Реакция на забавяне на хемаглутинацията. имунологични методи. Време за анализ

В основата на реакцията на хемаглутинация е явлението аглутинация на еритроцитите, което възниква под влияние на различни фактори. Разграничаване на директна и непряка хемаглутинация.

Методът за настройка на реакцията на непряка хемаглутинация се състои от няколко етапа. Първо, еритроцитите се промиват с изотоничен разтвор на натриев хлорид, след което, ако е необходимо (при използване на антигени от протеинова природа), те се третират с разтвор на танин 1: 20 000 и се сенсибилизират с разтворими антигени. След промиване с буфериран изотоничен разтвор на натриев хлорид, еритроцитният антиген е готов за употреба. Тестовите серуми се разреждат с изотоничен разтвор на натриев хлорид в епруветки или специални пластмасови плаки с дупки, след което към всяко серумно разреждане се добавя еритроцитен диагностикум. Резултатите от реакцията на индиректна хемаглутинация се отчитат от естеството на еритроцитната утайка, образувана на дъното на епруветката. Резултатът от реакцията се счита за положителен, при който еритроцитите покриват равномерно цялото дъно на епруветката. При отрицателна реакция червените кръвни клетки под формата на малък диск или "копче" се намират в центъра на дъното на епруветката.

Основните компоненти на RP:

А) разтворим антиген

Б) Специфични антитела (серум)

(RTGA) - метод за идентифициране на вирус или откриване на антивирусни антитела в кръвния серум на пациента, базиран на явлението отсъствие на аглутинация на еритроцитите с лекарство, съдържащо вирус, в присъствието на имунен към него кръвен серум.
Реакция на инхибиране на хемаглутинацията (HITA)въз основа на блокадата, потискане на антигените на вирусите от антитела на имунния серум, в резултат на което вирусите губят способността си да аглутинират червените кръвни клетки.
RTHA се използва за диагностициране на много вирусни заболявания, чиито причинители (грип, морбили, рубеола, кърлежов енцефалит и др.) могат да аглутинират еритроцитите на различни животни.
Механизъм.Типизирането на вируса се извършва в теста за инхибиране на хемаглутинацията (HITA) с набор от специфични за типа серуми. Резултатите от реакцията се вземат предвид от липсата на хемаглутинация. Подтипове на вирус А с антигени H 0 N 1 , H 1 N 1 , H 2 N 2 , H 3 N 2 и други могат да бъдат диференцирани в RTGA с набор от хомоложни тип-специфични серуми.

В основата реакции на хемаглутинация се крие явлението аглутинация на еритроцитите, което възниква под влияние на различни фактори. Разграничаване на директна и непряка хемаглутинация.
При реакцията на директна хемаглутинация еритроцитите се слепват, когато определени антигени, като вируси, се адсорбират върху тях.
При серологични изследвания се използва реакцията на директно инхибиране на хемаглутинацията, когато вирусът, изолиран от пациента, се неутрализира със специфичен имунен серум и след това се комбинира с червените кръвни клетки. Липсата на хемаглутинация показва съответствието на вируса и използвания имунен серум.

Реакцията на индиректна хемаглутинация (пасивна хемаглутинация) се наблюдава, когато еритроцитите, предварително третирани (сенсибилизирани) с различни антигени, се добавят с имунен серум или серум на пациента, който има съответните антитела. Има специфично свързване на еритроцитите, тяхната пасивна хемаглутинация.

Реакцията на непряка или пасивна хемаглутинация превъзхожда по чувствителност и специфичност спрямо другите серологични методи и се използва при диагностициране на инфекции, причинени от бактерии, рикетсии и протозои.

