Diagnosticul lichidului sinovial. Studiul lichidului sinovial. Examenul bacteriologic al lichidului sinovial

Studiul clinic general (analiza) fluidului din articulație include determinarea proprietăților fizico-chimice ale fluidului și examinarea microscopică a elementelor celulare.

Caracteristicile macroscopice ale lichidului sinovial (culoare, grad de turbiditate și vâscozitate) sunt evaluate în lumină transmisă. Vâscozitatea este estimată prin lungimea filamentului de mucină: lungimea filamentului format dintr-o picătură eliberată din seringă ar trebui să fie în mod normal mai mare de 3 cm.Odată cu inflamația, vâscozitatea scade, respectiv lungimea filamentului scade.

Manipularea se efectuează în poziția șezând a pacientului cu brațul coborât de-a lungul corpului și culcat pe genunchi. Acul se introduce din față, capătul său este îndreptat oarecum în jos și lateral, spre procesul coracoid al scapulei; acul este avansat înapoi spre suprafata articulara omoplati. De asemenea, este posibil să se pună articulația umărului prin accesul din spate.

Pacientul flectează brațul la articulația cotului la un unghi de 60°, încheietura mâinii este în poziție pronată. Punctul de injectare a acului este situat pe suprafața laterală a articulației, între epicondilul lateral humerus iar raza.

Articulația genunchiului și pungile ei periarticulare pot fi perforate în poziția pacientului pe spate, cu articulatia genunchiului membru inferior. Un ac, de obicei de 0,8 mm în diametru, este introdus din partea laterală chiar sub marginea caudală a rotulei. Alternativ, este posibil să se introducă acul din partea medială, de asemenea, sub marginea caudală a rotulei.

Caracteristicile macroscopice permit în multe cazuri să se facă distincția între efuziunile neinflamatorii, inflamatorii și infecțioase. În plus, poate exista sânge în lichidul articular. Tipul de efuziune sugerează o boală specifică. Așa-numitele revărsări neinflamatorii corespund de fapt proceselor patologice caracterizate prin inflamații ușoare până la moderate, cum ar fi osteoartrita.

Studiile de laborator ale fluidului intraarticular includ numărarea celulelor și evaluarea compoziției lor calitative, examinarea microbiologică (dacă se suspectează un proces infecțios), precum și examinarea microscopică a medicamentului nativ pentru a identifica diferite celule și cristale. Cu toate acestea, alegerea unui studiu specific depinde de diagnosticul propus.

Valori de referință (normale) lichidului sinovial

Studiul lichidului sinovial joacă rol importantîn elucidarea naturii procesului în articulația afectată.

Indicații pentru puncția articulară: monoartrita de etiologie necunoscută, disconfortîn articulația afectată (cu un diagnostic stabilit), necesitatea de a monitoriza eficacitatea tratamentului pentru artrita infecțioasă, pentru a diagnostic diferentiat artrita și artroza, deoarece alegerea unui program pentru examinarea ulterioară și tratamentul pacientului depinde de aceasta.

Analiza lichidului sinovial- studiul de laborator al efuziunii acumulate în cavitatea articulară. Se numește procedura de luare a lichidului articular pentru analiză.

Articulația este construită din două (sau mai multe) oase acoperite în punctul de contact cu cartilajul. În exterior, este învelit într-o pungă sinovială puternică și strânsă, întărită cu ligamente și tendoane. Interiorul sacului sinovial este căptușit cu celule care produc lichid sinovial. lichid sinovial umple toate cavitățile și fisurile din articulație.

Datorită articulațiilor, corpul se poate mișca ca întreg, iar fluidul articular conferă netezime mișcărilor.

Analiza lichidului articular/sinovial t la fel de important în diagnosticul bolilor articulațiilor, precum și un test general de urină pentru a detecta patologia renală sau un test general de sânge în diagnosticul anemiei.

Lichidul sinovial este

sinoviale sau articulare lichid sau sinovială- Acesta este un fluid vâscos non-newtonian, situat în cavitatea tuturor articulațiilor. Este asemănător ca consistență cu albușul de ou (de unde și numele latinesc), dar compoziție chimică similar cu plasma.

Lichidul articular este de 20 de ori mai gros decât sângele!

