram, Bērkita limfoma utt.); imūnblastiskas sarkomas (imūnblastiskas, lielu šūnu, difūzās histiocītu, difūzās nediferencētās limfomas);
• izplatīta mikobakterioze (ne tuberkuloze) ar bojājumiem papildus ādas plaušām, dzemdes kakla vai bazālajiem limfmezgliem;
• ekstrapulmonāla tuberkuloze (ar iekšējo orgānu bojājumiem, papildus plaušām);
• salmonellas septicēmija, recidivējoša;
• HIV-distrofija (izsīkums, pēkšņs svara zudums).

1. tabulā (skatīt atsauci iepriekš) ir uzskaitītas AIDS definējošās slimības un to etioloģiskie izraisītāji.

Ir daudz AIDS klasifikāciju.

Saskaņā ar jauno klasifikāciju, ko piedāvā ASV Slimību kontroles centrs (2. tabula – skatīt saiti uz avotu iepriekš), AIDS diagnoze tiek noteikta cilvēkiem ar CD4 limfocītu līmeni, kas mazāks par 200/μl, pat AIDS definējošu slimību trūkums.

B kategorijā ietilpst dažādi sindromi, no kuriem svarīgākie ir bacilārā angiomatoze, orofaringeālā kandidoze, recidivējoša vulvovaginālā kandidoze, grūti ārstējama, dzemdes kakla displāzija, dzemdes kakla karcinoma, idiopātiska trombocitopēniskā purpura, listerioze, perifēra neiropātija.

Antivielas pret HIV-1 un HIV-2 asinīs

Asins serumā parasti nav antivielu pret HIV-1 un HIV-2.

Antivielu noteikšana pret HIV ir galvenā HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas metode. Metodes pamatā ir enzīmu imūntests (ELISA) - jutība ir lielāka par 99,5%, specifiskums ir vairāk nekā 99,8%. Antivielas pret HIV parādās 90-95% inficēto 1 mēneša laikā pēc inficēšanās, 5-9% - pēc 6 mēnešiem, 0,5-1% - vēlāk. AIDS stadijā antivielu skaits var samazināties, līdz tas pilnībā izzūd.

Pētījuma rezultāts tiek izteikts kvalitatīvi: pozitīvs vai negatīvs.

Negatīvs testa rezultāts norāda, ka asins serumā nav antivielu pret HIV-1 un HIV-2. Laboratorija izdod negatīvu rezultātu, tiklīdz tā ir gatava. Pēc pozitīva rezultāta - HIV antivielu noteikšanas -, lai izvairītos no viltus pozitīviem rezultātiem laboratorijā, analīzi atkārto vēl 2 reizes.

Imunoblotēšana, lai noteiktu antivielas pret HIV vīrusa proteīniem asins serumā

Asins serumā parasti nav antivielu pret HIV vīrusa proteīniem.

ELISA metode HIV antivielu noteikšanai ir skrīninga metode. Saņemot pozitīvu rezultātu, lai apstiprinātu tā specifiku, tiek izmantota Western-blot metode - pretizgulsnēšana pacienta asins serumā esošo antivielu gēlā ar dažādiem vīrusu proteīniem, kas pakļauti atdalīšanai pēc molekulmasas, izmantojot elektroforēzi, un uzklāti uz nitrocelulozes. Tiek noteiktas antivielas pret vīrusu proteīniem gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17 u.c.

Saskaņā ar Krievijas AIDS profilakses un kontroles centra ieteikumiem antivielu noteikšana pret kādu no glikoproteīniem gp41, gpl20, gpl60 jāuzskata par pozitīvu rezultātu. Ja tiek konstatētas antivielas pret citiem vīrusa proteīniem, rezultāts tiek uzskatīts par apšaubāmu, šāds pacients jāpārbauda divas reizes - pēc 3 un 6 mēnešiem.

Antivielu trūkums pret specifiskiem HIV proteīniem nozīmē, ka enzīmu imūntests sniedza kļūdaini pozitīvu rezultātu. Vienlaikus praktiskajā darbā, izvērtējot imūnblotēšanas metodes rezultātus, ir jāvadās pēc uzņēmuma sniegtajām instrukcijām izmantotajam “Imūnblotēšanas komplektam”.

Imūnblotēšanas metodi izmanto HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai.

p24 antigēns asins serumā

P24 antigēna parasti nav asins serumā.

P24 antigēns ir HIV nukleotīda sienas proteīns. Primāro izpausmju stadija pēc inficēšanās ar HIV ir replikācijas procesa sākuma sekas. P24 antigēns parādās asinīs 2 nedēļas pēc inficēšanās, un to var noteikt ar ELISA testu laika posmā no 2 līdz 8 nedēļām. Pēc 2 mēnešiem no inficēšanās brīža p24 antigēns pazūd no asinīm. Nākotnē HIV infekcijas klīniskajā gaitā tiek novērots otrs p24 proteīna satura pieaugums asinīs. Tas attiecas uz AIDS veidošanās periodu. Esošās ELISA testu sistēmas p24 antigēna noteikšanai tiek izmantotas HIV agrīnai atklāšanai asins donoriem un bērniem, AIDS gaitas prognozes noteikšanai un AIDS pacientu notiekošās terapijas uzraudzībai. ELISA ir augsta analītiskā jutība, kas ļauj noteikt HIV-1 p24 antigēnu asins serumā koncentrācijā 5-10 pg/ml un HIV-2 - mazāku par 0,5 ng/ml, un specifiskumu. Tomēr jāņem vērā, ka p24 antigēna līmenis asinīs ir pakļauts individuālajām variācijām, kas nozīmē, ka, izmantojot šo pētījumu, agrīnā periodā pēc inficēšanās var noteikt tikai 20-30% pacientu (Rose N.R. et al., 1997).

Antivielas pret IgM un IgG klases antigēnu p24 parādās asinīs no 2. nedēļas, sasniedz maksimumu 2-4 nedēļu laikā un saglabājas šajā līmenī dažādu laiku: IgM klases antivielas - vairākus mēnešus, izzūd gada laikā pēc. infekcija, un IgG antivielas var saglabāties gadiem ilgi.

HIV infekcijas diagnosticēšanas algoritms ir atkarīgs no slimības fāzes, un to raksturo dažādu klašu antivielu noteikšanas dinamikas izmaiņas (1., 2. att. - skatīt saiti uz iepriekš minēto avotu).

Pētījuma rezultāts tiek izteikts kvalitatīvi – pozitīvs vai negatīvs. Negatīvs testa rezultāts norāda uz antivielu pret HIV-1 un HIV-2 un p24 antigēna neesamību asins serumā.

Laboratorija izdod negatīvu rezultātu, tiklīdz tā ir gatava. Pēc pozitīva rezultāta - HIV-1 un HIV-2 un/vai p24 antigēna antivielu noteikšanas -, lai izvairītos no viltus pozitīviem rezultātiem laboratorijā, analīzi atkārto vēl 2 reizes.

Neatkarīgi no iegūtajiem testa rezultātiem pacienta asins paraugu un 3 izmeklējumu rezultātus laboratorija nosūta uz reģionālo AIDS centru, lai apstiprinātu pozitīvu rezultātu vai pārbaudītu nenoteiktu rezultātu. Šādos gadījumos reģionālais AIDS centrs sniedz galīgo atbildi šim pētījumam.

HIV noteikšana ar polimerāzes ķēdes reakciju (kvalitatīvi)

HIV noteikšana ar polimerāzes ķēdes reakciju - PCR (kvalitatīvi) tiek veikta, lai:

• apšaubāmu imūnblotu rezultātu atrisināšana;
• agrīnai HIV infekcijas diagnostikai;
• pretvīrusu ārstēšanas efektivitātes uzraudzība;
• AIDS slimības stadijas noteikšana (infekcijas pāreja uz slimību).