Методът за настройка на реакцията на непряка хемаглутинация се състои от няколко етапа. Първо, еритроцитите се промиват с изотоничен разтвор на натриев хлорид, след което, ако е необходимо (при използване на антигени от протеинова природа), те се третират с разтвор на танин 1: 20 000 и се сенсибилизират с разтворими антигени. След промиване с буфериран изотоничен разтвор на натриев хлорид, еритроцитният антиген е готов за употреба. Тестовите серуми се разреждат с изотоничен разтвор на натриев хлорид в епруветки или специални пластмасови плаки с дупки, след което към всяко серумно разреждане се добавя еритроцитен диагностикум. Резултатите от реакцията на индиректна хемаглутинация се отчитат от естеството на еритроцитната утайка, образувана на дъното на епруветката. Резултатът от реакцията се счита за положителен, при който еритроцитите покриват равномерно цялото дъно на епруветката. При отрицателна реакция еритроцитите под формата на малък диск или „копче“ се намират в центъра на дъното на епруветката.

Реакция на инхибиране на хемаглутинацията- серологична реакция, базирана на способността на антителата да предотвратяват аглутинацията на еритроцитите от хемаглутиниращи видове вируси (аденовируси, арбовируси, някои ентеровируси, грипни и парагрипни вируси, морбили, реовируси). Специфичните антивирусни антитела взаимодействат с повърхностните молекули на хемаглутинините на вирионите на тези вируси и блокират тяхното свързване с комплементарните молекули на еритроцитната мембрана.

Напоследък реакцията се използва широко в клиничните вирусологични лаборатории за определяне на титрите на специфични антитела срещу определени вируси, както и за серологична идентификация и типизиране на вирусни изолати от клиничен материал от пациенти. Употребата е донякъде ограничена поради наличието в кръвния серум на хора на неспецифични инхибитори на вируси, както и на естествени антитела - аглутинини.

Реакция на неутрализация - реакция на инхибиране на хемаглутинация (RTGA).

RTGA се прилага:
-за серотипиране на вируси;
- за серодиагностика на инфекции.
Има два начина за настройка:
- капков метод върху стъкло (приблизителна реакция), използван за серокопиране на вируси;
- разположени в епруветки.

Механизъм. Някои вируси (например грип) имат хемаглутинин, който причинява аглутинация на еритроцитите на различни животни, в зависимост от вида на вируса. При наличие на антитела в серума - антихемаглутинини, се наблюдава инхибиране на активността на вирусите.
RTGA.
Предназначение: серотипиране на вируса на грип А

Компоненти:
1. Изследваният материал е алантоичната течност на пилешкия ембрион,
2. Диагностични антигрипни специфични серуми,
3. 5% суспензия от пилешки еритроцити.
4. Физиологичен разтвор.

Реакцията се поставя върху стъклото по капков метод. 1 капка диагностични серуми и тестов материал се нанасят върху стъклото, смесват се, след което се добавя 1 капка еритроцитна суспензия. При положителна реакция се наблюдава хомогенно зачервяване, а при отрицателна се появяват червени люспи (хемаглутинация).

Тестът за инхибиране на хемаглутинацията (HITA) е метод за идентифициране на вирус или откриване на антивирусни антитела в кръвния серум на пациента, базиран на феномена на липса на аглутинация на еритроцитите от лекарство, съдържащо вирус, в присъствието на кръвен серум, имунизиран към него.

Много вируси имат способността да аглутинират еритроцитите на строго определени видове бозайници и птици. По този начин вирусите на грипа и паротита аглутинират пилешките еритроцити, морски свинчета, човешки и аденовируси - еритроцити на плъхове, мишки. В тази връзка за откриването им в материала на пациенти или клетъчни култури, ембриони и животни се извършва хемаглутинационен тест (RHA). За да направите това, в ямките на таблетките се приготвят двойно увеличаващи се разреждания на вирус-съдържащи материали и течности, като към тях се добавят суспензии от еритроцити, измити с изотоничен разтвор на NaCl. За да се контролира спонтанната аглутинация, еритроцитите се смесват с равен обем изотоничен разтвор на NaCl. Смесите се инкубират в термостат при температура 37°С или при стайна температура.