Compoziţie

• fibroblastele din sinoviale produc hialuronic acid, (cantitate totală 3-4 mg/l)
• lubricina(proteoglican 4) - unge si faciliteaza alunecarea suprafetelor articulare
• lichid interstițial - plasmă sanguină filtrată
• enzime - proteinaze și colagenaze
• proteine ​​– unele provin din sânge, altele sunt sintetizate direct de membrana sinovială
• , și alte componente
• celule - numărul minim și, unic pentru a elimina microbii și celulele îmbătrânite ale membranei sinoviale în procesul de uzură a articulațiilor

Funcții

lichid articular este un lubrifiant plutitor între cartilajul din articulație. Devine mai dens cu mișcarea activă și mai subțire în repaus. Absoarbe și reduce forța de impact atunci când alergați și săriți. Furnizează nutrienți cartilajului și elimină produsele metabolice.

Răspunde rapid la toate modificările articulației, acționând ca un indicator al procesului patologic.

Indicatii

Examenul de laborator al lichidului articular este necesar pentru diagnosticarea bolilor articulare de origine necunoscuta, in special pentru diagnosticul diferential al artritei septice si gutoase, monoartritei acute.

Simptome-indicații pentru puncția articulară și analiza lichidului sinovial:

• efuziune articulară
• şchiopătură acută sau cronică
• brațul sau piciorul nu îndeplinește funcția de sprijin din cauza durerii la nivelul articulației
• combinație cu febră, deformare articulară, roșeață și umflare
• semnificativ

Artrocenteza

Artrocenteza sau străpungere comun- aceasta este o procedură de îndepărtare a lichidului din cavitatea articulară pentru analize ulterioare de laborator sau în scopul tratamentului - reducerea tensiunii și durerii, administrarea de medicamente.

Artrocenteză cu artrografie - se injectează un agent de contrast în articulație și se iau o serie de raze X. Una dintre opțiunile pentru utilizarea de diagnosticare a artrocentezei. Înlocuit de CT și RMN mai informativ.

Artrocenteza practic nu are contraindicații. Obstacol relativ în calea puncției - infecția pielii la locul viitoarei puncție, sângerare continuă în articulație, general stare gravă. H de cele mai multe ori articulatia genunchiului este intepata, apoi, pe masura ce scade, sunt intepate articulatiile umar, cot, incheietura mainii, glezna, temporomandibulare.

Nu este necesară o pregătire specială. Este recomandabil să vă abțineți de la mâncare cu 8-10 ore înainte de procedură.

Înainte de puncția articulației, este necesar să informați medicul despre prezența unei alergii la oricare medicamentele, mai ales anestezice localeși iod. Atunci când luați medicamente pentru subțierea sângelui (aspirina, clopidogrel, warfarină), acestea ar putea trebui să fie anulate timp de câteva zile înainte de manipulare. Dacă este necesar, pre-do, analiză și.

Performanţă

Pielea de la locul viitoarei puncție este dezinfectată și anesteziată. Medicul introduce un ac mare de puncție prin piele și membrana sinovială în cavitatea articulației.Lichidul articular este aspirat într-o seringă sterilă.

Procedura durează câteva minute, după care se aplică un bandaj sub presiune pe locul puncției.

Seringa cu lichid sinovial este trimisă imediat la laborator pentru analiză. Mai rar, acestea sunt turnate într-o eprubetă cu un agent antiplachetar (heparină).

Dacă intenționați să studiați glucoza în lichidul sinovial, atunci se prelevează o probă de sânge înainte de artrocenteză pentru a determina nivelul glicemiei.

Complicații

• infecția articulară este extrem de rară, riscul este mai mare în cazul puncțiilor repetate
• sângerare în articulație
• durere, afectarea cartilajelor sau a nervilor, ligament rupt

Lichidul sinovial este normal

Există foarte puțin lichid sinovial. În articulația genunchiului de la 0,5 la 4 ml, iar în articulația umărului - până la 3 ml. Este galben deschis, transparent, vascos, fara impuritati.

Ce cercetează ei?

• proprietăți fizice- cantitate, culoare, transparență, vâscozitate, pH (aciditate)
• parametrii chimici- glucoza, acid uric,
• microscopia unui frotiu colorat- cantitate totală, lichid sinovial, celule atipice
• microscopie într-un microscop polarizant- pentru a detecta cristale
• Microscopie cu frotiu GramȘi însămânțare bacteriană pe medii nutritive - pentru a identifica agentul patogen și a determina sensibilitatea acestuia la antibiotice

Formarea unui cheag de mucină în acid acetic nu este testată. Testul nu este informativ.

În plus, complementul, enzimele, imunoglobulinele, hormonii sunt examinați în lichidul articular.

Factorii de complement sunt crescuți în artrita reumatoidă și lupusul eritematos sistemic.