Primārās inficēšanās ar HIV gadījumā PCR metode ļauj noteikt HIV RNS asinīs jau 10-14 dienas pēc inficēšanās.

Pētījuma rezultāts tiek izteikts kvalitatīvi: pozitīvs vai negatīvs. Negatīvs testa rezultāts norāda uz HIV RNS neesamību asinīs.

Pozitīvs rezultāts - HIV RNS noteikšana - norāda uz pacienta inficēšanos.

HIV noteikšana ar polimerāzes ķēdes reakciju (kvantitatīvi)

HIV parasti asinīs nav.

HIV RNS tieša kvantitatīvā noteikšana, izmantojot PCR, ļauj precīzāk nekā CD4 šūnu satura noteikšana prognozēt AIDS attīstības ātrumu HIV inficētām personām, tādējādi precīzāk novērtēt viņu izdzīvošanu. Augsts vīrusu daļiņu saturs parasti korelē ar izteiktu imūnsistēmas stāvokļa pārkāpumu un zemu CD4 šūnu saturu. Zems vīrusu daļiņu skaits parasti korelē ar labāku imūno stāvokli un lielāku CD4 šūnu skaitu. Vīrusa RNS saturs asinīs ļauj paredzēt slimības pāreju uz klīnisko stadiju. Ja HIV RNS-1 līmenis pārsniedz 74 100 kopijas/ml, attīstās gandrīz visi pacienti klīniskā aina AIDS (Senior D., Holden E., 1996).

Cilvēkiem ar HIV-1 līmeni asinīs >10 000 kopijām/ml ir 10,8 reizes lielāka iespēja saslimt ar AIDS nekā cilvēkiem ar HIV-1 līmeni asinīs.<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

ASV ekspertu grupa ir izstrādājusi indikācijas HIV pacientu ārstēšanai. Ārstēšana ir indicēta pacientiem ar CD4 skaitu asinīs<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 kopiju/ml (PCR). Antiretrovīrusu terapijas rezultātu novērtējums ar HIV inficētiem cilvēkiem tiek veikts, samazinot HIV RNS līmeni serumā.

Ar efektīvu ārstēšanu virēmijas līmenim pirmo 8 nedēļu laikā jāsamazina 10 reizes un jābūt zem metodes noteikšanas robežas (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

Līdz ar to līdz šim klīniskajā praksē HIV infekcijas, tāpat kā visu citu vīrusu infekciju, diagnosticēšanai ir ieviestas un izmantotas daudzas pētījumu metodes. Starp tiem galvenā loma ir seroloģiskajiem pētījumiem. Galvenās HIV infekciju diagnostikas metodes ir parādītas 3. tabulā (skat. saiti uz avotu iepriekš), kur tās ir sadalītas atkarībā no katras vīrusu noteikšanas metodes nozīmīguma četros līmeņos:

• A - testu parasti izmanto, lai apstiprinātu diagnozi;
• B - tests noteiktos apstākļos ir noderīgs noteiktu infekcijas formu diagnosticēšanai;
• C - tests tiek reti izmantots diagnostikas nolūkos, bet tam ir liela nozīme epidemioloģiskajos pētījumos;
• D - testu laboratorijas parasti neizmanto diagnostikas nolūkos.

Tā kā vīrusu infekciju diagnostikai papildus optimālās analīzes metodes izvēlei ir vienlīdz svarīgi pareizi noteikt un paņemt pētniecībai biomateriālu, 4. tabulā (skat. saiti uz iepriekš minēto avotu) sniegti ieteikumi optimālā biomateriāla izvēlei. HIV infekcijas izpētei.

Lai uzraudzītu ar HIV inficētos cilvēkus, jāizmanto iespējas visaptveroši izpētīt imūno stāvokli - kvantitatīvi un funkcionāli noteikt visas tās saites: humorālo, šūnu imunitāti un nespecifisko rezistenci kopumā.

Mūsdienu laboratorijas apstākļos daudzpakāpju imunoloģiskā stāvokļa novērtēšanas princips ietver limfocītu, asins imūnglobulīnu apakšpopulācijas noteikšanu. Izvērtējot rādītājus, jāņem vērā, ka HIV infekcijai raksturīgs CD4 / CD8 T šūnu attiecības samazinājums mazāks par 1. CD4 / CD8 indekss 1,5-2,5 - liecina par normerģisku stāvokli, vairāk nekā 2,5 - norāda uz hiperaktivitāti. , mazāk 1,0 - norāda uz imūndeficītu. Arī smaga iekaisuma gadījumā CD4/CD8 attiecība var būt mazāka par 1.

Šai attiecībai ir fundamentāla nozīme AIDS pacientu imūnsistēmas novērtēšanā, jo HIV selektīvi inficē un iznīcina CD4 limfocītus, kā rezultātā CD4 / CD8 attiecība samazinās līdz vērtībām, kas ir ievērojami mazākas par 1.

Imunoloģiskā stāvokļa novērtējums balstās arī uz vispārēju vai "rupju" šūnu un humorālās imunitātes sistēmas defektu noteikšanu: hipergammaglobulinēmija (paaugstināta IgA, IgM, IgG koncentrācija) vai hipogammaglobulinēmija terminālā stadijā; cirkulējošo imūnkompleksu koncentrācijas palielināšanās; samazināta citokīnu ražošana; limfocītu reakcijas uz antigēniem un mitogēniem pavājināšanās.

Populāciju attiecības pārkāpums kopējā B-limfocītu baseinā ir raksturīgs humorālās imunitātes nepietiekamībai. Tomēr šīs izmaiņas nav raksturīgas HIV infekcijai un var rasties citu slimību gadījumā. Vispusīgi novērtējot vairākus citus laboratoriskos parametrus, jāņem vērā, ka HIV infekciju raksturo arī: anēmija, limfopēnija un leikopēnija, trombocitopēnija, paaugstināts β2-mikroglobulīna un C-reaktīvā proteīna līmenis, transamināžu aktivitātes palielināšanās asins serumā.

AIDS var atklāt tikai īpaši testi. Pats testēšanas process sastāv no antivielu noteikšanas, kuras organisms ražo, reaģējot uz vīrusa parādīšanos. Laboratoriskās AIDS diagnosticēšanas metodes ietver četrus testus, kas tiek izmantoti šīs slimības noteikšanai.

Pirmā - ELISA (enzīmu imūnsorbcijas pārbaude) ir visizplatītākā diagnostikas metode. Šī analīze var noteikt organismā uzkrāto antivielu daudzumu. Parasti tas ir iespējams tikai tad, ja vīruss ir nokļuvis asinsritē un kopš tā laika ir pagājuši trīs mēneši. Kā liecina prakses rezultāti, viens procents gadījumu sniedz viltus negatīvu vai viltus pozitīvu rezultātu.

Kļūdaini negatīvs rezultāts ir iespējams, ja vēl nav izveidotas antivielas pret vīrusu vai ja AIDS ir beigu stadijā, tas ir, vīruss ir asinīs, bet tā ir tik daudz, ka antivielas un CD-4 šūnas praktiski nav. Lai pārbaudītu negatīvu rezultātu, varat atkārtoti veikt ELISA, bet tikai pēc 3 mēnešiem.

Vairumā gadījumu viltus pozitīvs rezultāts dod pacientu aptauju, kas cieš no hroniskām autoimūnām, infekcijas, onkoloģiskām un citām slimībām. Viltus pozitīvi rezultāti var rasties arī grūtniecēm. Tāpēc katrs pozitīvais rezultāts obligāti tiek pārbaudīts atkārtoti, bet tikai imūnblotā - tas ir jutīgāks tests.