Резултатите от RHA се вземат предвид от естеството на аглутинация на еритроцитите след 30-60 минути, когато те обикновено са напълно утаени в контролата. Положителната реакция се обозначава с плюсове. „++++“ е утайка с форма на чадър, „+++“ е утайка с пропуски, „++“ е утайка с големи пролуки, „+“ е флокулираща утайка, заобиколена от зона от струпвания на еритроцити, и “–” – същата рязко дефинирана еритроцитна утайка под формата на “копче” като в контролата.

Тъй като е специфичен за групата, RGA не дава възможност да се определят видовете вируси. Те се идентифицират с помощта на теста за инхибиране на хемаглутинацията (HITA). За формулирането му се използват известни имунни антивирусни серуми, които се разреждат в изотоничен разтвор на натриев хлорид в двукратно намаляваща концентрация и се изсипват в ямки. Към всяко разреждане се добавя еднакво количество течност, съдържаща вирус. Контролата е суспензия на вируса в изотоничен разтвор на натриев хлорид. Плаките със смес от серуми и вируси се държат в термостат за 30 минути или при стайна температура за 2 часа, след което към всяка от тях се добавя суспензия от еритроцити. След 30 минути се определя титърът на неутрализиращия серум (т.е. максималното му разреждане), което причинява забавяне на аглутинацията на еритроцитите.

RTHA се използва в серологичната диагностика на вирусни заболявания, по-специално грип и адено вирусни инфекции. По-добре е да го поставите по същия начин като pH, със сдвоени серуми. Четирикратно увеличение на титъра на антителата във втория серум потвърждава предложената диагноза.

Реакцията на инхибиране на хемаглутинацията (RTHA) се основава на блокадата, потискане на антигените на вирусите от антитела на имунния серум, в резултат на което вирусите губят способността си да аглутинират червените кръвни клетки.

RTHA се използва за диагностициране на много вирусни заболявания, чиито причинители (грип, морбили, рубеола, кърлежов енцефалит и др.) могат да аглутинират еритроцитите на различни животни.

Механизъм. Типизирането на вируса се извършва в теста за инхибиране на хемаглутинацията (HITA) с набор от специфични за типа серуми. Резултатите от реакцията се вземат предвид от липсата на хемаглутинация. Подтипове на вирус А с антигени H 0 N 1 , H 1 N 1 , H 2 N 2 , H 3 N 2 и други могат да бъдат диференцирани в RTGA с набор от хомоложни тип-специфични серуми.

Напоследък реакцията се използва широко в клиничните вирусологични лаборатории за определяне на титрите на специфични антитела срещу определени вируси, както и за серологична идентификация и типизиране на вирусни изолати от клиничен материал от пациенти. Употребата е донякъде ограничена поради наличието в кръвния серум на хора на неспецифични инхибитори на вируси, както и на естествени антитела - аглутинини.

Реакция на хемаглутинация (RGA).

Хемаглутинацията е феномен на слепване на червените кръвни клетки поради излагане на различни микроорганизми.

Механизмът на хемаглутинацията е слепването на еритроцити (животни или хора), върху чиято повърхност се адсорбират микроорганизми; последните са мостове, свързващи съседни еритроцити. Възможно е също така микроорганизмите, адсорбирани върху повърхността на еритроцитите, да променят заряда си, в резултат на което еритроцитите придобиват способността да се слепват, утаявайки се на дъното на епруветката или ямките на плочата с тънък филм под формата на обърнат чадър (снимка на пълна хемаглутинация).

Поведение различни видовемикроорганизми до аглутинация на еритроцитите на животни от определен вид (или човек) се установява емпирично. По правило микроорганизмите, които съставляват една и съща таксономична група, аглутинират еритроцитите от един и същ животински вид. Видът аглутинирани еритроцити често се използва за обозначаване на микроорганизми.

Реакция на инхибиране на хемаглутинацията (RTGA).