Proprietăți fizice

Lichidul sinovial normal transparent, culoare pai deschis. Când este inflamată, capătă diverse nuanțe de galben și verde tulbure. Culoarea alb murdar este caracteristică artropatiei induse de cristale. Roșu, maro și portocaliu indică sângerare în articulație a diferitelor prescripții, care se întâmplă cu o încălcare a coagulării sângelui, traumatisme, neoplasme, artrită tuberculoasă, tratament cu anticoagulante.

Cu cât inflamația este mai activă în articulație, cu atât mai puțină transparență.

Pentru determinare viscozitate acul este scufundat într-o picătură de lichid sinovial și îndepărtat. În mod normal, lungimea firului format este mai mare de 5 cm, iar în cazul inflamației, este mai mică de 5 cm.

Vâscozitatea rămâne în limitele normale în artrita traumatică, lupusul eritematos sistemic, osteoartrita și sinovita vilonodular pigmentată. Scăderea febrei reumatice acute, a artritei reumatoide, a gutei, a artritei piogene și tuberculoase.

corpuri de orez- aceasta este o membrana articulara distrusa, acoperita cu cheaguri de fibrina, se intampla cu artrita reumatoida.

Lichidul sinovial se coagulează dacă conține, care a căzut în timpul unei puncție sau unei leziuni anterioare. Cheagurile interferează cu numărarea celulelor, astfel încât lichidul articular este turnat într-o eprubetă cu heparină.

pH-ul (aciditatea) scade odată cu inflamația.

Analiza chimica

Lichidul sinovial sănătos nu conține proteine cu o greutate moleculară mare (fibrinogen, alfa și beta-2-macroglobuline), iar cantitatea totală de proteine ​​este de 10-30 g/l (sau o treime din nivelul din sânge).

Cauze ale cresterii proteinelor: boala Bechterew, artrita, artropatia in boala Crohn si colita ulcerativa, guta, artrita psoriazica, sindromul Reiter.

Evaluează nivelul glucozăîn sinovia este posibil numai dacă există date despre concentrația sa în sânge. Din acest motiv, artrocenteza se efectuează în vid, după prelevarea unei probe de sânge.

Lichidul sinovial normal conține 0,5 mmol/l mai puțină glucoză decât sângele. Bolile infecțioase ale articulațiilor reduc glucoza cu 1,1-5,5 mmol/l comparativ cu sângele.

Nivel acid uric in lichidul sinovial 356-475 µmol/l, creste cu guta.

Acidul lactic (lactat) este rar examinat, în mod normal până la 2,7 mmol/l, iar în artrita septică se ridică la 55,5 mmol/l.

lactat dehidrogeraza (LDH) este crescută în poliartrita reumatoidă, artrita infecțioasă, guta.

Microscopie

La vizualizarea unui frotiu la microscop, se numără numărul și tipul de celule și cristale din fluidul articular.

Disponibilitate cristaleîn fluidul articular se verifică la microscop polarizant. În mod normal, nu sunt.

Tipuri de cristale în lichidul sinovial în boli

• urat de sodiu - guta
• pirofosfat de calciu - pseudoguta
• corticosteroizi - după injecții de steroizi în cavitatea articulară
• colesterol - osteoartrita si artrita reumatoida
• hidroxiapatita - periartrita calcifianta, osteoartrita, artrita inflamatorie

Cercetare microbiologică

Lichidul sinovial Bakposev se efectuează imediat după luarea materialului.

Interpretarea rezultatelor

Rezultatele testelor de lichid sinovial sunt grupate după cum urmează:

• normal- toți indicatorii sunt în intervalul normal
• inflamator
• nu inflamator
• septic
• hemoragic

Lichidul sinovial neinflamator

• osteoartrita și bolile degenerative ale articulațiilor
• artrita traumatica
• gută cronică sau pseudogută
• sclerodermie
• polimiozită
• lupus eritematos sistemic
• eritem nodular
• artropatia neuropatică (articulația Charcot), cum ar fi diabetul zaharat
• anemia celulelor secera
• hemocromatoza
• acromegalie
• amiloidoza

Lichid inflamator articular

• artrita reumatoida
• artrita reactiva
• artrita psoriazica
• febră reumatică acută
• gută acută sau pseudogută
• sclerodermie
• polimiozită
• lupus eritematos sistemic
• spondilită anchilozantă
• boala inflamatorie intestinala
• virale, fungice, infectie cu bacterii articulație, boala Lyme
• atac acut de gută