Ja imūnblota rezultāts ir pozitīvs, īpaši pēc ELISA rezultāta, tad ticamība ir 99,9%, un tā ir maksimālā medicīniskās pārbaudes precizitāte (izņemot jebkuru).

Otrais ir imūnblots (pilnīga imūnblotēšana). Šis tests nosaka specifisku HIV antivielu klātbūtni. Šajā gadījumā rezultāts ir negatīvs, pozitīvs, apšaubāms (to sauc arī par nenoteiktu).

Apšaubāms rezultāts var norādīt uz HIV klātbūtni asinsritē, pret kuru organisms vēl nav izstrādājis visu antivielu klāstu. Šajā gadījumā antivielas pret HIV serumā parādās pēc 1-3-6 mēnešiem. viens pēc otra, no brīža, kad tika iegūts pirmais apšaubāmais rezultāts. Ja rezultāti tiek apstiprināti, tas norāda uz HIV infekciju sākotnējā stadijā

Nenoteikts šī testa rezultāts var liecināt par pretējo. Pati HIV infekcija nepastāv, taču cilvēka organismā dzīvo antivielas, kas ir līdzīgas antivielām pret HIV. Parasti apšaubāms rezultāts ir grūtniecēm, tuberkulozes slimniekiem, recipientiem, vēža slimniekiem, kā arī tiem, kam asins pārliešana (t.i., asins pārliešana) veikta atkārtoti. Pacientu, kuram šī testa rezultāts uzrādīja nenoteiktību, infektologs novēro sešus mēnešus un pārbauda pēc 1-3-6 mēnešiem.

Trešais ir PCR (polimerāzes ķēdes reakcija). Šī AIDS diagnoze ļauj noteikt vīrusa DNS un RNS. Šī ir diezgan jutīga un efektīva reakcija, kas ļauj iegūt rezultātu, pārbaudot DNS. Šajā gadījumā DNS tiek ņemta no vienas šūnas un pārbaudīta, reizinot raksturīgās DNS sekvences

Šis tests attiecas uz:

• lai noteiktu, kurš vīruss atrodas organismā (ir HIV 1 un HIV-2);
• noteikt HIV esamību vai neesamību;
• noteikt un uzraudzīt vīrusu slodzi;
• lai noteiktu HIV statusu jaundzimušajam, kurš dzimis HIV inficētai mātei.

Šis tests ir ļoti jutīgs: tas var atklāt vīrusu pat tad, ja kopš iespējamā inficēšanās brīža ir pagājušas apmēram desmit dienas. Šī testa augstā jutība reaģē arī uz citām infekcijām, tāpēc tas bieži sniedz viltus pozitīvus rezultātus. Šīs pārbaudes rezultāti nav pamats galīgai diagnozei.

Šīs pārbaudes veikšanai ir nepieciešams augsti kvalificēts medicīnas personāls un sarežģītas laboratorijas iekārtas. Tas ir dārgs tests, tāpēc to neizmanto bezmaksas HIV testos.

Ceturtais ir ātrā pārbaude. Šo testu izmanto galvenokārt ārkārtas gadījumos - dzemdību laikā, veselības apsvērumu dēļ operācijas laikā. Ātrā testa rezultāts parasti tiek apstiprināts ar kārtējo HIV testu.

HIV infekcijas klīniskā un laboratoriskā diagnostika ir trīs virzieni:

1. HIV infekcijas fakta konstatēšana, HIV infekcijas diagnostika.
2. Slimības klīniskās gaitas stadijas noteikšana un sekundāro slimību noteikšana.
3. Slimības klīniskās gaitas progresēšanas prognoze, pretretrovīrusu zāļu ārstēšanas efektivitātes un blakusparādību laboratoriskā kontrole.

1. HIV infekcijas konstatēšana, HIV infekcijas diagnostika

HIV infekcijas noteikšanai tiek izmantoti šādi specifiski indikatori: antivielas pret HIV, HIV antigēni, HIV RNS un provīrusa DNS. Antivielas pret HIV nosaka ar enzīmu imūntestu (ELISA) vai imūnblotēšanu, kas būtībā ir ELISA veids. HIV antigēnus (olbaltumvielas) nosaka ar ELISA. Ar polimerāzes ķēdes reakcijas (PNR) un bDNS molekulāri ģenētisko metožu palīdzību iespējams noteikt HIV RNS un provīrusa DNS. Papildu metodes izmantošana nukleīnskābju hibridizācijai ar specifiskām DNS zondēm ļauj pārbaudīt PCR laikā iegūto DNS sekvenču specifiku. PCR jutība - vīrusu gēnu noteikšana vienā no pieciem tūkstošiem šūnu.

Primārās infekcijas laikā tiek novērota šāda HIV marķieru dinamika inficēto asinīs. Pirmajā mēnesī replikācijas procesa aktivizēšanās rezultātā strauji palielinās vīrusu slodze (HIV RNS saturs plazmā), pēc tam, pateicoties vīrusa izplatībai un masveida mērķa šūnu inficēšanās asinīs un limfmezgli, kļūst iespējams noteikt provīrusu DNS. Sevišķa diagnostiskā vērtība ir provīrusa DNS noteikšanas fakts, kas integrēts mērķa šūnas genomā.

Vīrusu slodze atspoguļo replikācijas procesa intensitāti inficētajās šūnās. Primārās infekcijas periodā, inficējoties ar dažādiem HIV apakštipiem, vīrusu slodzes līmenis ir atšķirīgs, bet tā izmaiņu dinamika ir aptuveni vienāda. Tātad, ja inficējas ar B apakštipu, piemēram, ja pirmajā mēnesī pēc inficēšanās vīrusa slodzes vērtība ir 700 kopijām/ml, tad 2. mēnesī ir samazinājums līdz 600, 3. - līdz 100, in 4. - līdz 50 kopijām / ml. Šāda dinamika tiek novērota, ņemot vērā specifisko antivielu pret HIV saturu palielināšanos asinīs. Provīrusu DNS saturam HIV inficētu pacientu asins mononukleārajās šūnās ir raksturīga relatīva noturība pirmajos 6 mēnešos ar nelielām svārstībām dažos apakštipos. Tādējādi RNS un DNS slodzes nav identiskas.

Inkubācijas stadijā kādu laiku neveidojas specifiskas antivielas pret HIV tādā daudzumā, lai tās varētu noteikt ar esošajām laboratorijas metodēm. Pirms antivielu noteikšanas ļoti īsu laiku asinīs tiek novērots Nef proteīna, kas nomāc replikācijas procesu, un strukturālā proteīna p24 parādīšanās. P24 antigēnu asinīs var noteikt ar enzīmu imūnsorbcijas testu jau 1-2 nedēļas pēc inficēšanās un var noteikt līdz 8. nedēļai, pēc tam tā saturs strauji samazinās. Turklāt HIV infekcijas klīniskajā gaitā tiek novērots otrs p24 proteīna satura pieaugums asinīs. Tas attiecas uz AIDS veidošanās periodu. Brīvo (ar antivielām nesaistītu) p24 kodolproteīnu izzušana asinīs un specifisku antivielu parādīšanās pret HIV proteīniem iezīmē serokonversijas sākumu (9.6. att.).

Virēmija un antigēnēmija izraisa specifisku IgM klases antivielu veidošanos (anti-p24, anti-gp41, anti-gp120, anti-gp160). Brīvās IgM un IgG klases antivielas pret p24 proteīnu var parādīties, sākot ar 2. nedēļu, to saturs palielinās 2-4 nedēļu laikā, sasniedzot noteiktu līmeni, kas saglabājas mēnešiem (IgM) un gadiem (IgG) (9.7. att. ).