Хемаглутинацията е обратим процес. Специфичността на микробната хемаглутинация се оценява по ефекта на инхибиране или потискане на съответните антимикробни антитела. Това явление е в основата на RTGA. Механизмът на HTGA е, че антимикробните антихемаглутинини пречат на микроорганизмите да аглутинират еритроцитите на чувствителни животински видове.

В зависимост от предназначението на RTGA, неговият резултат е или идентифициране на изолиран щам, чиято хемаглутинация е потисната от известен серум, или откриване на специфични антимикробни антитела в изследвания кръвен серум.

4. Реакция на свързване на комплемента (RSK) -Това сложна реакциякойто протича в две фази. За настройката му са необходими следните съставки: антиген, антитяло, комплемент, овчи еритроцити, хемолитичен имунен серум.

В RSK участват две системи антиген-антитяло: специфична и хемолитична. Специфичната система е:

а) известен антиген (diagnosticum) и кръвен серум на пациент или лице, което е имало тази инфекция (съдържащи антитела, съответстващи на този антиген);

б) или неизвестен антиген и известен диагностичен имунен серум на реконвалесцент. Ако антигенът и антитялото са хомоложни, те образуват специфичен невидим комплекс, който сорбира комплемента върху себе си.

Адсорбцията на комплемента върху специфичен комплекс може да бъде открита само с помощта на хемолитична система, която се състои от антиген (овен еритроцити) и имунен серум (антисерум към него). Хемолизата на еритроцитите в хемолитичната система се случва само в присъствието на свободен комплемент.

В случай на образуване на специфичен комплекс, той адсорбира комплемента. С добавянето на хемолитична система не настъпва хемолиза на еритроцитите ( положителен резултат). Ако антигенът и антитялото са хетероложни, комплементът е в свободна форма, тъй като не се сорбира отделно нито от антигена, нито от антитялото. При добавяне на хемолитичната система настъпва хемолиза на еритроцитите (отрицателен резултат).

RSK, както всички серологични реакции, е универсален. Може да се използва за откриване на вирусни антигени в инфекциозен материал, както и за откриване на антитела в кръвния серум на пациенти и излекувани пациенти.

5. Реакцията на пасивна хемаглутинация (RPHA) или индиректна хемаглутинация (RNGA),намира широко приложение във вирусологичната практика при диагностициране на морбили, респираторно-синцитиална вирусна инфекция, заболявания, причинени от вируси на Коксаки В, кърлежов енцефалит, бяс, хепатит В, аденовируси и др.

Същността на реакцията е, че еритроцитите (най-често човешки или овчи), сенсибилизирани от антиген (или антитяло) в присъствието на хомоложно антитяло (или антиген) се слепват, т.е. дават феномена на пасивна хемаглутинация.

Тъй като всички антигени (антитела) се адсорбират добре върху еритроцитите, последните се обработват предварително с танин, след което способността им да адсорбират протеини рязко се увеличава.

Еритроцити, чувствителни антигени , Наречен еритроцитни диагностикуми , еритроцити, сенсибилизирани антитела , Наречен диагностика на антитела.

RPHA е по-чувствителна от фиксацията на комплемента и противодействащата имуноелектрофореза.

Имунохроматографски анализ(ICA) е метод за определяне на наличието на определени концентрации на вещества в биологичния материал (урина, цяла кръв, серум или кръвна плазма, слюнка, изпражнения и др.) и се основава на реакцията между антиген и съответното му антитяло. Този методанализът се извършва с индикаторни ленти, пръчки, панели или тест касети, които осигуряват бързината на тестването. ICA е сравнително млад метод за анализ, често се описва в литературата и като метод за суха имунохимия, лентов тест, QuikStrip касета, QuikStrip измервателна пръчка, бърз тест или бърз анализ. Тези имена са свързани със скоростта на този метод за анализ.