Modificări septice

• infecție bacteriană purulentă
• artrită septică

Lichidul articular hemoragic

• rănire
• tumori
• hemofilie și alte coagulopatii - sângerare crescută din cauza deficienței unuia dintre factorii de coagulare
• deficit sever de vitamina C (scorbut)
• Sindromul Ehlers-Danlos
• artropatie neuropatică

Puncția articulară și analiza lichidului sinovial a fost modificat ultima dată: 1 decembrie 2017 de către Maria Bodyan

3.5.1 Cerințe pentru o probă de lichid sinovial pentru examinarea microscopică.

Înainte de a efectua o examinare microscopică, medicul trebuie să aibă informații despre momentul obținerii lichidului sinovial și rezultatele evaluării proprietăților fizico-chimice.

În prezent, pentru prelevarea fluidelor biologice sunt produse eprubete cu vid care conțin un anticoagulant (K 2 EDTA), care este, de asemenea, un conservant pentru elementele celulare și nu afectează morfologia acestora.

Nota 1─ Lichidul sinovial stabilizat cu K 2 EDTA nu poate fi utilizat pentru detectarea ragocitelor.

Există trei tipuri de examinare microscopică:

numărarea celulelor în lichidul sinovial nativ din camera Goryaev (citoză), examinarea preparatului nativ și a preparatului colorat cu azur-eozină cu calculul sinoviocitogramei.

3.5.2 Numărarea numărului de elemente celulare în 1 µl de lichid sinovial în camera Goryaev (determinarea citozei).

Progresul cercetării.:

Studiul este realizat în lichidul sinovial K 2 EDTA nativ sau stabilizat.

Se toarnă 0,4 ml de soluție izotonă sau hipotonă de NaCl într-o eprubetă.

Folosind un prelevator de probe sau o micropipetă, adăugați 20 µl de SF (diluție 1:20).

Amestecați ușor conținutul eprubetei, fără spumă.

Calculul se face după formula: , unde

A este numărul de elemente celulare din 40 de pătrate mari ale camerei Goryaev;

250 - 1/250 - volumul unui pătrat mare al camerei;

20 - gradul de diluție al SF.

Formula finala:

Dacă microscopia unui preparat nativ de SF arată că celulele acoperă toate câmpurile vizuale sau SF are o vâscozitate ridicată, este necesară o diluție de 1: 200 (4 ml soluție izotonă sau hipotonă de NaCl și 20 µl din SF investigat).

Pentru a dilua SF, se folosește o soluție izotonă de NaCI 0,9% (150 mmol/l). Dacă este necesară lizarea eritrocitelor în SF, se utilizează o soluție hipotonică de NaCI 0,3% (50 mmol/l).

Soluțiile izotonice și hipotonice de NaCl pot fi colorate cu 3% albastru de metilen sau violet de metil.

Când este diluat de 200 de ori, calculul final se efectuează conform formulei: X \u003d A 1250

În SF normal, numărul de celule variază și este de 0,1-0,5 x109/l.

Notă ─ În patologia articulară, citoza crește, indicând o creștere a procesului inflamator. În bolile degenerative și artrita post-traumatică, citoza în SF este de 2 - 2,5x10 9 /l. La boli inflamatorii articulatiilor (RA, .ReA, spondilita anchilozanta, artrita psoriazica, guta, pseudoguta) citoza variaza de la 3 la 75x10 9 /l, cu artrita septica depaseste 80x10 9 /l.

3.5.3 Prepararea preparatelor native și colorate pentru examinarea microscopică.

Laboratorul trebuie să aprobe procedura de preparare a lichidului sinovial și prepararea preparatelor native și colorate cu azur-eozină pentru examinarea microscopică și procedura de efectuare a acestor examinări microscopice. Fiecare angajat trebuie să efectueze toate etapele analizei în același mod, să evalueze elementele celulare și cristalele detectate prin microscopie folosind aceleași criterii de identificare.

Preparatele pentru examinarea microscopică (native și colorate) pot fi preparate atât direct din SF fără centrifugare, cât și din sedimentul obținut prin centrifugarea probei SF (de exemplu, pentru determinarea cristalelor).

Dacă fluidul este tulbure cu vâscozitate scăzută, acesta poate fi aplicat direct pe o lamă de sticlă.

Pentru a pregăti un preparat nativ, se aplică o picătură de SF pe o lamă de sticlă și se acoperă cu o lametă.