Pilnīgas serokonversijas parādīšanās, kad perifērajās asinīs tiek reģistrēts augsts specifisku IgG antivielu līmenis pret HIV strukturālajiem proteīniem p24, gp41, gp120, gp160, ievērojami atvieglo HIV infekcijas diagnostiku. Antivielas pret HIV parādās 90-95% inficēto 3 mēnešu laikā pēc inficēšanās, 5-9% - laika posmā no 3 līdz 6 mēnešiem no inficēšanās brīža un 0,5-1% - vēlāk.

Neskatoties uz to, ka antivielas pret HIV parādās pēdējās, galvenais laboratorijas diagnostikas rādītājs līdz šim ir specifisku antivielu noteikšana ar ELISA un imūnblotēšanas metodi.

Dati parādīti 9.2. tabulā [rādīt] un 9.3 [rādīt] , skaidri parāda mūsdienu ELISA testu sistēmu augsto jutību HIV antivielu noteikšanā, kas pārsniedz imūnblotēšanas jutīgumu. Dažos gadījumos, saņemot primāri pozitīvu ELISA rezultātu, to imūnblotēšanā var apstiprināt tikai pēc 2-3 nedēļām.

Izmeklējot HIV inficētos (HIV inficētos) pacientus, izmantojot pasaules vadošo uzņēmumu imūnblotēšanas testu sistēmas, visos gadījumos tiek konstatētas antivielas pret gp160 un p24/25, antivielas pret citiem proteīniem tiek konstatētas 38,8-93,3% gadījumu (1.tabula). 9.4 [rādīt] ).

Antivielu noteikšanas grūtības pacientiem ar HIV infekciju var rasties masīvas virēmijas un antigēnēmijas periodos, kad esošās specifiskās antivielas asinīs ir saistītas ar vīrusu daļiņām un replikācijas process ir priekšā jaunu pretvīrusu antivielu ražošanai. Šī situācija var rasties un iet infekcijas procesa laikā.

Pacientiem ar sākotnēji novājinātu imūnsistēmu virēmija un antigenēmija parādās agrāk un saglabājas augstā līmenī līdz slimības iznākumam. Šādiem pacientiem ir zems brīvo antivielu saturs pret HIV divu iemeslu dēļ - nepietiekama antivielu ražošana ar B-limfocītiem un antivielu saistīšanās ar virioniem un šķīstošiem HIV proteīniem, tāpēc, lai noteiktu infekciju, testu sistēmas ar paaugstinātu jutību vai modifikācijām. ir nepieciešamas analīzes metodes, kas ietver antivielu atbrīvošanās stadiju no imūnkompleksiem.

Visbiežāk HIV antivielu satura samazināšanās norādīto iemeslu dēļ notiek beigu stadijā, kad HIV antivielas griezuma serumā var nenotvert ar enzīmu imūnanalīzes metodēm, ne ar imūnblotēšanu (Western blot). Papildus specifisku antivielu parādīšanās pret HIV, imūnreakcija pirmajos 4 mēnešos ir raksturīga ar inficētā CD4+ satura samazināšanos asinīs un CD8+ šūnu skaita palielināšanos. Turklāt šūnu saturs, kas satur CD4 un CD8 receptorus, stabilizējas un kādu laiku paliek nemainīgs. CD8-limfocītu satura palielināšanās ir aizsargreakcija, jo. no šūnām atkarīgo citotoksicitāti realizē CD8+-limfocīti, kuru mērķis ir HPV inficēto šūnu iznīcināšana. Sākotnēji citotoksiskie limfocīti (CTL) reaģē uz vīrusa Nef regulējošo proteīnu, kam ir svarīga loma vīrusu (RNS) slodzes samazināšanā HIV inficētas personas plazmā pirmajos mēnešos. Tad veidojas CTL atbilde citiem, t.sk. HIV strukturālās olbaltumvielas, kā rezultātā 12 mēnešus pēc inficēšanās ievērojami palielinās cptotoksiskais efekts.

Shēmas HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai

Ņemot vērā doto specifisko HIV infekcijas marķieru dinamiku, praksē ieteicams ievērot šādas pieaugušo laboratoriskās diagnostikas shēmas (9.8.-9.10. att.).

Shēmas atspoguļo trīs galvenos HIV infekcijas primārās laboratoriskās diagnostikas posmus:

1. Skrīnings.
2. Atsauce.
3. Eksperts.

Nepieciešamība pēc vairākiem laboratoriskās diagnostikas posmiem galvenokārt ir saistīta ar ekonomiskiem apsvērumiem. Tā, piemēram, viena eksperta pētījuma veikšanas izmaksas, izmantojot vietējās testēšanas sistēmas ar imūnblotēšanu, ir līdz 40 ASV dolāriem, skrīnings (ar ELISA) ir aptuveni 0,2, tas ir, attiecība ir 1:200.

Pirmajā posmā (9.8. att.) subjektiem tiek pārbaudītas antivielas pret HIV, izmantojot vienu ELISA testu sistēmu, kas paredzēta, lai noteiktu antivielas pret abiem vīrusa veidiem - HIV-1 un HIV-2.

Ražotāji ierosinātajās testa sistēmās kā antigēnu bāzi izmanto vīrusu lizātu, rekombinantos proteīnus, sintētiskos peptīdus. Katram no uzskaitītajiem HIV antigēnu noteicošo faktoru nesējiem ir savas priekšrocības un trūkumi. Tāpēc, izvēloties aptuveni vienādu izmaksu testa sistēmas, priekšroka jādod komplektiem ar visaugstāko jutību (vēlams 100%). Starp testu sistēmām ar vienādu izmaksu un jutīguma līmeni ir ieteicams pakavēties pie tām, kurām ir maksimāla specifika.

Pamatojoties uz vīrusa lizātu, tika izveidotas pirmās testu sistēmas HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai. Astoņdesmitajos gados šādām testu sistēmām bija raksturīga jutība, kas bija mazāka par 100%, un zema specifika, kas izpaudās ar lielu skaitu (līdz 60%) viltus pozitīvu rezultātu.

Viriona veidošanās laikā limfocītu kultūrā tā apvalks tiek izveidots no ārējās membrānas un tāpēc satur I un II klases galvenā histokompatibilitātes kompleksa antigēnus. Šis apstāklis ​​izraisa viltus pozitīvas reakcijas, ja pacientu asinīs ir antivielas pret histokompatibilitātes alloantigēniem.

Vēlāk vīrusa iegūšanai tika ierosināts izmantot makrofāgu kultūru, kurā vīrusu daļiņas veidojas galvenokārt intracelulāri, pumpuroties nevis no šūnas ārējās membrānas, bet gan no endoplazmatiskā tīkla membrānām. Šī tehnoloģija ir samazinājusi viltus pozitīvu rezultātu skaitu.

Enzīmu imūntesti ir atzīti par vienu no labākajiem svarīgāko īpašību - jutības un specifiskuma - ziņā, kā daļu no attīrīta vīrusa lizāta kombinācijas ar sintētiskiem peptīdiem, kas ir vīrusa proteīnu antigēniem nozīmīgākie reģioni, vai tiek izmantoti rekombinantie proteīni.

Pārbaudes sistēmas jutīgums ir atkarīgs arī no citu komplektu sastāvdaļu īpašībām. Tādējādi testa sistēmas, kurās izmanto konjugātus, kas atpazīst ne tikai IgG klases, bet arī IgM un IgA antivielas, ļauj noteikt agrāku serokonversijas fāzi. Šķiet daudzsološi izmantot testu sistēmas, kas spēj vienlaicīgi noteikt gan pretvīrusu antivielas, gan p24 antigēnu, kas HIV infekcijas laboratorisko diagnostiku padara vēl agrāk.