Принципът на действие на имунохроматографския тест е, че когато тестът се спусне във физиологична течност, той започва да мигрира по лентата според принципа на тънкослойната хроматография. Водещата фаза в този случай е физиологичната течност. Антителата с багрило също се движат заедно с течността. Ако изследваният антиген (хормон, инфекциозен или онкологичен маркер) присъства в тази течност, той се свързва както с първия, така и с втория тип антитела, което вече е имунологичен метод за анализ. В този случай се извършва натрупването на антитела с багрилото около антителата, твърдо имобилизирани в тест зоната на ICA лентата, което се проявява под формата на ярка тъмна лента. Несвързаните антитела с багрило мигрират по-нататък по лентата и взаимодействат с незначителни антитела в контролната зона, където се появява втората тъмна ивица. Взаимодействието (и тъмната линия) в контролната зона винаги ще се открие (ако анализът е извършен правилно), независимо от наличието на тестовия антиген във физиологичната течност. Резултатите се определят визуално или чрез компютърна обработка на сканираното изображение.

П Принцип на RIF въз основа на определянето на флуоресцентни антитела. Адсорбираният антиген се комбинира с имунен серум, след което образуваният комплекс антиген-антитяло се третира с γ-глобулин, комбиниран с флуорицин изотиоцианат. Тъй като антителата, белязани с флуорохром, не губят способността си да се свързват с антигена и по този начин предизвикват светене на препаратите в синьо-виолетови лъчи, чийто източник е живачно-кварцова лампа. Този метод дава възможност да се постави диагноза в рамките на 2-48 часа от началото на заболяването. Материалите за изследването могат да бъдат тампони от назофаринкса, кръв, гръбначно-мозъчна течности други биологични течности, където може да бъде локализиран патогенът.

реакция на латексна аглутинацияе един от видовете реакция на аглутинация, при която синтетични полимерни латексни частици се използват като носител на антиген или антитяло. Тази реакция се използва за откриване на наличието на антитела в серума на изследваните хора, за идентифициране на причинителя на заболяването. Разтворими фини антигени на бактериална клетка с протеинова или полизахаридна природа се адсорбират върху повърхността на монодисперсен латекс. Такива латексни частици с бактериални антигени се слепват под действието на имунния серум, което води до образуването на характерна утайка - тънък филм с неравни ръбове. Реакцията се оценява визуално („+“ от утайката на филма на дъното на кладенеца).

Имуноблотинг- качествен метод, който ви позволява да определите Ag или At с висока надеждност във всяка биологична среда на тялото. Специфичността и чувствителността на метода е 99-100%. Методът на имуноблотинг е подобен на ELISA, но крайният етап от изследването е прехвърлянето и имобилизирането на биополимера (Ag или At) върху пореста мембрана, където биополимерът се анализира с помощта на имуносорбенти. Имуноблотирането поради своята специфичност се отнася до референтните тестове (потвърждаващи).

Ензимен имуноанализ (ELISA)или по-точно ензимни имуносорбентен анализ (английски ензимно-свързан имуносорбентен анализ, ELISA) е имунологичен метод за откриване на определени антигени, базиран на идентифицирането на комплекси антиген-антитяло. Широко използван в лабораторната диагностика.

Съществуват редица подходи, които ви позволяват да определите дали е осъществено свързването на антитяло към целевия антиген. Един от тях е ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA), който често се използва за диагностициране на различни антигени. Процедурата за анализ включва следните стъпки:

Основният принцип на ELISA е специфичното свързване на първото антитяло към целта. Ако целевата молекула е протеин, тогава нейният пречистен препарат обикновено се използва за получаване на антитела, с помощта на които след това се открива тази цел. Преди това бяха използвани първите антитела, които бяха поликлонални по природа. Разработването и използването на моноклонални антитела направи възможно значително подобряване на специфичността на ензимния имуноанализ.

Ензимният имуносорбентен анализ се използва широко за диагностициране на различни инфекциозни заболявания, онкопроцеси (главно поради специфични протеини и пептиди), определяне на различни нискомолекулни съединения, като токсини, лекарстваи т.н.