Un frotiu pentru colorarea ulterioară este pregătit în același mod ca și un frotiu de sânge: o picătură de SF este aplicată pe marginea unei lame de sticlă, marginea lustruită a unui alt pahar (sau a unei spatule de plastic) la un unghi de 45 ◦ aliniază scăpați cu paharul, apoi cu o mișcare rapidă cu o ușoară apăsare pentru a preveni distrugerea celulelor, întindeți peste pahar, fără a ajunge la marginea paharului cu 1 - 1,5 cm.

Pentru a obține o concentrație mai mare de celule într-un preparat microscopic, se poate folosi preparatul cu frotiu cu picături groase. O picătură mare (groasă) de SF este aplicată pe sticlă, care este întinsă peste ea de sticlă lustruită încet și fără presiune.

O creștere a concentrației de celule poate fi realizată și prin centrifugarea SF și obținerea unui sediment concentrat.

Fluidul transparent sau translucid, indiferent de vâscozitate, este recomandat a fi centrifugat.

Lichidul sinovial este plasat într-un tub de centrifugă.

Se centrifugă timp de 10 minute la 1000 rpm. la 5-7 ◦ C. Cu ajutorul unei pipete Pasteur, lichidul sinovial supernatant (supernatant) este aspirat și rămâne doar sedimentul. Sedimentul se amestecă ușor cu aceeași pipetă fără spumă.

1 picătură de sediment (aproximativ 40 µl) se transferă cu aceeași pipetă Pasteur (cu un balon și un capăt subțire trasat) pe o lamă de sticlă și se acoperă cu o lamă (preparat nativ). Lamela trebuie să acopere picătura de sediment complet fără bule.

Apoi se prepară un frotiu din acest sediment pentru colorare cu azur-eozină. Celulele din sediment sunt concentrate, ceea ce cu siguranță facilitează microscopia și calculul procentului de celule individuale. Cu toate acestea, această metodă are dezavantaje semnificative: în cele mai blânde condiții de centrifugare, structura unor celule sinoviale poate avea de suferit, precum și ruperea lor.

Cu un volum mic de lichid sinovial, de exemplu, lichidul se află doar în acul de puncție, conținutul acului este suflat cu un piston de seringă pe o lamă de sticlă și se face un frotiu din această picătură sau se acoperă mai întâi cu o lamă. iar medicamentul nativ este examinat la imersie. Apoi lama este îndepărtată, materialul este distribuit cu grijă peste lama de sticlă, uscat, fixat și colorat cu azur-eozină.

Dacă picătura SF este vâscoasă și groasă, diluarea se face pe aceeași lamă de sticlă,

adăugând 2-4 picături de soluție fiziologică la o picătură de SF, după care

amestecați cu grijă o picătură de SF cu picături de soluție salină cu un colț de spatulă de plastic sau lame de sticlă, aplicați o picătură de SF diluat pe o altă lamă de sticlă, împrăștiind-o pe lățimea suprafeței lustruite a spatulei sau a sticlei șlefuite, faceți un se unge cu o mișcare ușoară astfel încât să ocupe 2/3 din diapozitiv.

Indiferent dacă tamponul este pregătit din lichid întreg sau din sediment, frotiul trebuie să fie uniform și să se încheie cu o perie.

Se folosesc metode obișnuite de fixare și colorare a frotiurilor, similare cu cele utilizate în studiile hematologice: frotiurile preparate sunt uscate la aer fără încălzire, apoi fixate conform metodei May-Grunwald, colorate după metoda Romanovsky-Giemsa sau o modificare. a acestei metode; Metoda Pappenheim este considerată cea mai sensibilă și specifică pentru determinarea compoziției celulare a SF. (vezi GOST R Studii citologice ale punctului de măduvă osoasă).

Standardizarea prepararii preparatelor din lichidul sinovial permite obtinerea de rezultate comparabile ale examenului microscopic in diferite laboratoare.

3.5.4. Examinarea microscopică a unui preparat nativ de lichid sinovial.

Studiul medicamentului începe cu o creștere mică (aprox. x 7, 10 sau x 20, v. x 10) pentru o prezentare generală și un studiu mai detaliat al medicamentului la mărire mare (aprox. x10 și v. x40). Pentru detectarea fiabilă a ragocitelor în preparatul nativ, se recomandă utilizarea microscopiei cu contrast de fază sau examinarea preparatului cu imersie. Se recomandă utilizarea unui microscop polarizant pentru a identifica cristalele.