Sākotnējais pozitīvais rezultāts ir atkārtoti jāpārbauda, ​​atkārtoti pārbaudot paraugu tajā pašā testēšanas sistēmā, bet vēlams citā partijā un citam laboratorijas palīgam. Ja otrajā pārbaudē tiek iegūts negatīvs rezultāts, izmeklējumu veic trešo reizi.

Pēc pozitīva rezultāta apstiprināšanas vēlams atkārtoti paņemt asinis un primāri pārbaudīt, vai tajās nav antivielu pret HIV. Atkārtota asins paraugu ņemšana palīdz novērst kļūdu, ko izraisa neprecīza stobriņu marķēšana un nosūtīšanas veidlapu aizpildīšana.

Serums pozitīvs skrīninga stadijā tiek nosūtīts atsauces pētījumiem, ko veic, izmantojot divas vai trīs ļoti specifiskas ELISA testu sistēmas. Divu pozitīvu rezultātu gadījumā tiek veikts ekspertu pētījums ar imūnblotēšanu.

Ar enzīmu saistītu imūnsorbcijas testu izmantošana atsauces diagnostikā, ko var izmantot, lai diferencētu specifiskas antivielas pret HIV-1 un HIV-2, atvieglo turpmāko darbu un ļauj nekavējoties izmeklēt pozitīvu paraugu eksperta stadijā, izmantojot atbilstošu imūnblotēšanu ( HIV-1 vai HIV-2).

Laboratorijas ekspertīzes atzinums par HIV infekciju tiek izsniegts, tikai pamatojoties uz pozitīvu Western blot rezultātu. Veicot ekspertu diagnostiku, ir jāizmanto 1990. gadā PVO ekspertu grupas piedāvātā HIV gēnu un gēnu produktu nomenklatūra (9.5. tabula). [rādīt] ).

Imūnblota joslu specifika ir jāizvērtē ļoti rūpīgi un rūpīgi, izmantojot kontroles serumu (pozitīvo un negatīvo) pētījumu rezultātus, kas tiek veikti paralēli eksperimentālo paraugu izpētei, un imūnblota paraugu ar apzīmējumu. HIV proteīnu (ražotājs pievienojis testa sistēmai). Iegūto rezultātu interpretācija jāveic saskaņā ar pārbaudes sistēmai pievienotajām instrukcijām. Parasti pozitivitātes kritērijs ir obligāta antivielu klātbūtne pret diviem proteīniem (prekursoru, ārējo vai transmembrānu), ko kodē env gēns, un iespējamā antivielu klātbūtne pret divu citu strukturālo HIV gēnu produktiem - gag un pol ( 9.6. tabula [rādīt] ).

Apšaubāma rezultāta iegūšanas gadījumā imūnblotēšanas rezultātu galīgai precizēšanai nepieciešams izmantot ieteikumu sarakstu (9.7. tabula). [rādīt] ).

Saskaņā ar Krievijas AIDS profilakses un kontroles zinātniski metodiskā centra ieteikumiem par pozitīvu rezultātu uzskata, ja ir antivielas pret vismaz vienu no proteīniem gp41, gp120, gp160 kombinācijā ar antivielām pret citu specifisku HIV-1. olbaltumvielas vai bez tiem. Šie ieteikumi ir balstīti uz pieredzi ar serumiem no bērniem no nozokomiālajiem perēkļiem, kuros bieži tika konstatētas antivielas tikai pret vienu no vīrusa apvalka proteīniem.

Lielākā daļa sākotnēji izmeklēto pacientu ar seropozitīviem ELISA testiem pieder pastāvīgas ģeneralizētas limfadenopātijas (PGL) fāzei vai asimptomātiskajai fāzei. Tāpēc uz imūnblota (nitrocelulozes sloksne, uz kuras ir imobilizēti HIV proteīni) parasti tiek noteikta šāda antivielu kombinācija pret HIV-1: antivielas pret apvalka proteīniem gp160, gp120 un gp41, ko kodē env gēns, kombinācijā ar antivielām pret p24 core proteīni (olbaltumvielu nukleokapsīds, ko kodē gag gēns) un p31/34 (endonukleāze, ko kodē pol gēns).

Pozitīvas reakcijas tikai ar gag un/vai pol proteīniem var rasties serokonversijas agrīnā fāzē, kā arī liecina par infekciju, ko izraisa HIV-2, vai nespecifisku reakciju.

Ja tiek iegūts apšaubāms rezultāts, HIV inficēšanās fakta noskaidrošanai iespējams izmantot dažādus metodiskos paņēmienus.

Atkarībā no tehniskajām iespējām (diagnostikas komplektu un reaģentu pieejamība, aprīkojums ar speciālu aprīkojumu un personāla apmācība) ekspertu laboratorija veic papildu diagnostikas pētījumus (9.10. att.).

Dažos gadījumos ir ieteicams izmantot molekulārās ģenētiskās metodes, lai noteiktu HIV ģenētiskās sekvences serumā, asins limfocītos vai limfmezglu punkcijās. PCR iegūto DNS sekvenču specifikas pārbaudi var veikt, hibridizējot nukleīnskābes ar specifiskām DNS zondēm.

Radioimunoprecipitācijas (RIP) un netiešās imunofluorescences (IFl) metodes var izmantot arī, lai galīgi pārbaudītu serumus ar apšaubāmiem imūnblota rezultātiem.

HIV RNS noteikšanai plazmā ar kvalitatīvu vai kvantitatīvu metodi HIV infekcijas diagnosticēšanai nav nozīmes. Šāds rezultāts jāapstiprina ar standarta metodēm, piemēram, imūnblotēšanu, 2-4 mēnešus pēc sākotnējās apšaubāmas vai negatīvas atbildes saņemšanas.

HIV izolācija šūnu kultūrā ir galīgā patiesība. Taču metode ir sarežģīta, dārga un tiek veikta tikai speciāli aprīkotās pētniecības laboratorijās.

CD4+ šūnu saturs asinīs ir nespecifisks rādītājs, tomēr strīdīgos gadījumos (ELISA "+", imūnblots "-", HIV infekcijas/AIDS klīnisko pazīmju klātbūtne) to var izmantot kā vadlīniju. eksperta lēmuma pieņemšanai. Ja laboratorijā ir iespēja veikt tikai imūnblotēšanu, tad jāievēro 1. tabulā sniegtie ieteikumi. 9.7 un attēlā. 9.9.

Personām, kuru serumā ir apšaubāmi (nenoteikti) ekspertīzes rezultāti, izņemot gadījumus, kad tiek konstatētas antivielas tikai pret p17 (HIV-1) vai p16 (HIV-2), atkārtoti jāpārbauda 6 mēnešu laikā (pēc 3 mēnešiem). Patiesas HIV infekcijas gadījumā pēc 3-6 mēnešiem antivielu spektrā ir novērojama "pozitīva" tendence - papildus veidojas antivielas pret citiem vīrusa proteīniem. Viltus reakciju raksturo neskaidra imūnblota modeļa saglabāšanās ilgu laiku vai aizdomīgu joslu izzušana. Ja pēc noteiktā laika perioda atkārtotas imūnblotēšanas rezultāti ir negatīvi vai rada šaubas, tad, ja nav riska faktoru, klīnisku simptomu vai citu ar HIV infekciju saistītu faktoru, personu var uzskatīt par seronegatīvu attiecībā uz antivielām pret HIV. 1 un HIV-2.