Това е серологична реакция, при която специфични антивирусни антитела, взаимодействайки с вируса (антиген), го неутрализират и го лишават от способността да аглутинира червените кръвни клетки, т.е. инхибира реакцията на хемаглутинация (RTGA) ви позволява да го използвате, за да определите типа и дори вида на вирусите, открити по време на стадирането на RHA.

Захранване с реакция. 0,25 ml антивирусен серум в последователни двукратни разреждания от 1:10 до 1:2560 се смесват с равен обем материал, съдържащ вируса, разреден 4 пъти по-малко от титъра, установен в RHA. Сместа се разклаща и се поставя в термостат за 30 минути, след което се добавят 0,5 ml 1-2% суспензия от еритроцити.

Реакцията е последвана от 3 контроли.

Резултатите се записват след второто инкубиране в термостат за 30 или 45 минути при стайна температура. При правилна настройка на експеримента при контрола на серум и еритроцити трябва да се образува "бутон" - няма фактор, аглутиниращ еритроцитите; в антигенния контрол се образува "чадър" - вирусът е причинил аглутинация на еритроцитите.

При експеримента, ако серумът е хомоложен на изследвания вирус, се образува "бутон" - серумът неутрализира вируса. Серумният титър е максималното му разреждане, при което хемаглутинацията се забавя.

Реакция на непряка хемаглутинация

Реакцията на непряка (пасивна) хемаглутинация (RIHA) се основава на факта, че еритроцитите, ако разтворим антиген се адсорбира върху повърхността им, придобиват способността да аглутинират при взаимодействие с антитела към адсорбирания антиген. RNHA се използва широко при диагностицирането на редица инфекции.

Настройка на реакция. Тестовият серум се нагрява в продължение на 30 минути при 56 ° C, разрежда се последователно в съотношение 1:10-1:1280 и се излива в епруветки или ямки в 0,25 ml, където след това се добавят 2 капки еритроцитен диагностикум (еритроцити с антиген адсорбирани върху тях).

Фиг.70 Схема на реакцията на пасивна хемаглутинация (RPHA).

А - получаване на еритроцитен диагностикум; B - RPGA: 1-еритроцит: 2 - изследван антиген: 3 - еритроцитен диагностикум; 4 - антитяло към изследвания антиген; 5 - аглутинат.

Контроли: суспензия от еритроцитен диагностикум с очевидно имунен серум; суспендиране на диагностикум с нормален серум; суспензия от нормални еритроцити с изследвания серум. При първата контрола трябва да настъпи аглутинация, при втората и третата не трябва.

С помощта на RNHA може да се определи неизвестен антиген, ако известни антитела се адсорбират върху еритроцитите.

Реакцията на хемаглутинация може да се определи в обем от 0,025 ml (микрометод) с помощта на микротитър на Takachi.

РЕАКЦИЯ НА ВАЛЕЖИТЕ

При реакцията на утаяване се утаява специфичен имунен комплекс, състоящ се от разтворим антиген (лизат, екстракт, (аптен) и специфично антитяло в присъствието на електролити.

Мътният пръстен или утайката, образуван в резултат на тази реакция, се нарича утайка. Тази реакция се различава от реакцията на аглутинация главно по размера на антигенните частици.

Реакцията на преципитация обикновено се използва за определяне на антигена при диагностициране на редица инфекции (антракс, менингит и др.); в съдебната медицина - за определяне на вида кръв, сперматозоиди и др.; при санитарно-хигиенни проучвания - при установяване на фалшификация на продукти; с негова помощ се определя филогенетичната връзка на животните и растенията. За реакцията ви трябва:

1. Антитела (преципитини) - имунен серум с висок титър на антитела (не по-нисък от 1:100 000). Титърът на утаещия се серум се определя от най-голямото разреждане на антигена, с който той реагира.
Серумът обикновено се използва неразреден или разреден 1:5-1:10.

2. Антиген - разтворени вещества на протеин или
липоидна полизахаридна природа (пълни антигени и
хаптени).

3. Изотоничен разтвор.

Основните методи за провеждане на реакцията на утаяване са: реакция на утаяване на пръстен и реакция на утаяване в агар (гел).

Внимание! Всички компоненти, участващи в реакцията на утаяване, трябва да бъдат напълно прозрачни.

Фиг.71 Реакция на утаяване: А - пръстеновидна реакция на утаяване; B - Реакция на утаяване на Ouchterlony

Реакция на утаяване на пръстен. 0,2 - 0,3 ml (5-6 капки) серум се добавят към епруветката за утаяване с помощта на пипета на Пастьор (серумът не трябва да пада върху стените на епруветката). Антигенът се нанася внимателно върху серума в същия обем, като се излива с тънка Пастьорова пипета по стената на епруветката. Епруветката се държи в наклонено положение. При правилно наслояване трябва да се получи ясна граница между серума и антигена. Внимателно, за да не смесите течността, поставете епруветката в статив. При положителен резултат от реакцията се образува мътен „пръстен“ на границата на антигена и антитялото - утайка (виж Фиг. 48).

Реакцията е последвана от редица контроли (Таблица 18). Последователността на въвеждане на реакционните съставки в епруветката е много важна. Не можете да наслоите серума върху антигена (в контрола - върху изотоничния разтвор), тъй като относителната плътност на серума е по-голяма, той ще потъне на дъното на епруветката и границата между течностите няма да бъде открита .

Схема за настройка на реакцията на пръстеновидно утаяване

Таблица No13

Забележка. + наличието на "пръстен"; - липса на "пръстен".

Резултатите се записват след 5-30 минути, в някои случаи след час, както винаги, започвайки с контроли. "Пръстенът" във 2-ра епруветка показва способността на имунния серум да влезе в специфична реакция със съответния антиген. В 3-5-та епруветки не трябва да има "пръстени" - няма антитела и антигени, съответстващи един на друг. „Пръстен“ в 1-ва епруветка - положителен резултат от реакцията - показва, че тестовият антиген съответства на взетия имунен серум, отсъствието на „пръстен“ („пръстен“ само във 2-ра епруветка) показва тяхното несъответствие - отрицателна реакция резултат.

Реакция на утаяване в агар (гел). Особеността на реакцията е, че взаимодействието на антигена и антитялото се осъществява в плътна среда, т.е. в гел. Получената утайка дава мътна ивица в дебелината на средата. Липсата на лента показва несъответствие между компонентите на реакцията. Тази реакция се използва широко в медицински и биологични изследвания, по-специално при изследване на образуването на токсини в причинителя на дифтерия.

Проучете естеството на взаимодействието на антигена с антитялото в реакцията
утаяване в агар, скицирайте резултата (вземете чашата от учителя).

Реакция на инхибиране на хемаглутинацията

серол. реакции, базирани на инхибиране на аглутинацията на еритроцитите. Приложете 2 вида G. t. r: реакцията на инхибиране на активна (RTGA) и пасивна (RTPGA) хемаглутинация. RTGAизползва се за серодиагностика на вирусни инфекции и типизиране на неизвестни вируси. В първия вариант до серия от двойни разреждания с-то б-ного, взет в началото на заболяването и след 10-14 дни в обем 0,25 ml се добавят 0,25 ml от стандартния вирусен диагностикум. След едночасово излагане при стайна температура към всяка епруветка (ямка) се добавя 0,5 ml 1% суспензия от пилешки еритроцити. След 30 - 60 минути в двата реда се определят последните разреждания на s-to, при които се отбелязва инхибиране (отсъствие) на хемаглутинация. В случай на повишаване на титъра на антителата с 4 или повече пъти, те дават положителен отговор, в други случаи - отрицателен. За типизиране на вируса се приготвя серия от двукратни разреждания на стандартна проба в обем от 0,25 ml, като към всяко разреждане се добавя равен обем от изследването. вирусна суспензия с активност от 4 хемаглутиниращи единици. (дози), инкубира се при стайна температура в продължение на 1 час и се долива с 0,5 ml 1% суспензия от пилешки еритроцити. Счетоводството се извършва по същия начин, както в предишната версия. Вирусът се разпознава като идентичен с s-ke, ако RTGA достигне титър или 1/2 титър от стандартния s-ki. В допълнение към тази и други опции се поставят 3 контроли: s-ki, вирус, еритроцити. RTPGAобикновено се извършва за откриване на бактериални, гъбични, протозойни Ag (хаптени) в изследването. материал. Той е много чувствителен, специфичен, но отнема много време за настройка. RTPGA също се извършва на 2 етапа. На 1-ви етап до серия от двукратни разреждания на изследването. към Ag на материала се добавя равен (обикновено 0,25 ml) обем стандартен имунен s-ki, приет в работна доза. Епруветките се държат в термостат в продължение на 2 ч. При наличие на съответния Ag в материала се осъществява свързване на Ab и с последващо добавяне на еритроцитен диагностикум в редица епруветки (и в зависимост от количеството на Ag), аглутинацията на сенсибилизираните еритроцити се инхибира. Опитът е придружен от контроли с-ки, еритроцити и материал.