Kļūdaini pozitīvi rezultāti, jo pacientu asinīs ir antivielu saturs pret histo-saderības alloantigēniem, kas ir daļa no HIV apvalka, imūnblotā parādās joslu veidā gp41 un gp31 līmenī. Citu nespecifisku reakciju cēloņi (piemēram, uz p24, bieži sastopami indivīdiem ar autoimūniem procesiem) vēl nav noskaidroti.

Enzīmu imūntestu sistēmu ražošanas tehnoloģijas uzlabošana ļāvusi sasniegt augstu jutību - līdz 99,99%, savukārt imūnblotēšanas metodes jutība ir 97%. Tāpēc negatīvs imūnblota rezultāts ar pozitīviem ELISA rezultātiem var norādīt uz sākotnējo serokonversijas periodu, kam raksturīgs zems specifisku antivielu līmenis. Tādēļ ir nepieciešams atkārtot pētījumu pēc 1,5-2 mēnešiem, tas ir, pēc laika, kas nepieciešams serokonversijas pabeigšanai, lai sasniegtu specifisko antivielu koncentrāciju asinīs, kas ir pietiekama, lai tās varētu noteikt ar imūnblotēšanu.

Pozitīvs pētījuma rezultāts (rezultāti) HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas atsauces vai tikai skrīninga stadijā, tas ir, pozitīvs rezultāts jebkurā enzīmu imūnanalīzes testu sistēmā, kas galu galā nav apstiprināts ar ekspertu metodēm, tiek interpretēts kā krustojuma klātbūtne. -reaktīvās antivielas izmeklējamo antivielu asinīs. Krustreaktivitāte attiecas uz antivielu saistīšanos ar nespecifiskām vietām uz HIV proteīniem vai peptīdiem, ko izmanto kā antigēnu bāzi testa sistēmā, kurā tiek iegūts pozitīvs rezultāts.

Ja nav imūndeficīta un HIV infekcijas klīnisku pazīmju, šādas personas tiek uzskatītas par seronegatīvām attiecībā uz antivielām pret HIV, un tās ir jāreģistrē.

Galīgā HIV infekcijas diagnoze tiek noteikta, tikai pamatojoties uz visiem klīniskajiem, epidemioloģiskajiem un laboratorijas datiem. Tikai ārstējošajam ārstam ir tiesības informēt pacientu par HIV infekcijas diagnozi.

Galvenā HIV infekcijas apstiprinošās (ekspertu) laboratoriskās diagnostikas metode ir imūnblotēšana. Tomēr, ņemot vērā tā zemāko jutību salīdzinājumā ar ELISA, vairāki pētnieki ir ierosinājuši izmantot vairāku testu sistēmu kombināciju, lai galīgi noteiktu specifisku antivielu klātbūtni pret HIV. Piemēram, G. van der Groens et al. ierosināja alternatīvu imūnblotēšanas metodei HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas skrīninga posma pozitīvo rezultātu pārbaudei. Tas ietver materiāla paralēlu izpēti trīs testu sistēmās, kuru pamatā ir dažādas metodes specifisku HIV antivielu noteikšanai (vairāki ELISA varianti, aglutinācijas reakcija), izmantojot dažāda rakstura antigēnus. Autori varēja atlasīt tādas testa sistēmu kombinācijas, kuru izmantošana nodrošina 100% jutību un specifiskumu, salīdzinot ar imūnblotēšanas rezultātiem.

Šīs ekspertu diagnostikas metodes zemās izmaksas ir neapšaubāma priekšrocība, tomēr informācijas trūkums par to, pret kurām konkrētajām vīrusa olbaltumvielām pacienta asinīs ir antivielas, neļauj novērtēt reakcijas specifiku katrā atsevišķā gadījumā, kā arī kā antivielu spektra izmaiņu izsekošana agrīnā serokonversijas stadijā.

HIV infekcijas laboratoriskajai diagnostikai bērniem, kas dzimuši no HIV inficētām mātēm, ir savas īpatnības. No dzimšanas brīža ilgu laiku (līdz 15 mēnešiem) šādu bērnu asinīs var cirkulēt mātes antivielas pret HIV. Placentas barjerā iekļūst tikai IgG klases imūnglobulīni, tāpēc HPV specifisko IgM un IgA klases mupoglobulīnu noteikšana bērnam var apstiprināt infekciju, bet negatīvs rezultāts nevar liecināt par HIV neesamību.

Bērniem, kas jaunāki par 1 mēnesi, vēl nav HPV replikācijas, un PCR ir vienīgā pārbaudes metode. Apstiprinoša metode ir arī p24 antigēna noteikšana bērniem, kas vecāki par 1 mēnesi.

Tas, ka jaundzimušajiem nav antivielu pret HIV, nenozīmē, ka vīruss nav šķērsojis placentas barjeru. Jebkurā gadījumā HIV inficēto māšu bērni tiek pakļauti laboratoriskai diagnostikai un novērošanai 36 mēnešus no dzimšanas brīža.

HIV infekcijas marķieru laboratorisko pārbaužu rezultāti ir rūpīgi jāinterpretē, un tie jāņem vērā tikai saistībā ar epidemioloģisko un klīnisko aptauju datiem. No otras puses, jāņem vērā, ka, neskatoties uz mūsdienu metožu augsto jutīgumu, negatīvie testa rezultāti nevar pilnībā izslēgt HIV infekcijas klātbūtni. Tāpēc negatīvu testa rezultātu, piemēram, ar imūnblotēšanu, var formulēt tikai kā specifisku antivielu neesamību pret HIV-1 un HIV-2.

HIV infekcijas diagnostika seronegatīviem pacientiem

Ar katru gadu uzlabojas HIV infekcijas laboratoriskajā diagnostikā izmantoto testu sistēmu kvalitāte, palielinās to jutība. Tomēr lielā HIV variabilitāte var izraisīt jaunu veidu rašanos, pret kuriem esošās testu sistēmas var neatpazīt antivielas. Turklāt ir zināmi saimniekorganisma imūnsistēmas netipiskas humorālās reakcijas gadījumi pret vīrusu. Tātad L. Montanjē 1996. gadā ziņoja par diviem AIDS pacientiem, kuriem dažu iepriekšējo gadu laikā asinīs nebija konstatētas specifiskas antivielas, diagnoze tika noteikta, pamatojoties uz klīniskajiem datiem un laboratoriski apstiprināta tikai ar HPV-1 izolāciju. šūnu kultūrā. Šādos gadījumos nepieciešams izmantot PVO ieteikumus, saskaņā ar kuriem HIV infekcijas klīniskā diagnostika pieaugušajiem un bērniem ir iespējama, ja ir kāda no 12 AIDS definējošām slimībām:

1. barības vada, trahejas, bronhu, plaušu kandidoze;
2. ekstrapulmonāla kriptokokoze;
3. kriptosporidioze ar caureju ilgāk par vienu mēnesi;
4. citomegalovīrusa bojājumi jebkuram orgānam (izņemot un papildus aknām, liesai un limfmezgliem pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi):
5. herpes simplex vīrusa izraisīta infekcija, kas saglabājas ilgāk par 1 mēnesi pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi;
6. smadzeņu limfoma pacientiem, kas jaunāki par 60 gadiem;
7. limfocītu intersticiāla pneimonija bērnam līdz 13 gadu vecumam;
8. izplatīta infekcija, ko izraisa Mycobacterium avium intracellulare vai M. Kansassii grupas baktērijas;
9. pneumocystis pneimonija;
10. progresējoša multifokāla leikoencefalopātija;
11. centrālās nervu sistēmas toksoplazmoze pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi.