(Източник: Речник на термините по микробиология)

• - инхибиране на аглутинацията на Ag от хомоложни Abs в резултат на предварителен контакт на Abs с изследван Ag, обикновено с хаптичен характер Въз основа на конкуренцията на Ag за паратопа на Ab...

  Речник по микробиология

• - процесът на залепване на еритроцити с вирусна суспензия. Използват се за обозначаване на вируси в околната среда ...

  Речник по микробиология

• - 1) процесът на слепване на еритроцити, сенсибилизирани от чужд Ag или хаптени с хомоложни At...

  Речник по микробиология

• - част от издънката, от пъпките на която не се образуват странични издънки ...

  Анатомия и морфология на растенията

• - ...

  Енциклопедия на технологиите

• е температурата Т0 на изоентропично забавения газ. Той играе важна роля в движението на идеален перфектен газ...

  Енциклопедия на технологиите

• - параметри на изоентропично забавен газ: плътност на застояване 0, температура на застой T0, общо налягане p0, енталпия на стагнация H. Те играят важна роля в движението на идеален газ и...

  Енциклопедия на технологиите

• - една от характеристиките на високоскоростен газов поток, равен на температурата на този газ, изоентропично забавен до нулева скорост ...

  Голям енциклопедичен политехнически речник

• - показател за ефективността на противотуморно лекарство, изчислен като съотношението на средната маса на туморите в контролната група животни в края на експеримента към средната маса на туморите в групата животни, подложени на лечение ...

  Голям медицински речник

• - ограничаване на по-рано излъчвано инхибиране от определена група неврони ...

  Голям медицински речник

• - метод за откриване и идентификация на вируси, базиран на способността на някои вируси да селективно аглутинират еритроцитите на определени видове животни...

  Голям медицински речник

• - метод за откриване и идентифициране на антигени или антитела, базиран на феномена на аглутинация на еритроцитите, който се случва в тяхно присъствие, на чиято повърхност се намира съответните ...

  Голям медицински речник

• - виж Реакция на непряка хемаглутинация...

  Голям медицински речник

• - метод за идентифициране на вирус или откриване на антивирусни антитела в кръвния серум на пациента, базиран на явлението отсъствие на аглутинация на еритроцитите от препарат, съдържащ вирус в присъствието на имунен срещу него ...

  Голям медицински речник

• - метод за оценка на клетъчния имунитет или сенсибилизация от забавен тип, който открива неспецифичен фактор, произведен от активирани лимфоцити, който инхибира миграцията на макрофагите под ...

  Голям медицински речник

• - "... Меки спирачни уловители - уловители, съдържащи еластичен елемент, чиято деформация определя големината на силата, действаща върху спирачния орган ..." Източник: Указ на Госгортехнадзор на Руската федерация от 16 май ...

  Официална терминология

"Реакция на инхибиране на хемаглутинацията" в книги

Някои видове спиране