Vienas no šīm slimībām klātbūtne ļauj diagnosticēt HIV infekciju, ja nav laboratoriskas asins analīzes, lai noteiktu HIV antivielu klātbūtni, vai pat tad, ja tiek iegūts seronegatīvs rezultāts.

Avots: Medicīnas laboratorijas diagnostika, programmas un algoritmi. Ed. prof. Karpiščenko A.I., Sanktpēterburga, Intermedica, 2001

HIV infekcijas diagnostika ietver divus posmus: faktiskā inficēšanās fakta ar HIV noskaidrošanu un slimības stadijas noteikšanu. Stadijas noteikšanai neatņemami seko slimības gaitas rakstura noskaidrošana un pēc tam prognozes veidošana šim pacientam, kā arī ārstēšanas taktikas izvēle.

Kā zināms, jebkuras infekcijas slimības diagnoze balstās uz epidemioloģisko, klīnisko un laboratorisko datu salīdzināšanu, un kādas no šo datu grupu vērtības pārspīlēšana var radīt diagnostikas kļūdas.

HIV infekcijas epidemioloģiskie kritēriji .

HIV infekcijas diagnosticēšanas pirmais solis ir epidemioloģiskās vēstures un citu epidemioloģisko datu apkopošana par izmeklējamo pacientu. Epidemioloģisko datu trūkums var būtiski sarežģīt HIV infekcijas diagnostiku un apgrūtināt pretepidēmijas pasākumu īstenošanu.

Epidemioloģiskie kritēriji dažkārt var būt izšķiroši HIV infekcijas diagnozes noteikšanā, taču tiem var būt arī sekundāra nozīme. Augstas inficēšanās iespējamības kritērijs ir tādu inficēšanās riska faktoru konstatēšana izmeklējamai personai kā donoru asiņu pārliešana, kas saņemta no HIV inficētas personas, HIV inficēta bērna piedzimšana izmeklējamai sievietei. Inficēšanās iespējamība ir liela, ja pētāmā persona piedzimusi no HIV inficētas mātes, dzimumkontakts ar HIV inficētu personu, kopīga parenterāla narkotiku lietošana ar HIV inficētu personu. Zināms inficēšanās risks tiek konstatēts ar uzticamu parenterālu iejaukšanos, ko veic ar instrumentiem, kas, iespējams, ir inficēti ar HIV (t.i., nozokomiālos un līdzīgos HIV infekcijas perēkļos ar parenterālu HIV pārnešanu).

Par ievērojamu inficēšanās risku var runāt gadījumos, kad subjekts ziņo par dzimumaktu vai parenterālu narkotiku lietošanu apgabalos, kur HIV ir ievērojami izplatīts iedzīvotāju grupā, pie kuras pieder subjekts.

Tajā pašā laikā dzimumakts un narkotiku lietošana teritorijās ar zemu HIV infekcijas izplatību neizslēdz HIV infekcijas iespējamību.

Uzticamu HIV infekcijas riska faktoru trūkums var radīt šaubas par laboratorijas datiem. Šādos gadījumos ieteicams atkārtot laboratorijas izmeklējumus.

HIV infekcijas klīniskie kritēriji.

Savlaicīga HIV infekcijas diagnostika nodrošina savlaicīgu pacienta ārstēšanu un profilakses pasākumu ieviešanu uzliesmojuma gadījumā, novēršot nejaušu vīrusa pārnešanu no inficētas personas uz veselu cilvēku. Visbeidzot, agrīna diagnostika ļauj veikt savlaicīgu klīnisko pārbaudi, psiholoģisko palīdzību un sociālo rehabilitāciju. Pirmie panākumi pacientu ārstēšanā ļauj ar agrīnu diagnostiku ievērojami pagarināt pacientu dzīvi un pat cerēt uz izārstēšanos.

Agrīnas diagnostikas sarežģītība, pamatojoties uz klīnisko ainu, ir simptomu nespecifiskums, polimorfisms II stadijā, nemaz nerunājot par klīnikas neesamību I stadijā. Tomēr visos nemotivēta noguruma gadījumos ir nakts svīšana. , galvassāpes, īpaši uz īslaicīga drudža fona (3-10 dienas) ar temperatūru 38-38,50 C, ko pavada tonsilīts, ilgstošas ​​caurejas sindroms, svara zudums īsā laikā, vispirms ir jāizslēdz HIV infekcija. Diagnozi šajā periodā palīdz noteikt dažādu ādas izsitumu (plankumi, papulas, rozolas, pustulas) vai furunkulozes identificēšana objektīvas izmeklēšanas laikā. Limfadenopātijas klātbūtne pat gadījumos, kad palielinās viena limfmezglu grupa un vēl jo vairāk ar ģeneralizētu limfmezglu grupu, ir lielāka iespēja klīniski aizdomas par HIV infekciju. Slimību īpaši raksturo aizmugurējo kakla, submandibulāro, supra- un subclavian, paduses un elkoņa kaula limfmezglu palielināšanās. Parasti tie palielinās līdz 2-5 cm diametrā, ir nesāpīgi, blīvi elastīgi pēc konsistences, laiku pa laikam saplūst konglomerātā. HIV infekcijai ir ļoti raksturīgi palielināt vairāk nekā vienu mezglu, vairāk nekā vienu grupu (izņemot cirkšņu), kas ilgst vairāk nekā 3 mēnešus.

Bieži slimības sākuma fāzē psihoneiroloģisku simptomu klātbūtne: trauksme, depresija, nestabila gaita, samazināts redzes asums, konvulsīvi krampji ar psihoemocionālās sfēras bojājuma pazīmēm (atmiņas traucējumi, aizmāršība, neatbilstoša uzvedība, trulums emocijām). Līdz raksturīgākajām iezīmēm HIV infekcijas agrīnās stadijas ir:

1. Mazāk nekā 10% svara zudums;

2. Izmaiņas ādā un gļotādās (seborejas dermatīts, folikulīts, nieze, psoriāze, nagu sēnīšu infekcijas, atkārtotas mutes čūlas, nekrotizējošs gingivīts);

3 . Herpes zoster personām, kas jaunākas par 50 gadiem;

4. Atkārtotas augšējo elpceļu infekcijas;

AT starpposms Visraksturīgākās ir slimības, kurām raksturīga paplašinātas superinfekcijas klīnika, kas veidojas imūndeficīta rezultātā:

1 . Progresīvs svara zudums virs 10%;

2 . Nezināmas izcelsmes caureja, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi;

3 . mutes dobuma kandidoze;

4 . Leikoplakija;

5. Plaušu tuberkuloze;

6. Perifēra neiropātija;

7. Lokalizētas Kapoši sarkomas formas;

8. Izplatošs herpes zoster;

9. Smaga, atkārtota bakteriāla infekcija (pneimonija, sinusīts, piomiozīts).

Priekš vēlīnā stadija, kas ļauj diagnosticēt HIV infekciju vai jebkurā gadījumā veikt diferenciāldiagnozi, ietver:

1. Pneumocystis pneimonija;

2 . Toksoplazmoze;

3. Kriptokokoze;

4. CMV infekcija;

5. Herpes simplex;

6. Progresējoša multifokāla leikoencefalopātija;

7. Histoplazmoze;

8. Candida ezofagīts;

9. MAC infekcija;

10. Salmonellas septicēmija;

11. Ārpusplaušu tuberkuloze;

12. Limfoma, Kapoši sarkoma;

13. kaheksija;

14. HIV encefalopātija.

1988. gadā PVO ierosināja veikt klīnisko diagnostiku simptomu rādītājs pieejams pacientiem, kuriem ir aizdomas par HIV infekciju:

Pastāvīga ģeneralizēta limfadenopātija 0

Izmaiņas ādā un gļotādās 1

Svara zudums 1

Smags nogurums 1

Herpes simplex 2

Caureja, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi. 4

Drudzis, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi. 4

Svara zudums par 10% 4

Plaušu tuberkuloze 5

Atkārtota bakteriāla infekcija 5

Mutes leikoplakija 5

Stomatīts, mutes piena sēnīte 5

Lokalizēta Kapoši sarkoma 8

Kaheksija 12

Tajā pašā laikā tiek lēsta punktu summa no 0 līdz 3, jo HIV infekcijas iespējamība ir ļoti maza, 4-11 punkti - slimība ir iespējama, un 12 un vairāk punkti - ļoti iespējama.

Kopumā HIV infekcijas klīniskā diagnoze, pirmkārt, ir ar AIDS saistītas patoloģijas spektra diagnostika pacientam ar sekundāru imūndeficītu. Tā kā HIV indikatorslimības ietver 23 nosoloģiskās formas, vispiemērotākā ir sindromiskā pieeja diagnozei. Gandrīz vienmēr pacientam ir vispārējas intoksikācijas sindroms (nemotivēts vājums, letarģija, nogurums), kas attīstās uz ilgstošas ​​nelielas vai nezināmas izcelsmes drudža fona, biežāk naktīs un rītos, ko pavada spēcīga sviedri. Nemotivētas ģeneralizētas perifērās limfadenopātijas sindroms ir pastāvīgs, 20% gadījumu to pavada dažāda smaguma hepatosplenomegālija. Viens no vadošajiem slimības sindromiem ir bronho-plaušu patoloģijas sindroms, lai gan progresējošos slimības gadījumos attīstās dziļi plaušu audu bojājumi pneimocistiskās pneimonijas formā, jo pneimocistoze attīstās uz dziļa imūndeficīta fona. Bet, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi, nemotivētas caurejas sindroms attiecas uz agrīnu parādīšanos, to raksturo rezistence pret zāļu terapiju. Viens no HIV infekcijas sindromiem ir nezināmas etioloģijas viļņveida artralģija. Raksturīgākās slimības izpausmes ir ādas un gļotādu bojājumu sindroms, kas izpaužas ar nespecifiskiem makulopapulāriem izsitumiem, pret steroīdu terapiju rezistentu ekzēmu un stafilokoku impetigo. Dermatoloģiskās izpausmes ietver arī atkārtotus sēnīšu (mikoze, kandidoze, bakteriālas (folikulīts, furunkuloze, hidroadenīts), vīrusu (herpes) ādas un gļotādu bojājumus.Visbeidzot, HIV infekcijai ir raksturīgi arī jaunveidojumi, galvenokārt Kapoši sarkomas un limfoma, kā arī daži citi audzēju veidi.

Ja pacientam ir vismaz divas klīniskās un divas klīniskās laboratorijas (leiko-lifonutropēnija, hipogammaglobulinēmija) iepriekš minētie simptomi, tas ļauj ar augstu ticamības pakāpi diagnosticēt HIV infekciju. Bet tajā pašā laikā, ja tiek atklāti divi no šādiem pacientiem ļoti bieži sastopamiem sindromiem, piemēram, drudzis un limfadenopātija, kas saglabājas mēnesi vai ilgāk, ilgstoša nemotivēta caureja, svara zudums par vairāk nekā 10% vai izteikts. nakts svīšana, rada diagnozi un rūpīgu laboratorisko izmeklēšanu.

AT posms 2a Par slimību var aizdomas tikai pēc persistējošas ģeneralizētas limfadenopātijas simptoma riska pacientam vai epidemioloģiskās vēstures klātbūtnē.

AT 2.b posms(agrīna vai viegla), somatiskā pašsajūta, normāla aktivitāte joprojām saglabājas. Ādas un gļotādu bojājumi nav smagi, atkārtotas elpceļu infekcijas nav ģeneralizētas, svara zudums nepārsniedz 10%.

Saskaņā ar PVO rekomendācijām, uzticama HIV infekcijas klīniska diagnoze pieaugušajiem un bērniem ir iespējama, ja ir kāda no 12 AIDS indikatīvām slimībām: 1) barības vada, trahejas, bronhu, plaušu kandidoze; 2) ekstrapulmonāra kriptokokoze; 3) kriptosporidioze ar caureju ilgāk par vienu mēnesi; 4) citomegalovīrusa bojājumi jebkuram orgānam (izņemot un papildus aknām, liesai un limfmezgliem pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi); 5) herpes simplex vīrusa izraisīta infekcija, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi; 6) Kapoši sarkoma pacientam, kas jaunāks par 60 gadiem; 7) smadzeņu limfoma pacientam, kas jaunāks par 60 gadiem; 8) limfocītu intersticiāla pneimonija bērnam līdz 13 gadu vecumam, 9) izplatīta Mycobacterium avium intracellulare vai M. Kansassii grupas baktēriju izraisīta infekcija; 10) pneimocistiskā pneimonija; 11) progresējoša multifokāla leikoencefalopātija; 12) centrālās nervu sistēmas toksoplazmoze pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi. Vienas no šīm slimībām klātbūtne ļauj diagnosticēt HIV infekciju bez seroloģiskās ar enzīmu saistītās imūnsorbcijas analīzes vai pat tad, ja tiek iegūts seronegatīvs rezultāts.

Ne mazāk sarežģīta ir slimības fāžu diferenciācija, t.i. stadijas noteikšana atbilstoši klīniskajiem kritērijiem. Pēc CDC ekspertu (ASV) domām, objektīvākais kritērijs ir T-helper šūnu skaits, nevis klīniskās izpausmes, jo daudzi no šiem stāvokļiem bieži tiek konstatēti cilvēkiem, kuri nav inficēti ar HIV. Centrs 1991.gadā noteica, ka AIDS diagnozi var noteikt, ja: a) inficētajai personai ir kāds no 23 ar AIDS saistītiem stāvokļiem vai b) viņš ir HIV inficēts un tajā ir mazāk par 200 CD4+ šūnām/mm.

HIV infekcijas laboratorijas kritēriji.

HIV infekcijas pārbaude galvenokārt ir pakļauta:

2 . Personas ar kandidoza ezofagīta klīniku, bronhu un plaušu kandidozi, diseminētu vai ekstrapulmonāru kokcidiomikozi, pneimocistisko pneimoniju, ekstrapulmonālo kriptokokozi, kriptosporidiozi ar caureju ilgāk par 1 mēnesi, citomegalovīrusu, izņemot iekšējos orgānos, limfas orgānu bojājumus, pacienti, kas vecāki par 6 mēnešiem, citomegalovīrusa retinīts ar redzes zudumu, herpetiska infekcija ar multifokālām čūlām, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi, bronhīts, pneimonija vai ezofagīts, recidivējoša herpes zoster, diseminēta vai ekstrapulmonāra histoplazmoze, plaušu vai ekstrapulmonāla tuberkuloze, izosporioze, kas ilgst vairāk nekā caureju 1 mēnesis, plaši izplatītas vai ekstrapulmonāras MAC infekcijas, progresējoša multifokāla leikoencefalopātija, smadzeņu toksoplazmoze, salmonellas septicēmija, Kapoši sarkoma, limfoma, limfoīdā intersticiāla pneimonija (bērniem)

Šobrīd HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai tiek izmantotas dažādas HIV, HIV antigēnu un HIV gēnu materiāla noteikšanas metodes, kā arī antivielu noteikšanas metodes pret HIV. Visām šīm metodēm ir atšķirīga efektivitāte, tām ir nepieciešams atšķirīgs aprīkojums un dažāda līmeņa personāla apmācība. Šo pētījumu rezultāti prasa kompetentu interpretāciju.