Într-un preparat nativ, cu o mărire de x70, x100 sau x200, vă puteți face doar o idee aproximativă despre leucocite, puteți detecta eritrocite și elemente celulare tisulare. La mărirea x400, elementele celulare enumerate sunt văzute mai clar. Când microscopia la aceste măriri, este convenabil să ridicați condensatorul până la oprire și să închideți diafragma cât mai mult posibil. Acest mod de operare oferă o mai mare claritate a elementelor celulare native.

Eritrocitele care conțin hemoglobină, la mărire x400, au o formă asemănătoare cu lentilele dublu concave roz-gălbui. Acestea sunt globule roșii nemodificate; își păstrează forma și hemoglobina datorită pH-ului lichidului sinovial, care variază de la 7,0 la 8,5. Eritrocitele intră în lichidul sinovial în timpul leziunilor articulare sau în timpul puncției.

Leucocitele în inflamația articulațiilor sunt reprezentate în lichidul sinovial de neutrofile. Neutrofilele sunt celule rotunde regulate, incolore sau cenușii, cu granulație fină. Uneori (în condiții alergice) eozinofilele pot fi găsite în lichidul sinovial, care diferă de neutrofile prin granularitatea lor uniformă, sferică, gălbuie caracteristică, dar leucocitele din preparatele native nu trebuie diferențiate.

ragocite.

Ragocitele sunt macrofage care conțin în citoplasmă granule care refractează lumina, a căror dimensiune este mai mare decât dimensiunea granularității intracelulare din citoplasma acestor celule. Aceste granule pot fi incolore, verzui sau negre, in functie de refractia luminii care trece prin ele. Dimensiunea granulelor variază de la 0,20 la 0,33 µm. Datorită acestor granule, dimensiunea ragocitelor este puțin mai mare decât neutrofilele, monocitele și macrofagele care nu conțin această granularitate. Aceste granule conțin complexe imune, care includ factorul reumatoid, precum și imunoglobulinele și factorul antinucleolar.

Detectarea și numărarea ragocitelor se efectuează în nativ preparare folosind microscopie cu contrast de fază sau imersie.

Pe lamelă se aplică o picătură de ulei de imersie, care acoperă preparatul nativ, și se instalează o lentilă de imersie, obținându-se o mărire de x900 sau x1000. Numără 100 de elemente celulare (leucocite, ragocite și celule tisulare) și notează câte procente dintre ele sunt ragocite

NOTA 1 In artrita reumatoida, numarul de ragocite poate ajunge la 50% din compozitia celulara.

cristale

In mod normal, SF nu contine cristale, acestea se gasesc cand diverse boli articulațiilor.

Pentru a identifica majoritatea cristalelor din SL, metoda microscopiei polarizante este utilizată la o mărire de 300 - 500.

Cristalele sunt numărate în întregul preparat nativ SF.

Cristalele de monourat de sodiu (C 5 H 3 NaN 4 O 3) au formă de ac sau fâșii, 2–30 μm lungime, au birefringență puternică, se disting clar în preparatul nativ și se disting ușor de alte cristale. Într-un microscop polarizant, cristalele asemănătoare unor ac sunt clar vizibile pe un fundal negru ca „scântei albe”.

Aceste cristale se găsesc adesea intracelular în neutrofile și macrofage.

NOTA 2 Cristalele de monourat de sodiu sunt tipice gutei.

pirofosfat de calciu

Pirofosfat de calciu - pirofosfat de calciu dihidrat sau dihidropirofosfat de calciu (CaPPD) Ca 2 P 2 O 7 2H 2 O. Aceste cristale sunt sub formă de dreptunghiuri scurte sau lungi în formă de fâșii sau romburi cu capete contondente de 2–10 μm și au dimensiuni slabe. birefringență, sunt solubile în soluție de EDTA 10%.

Nota 3 - Aceste cristale din lichidul sinovial se gasesc in condrocalcinoza si artropatia pirofosfatica.

Hidroxiapatită

Hidroxiapatită - Ca 5 (PO 4) 3 OH. - cristalele sunt foarte mici, practic imposibil de distins la mărire normală fie la microscoape ușoare, fie la microscoape polarizante. Într-un microscop polarizant, pot fi detectate doar drusele acestor cristale cu o dimensiune de 5-20 µm. Într-un microscop cu contrast de fază, cristalele de hidroxiapatită se găsesc în interiorul leucocitelor polimorfonucleare (neutrofile) și extracelular, sub formă de discuri ușoare cu un diametru de 2-3 microni.

Aceste cristale pot fi detectate după culoarea lor roșu strălucitor când se utilizează roșu alizarin.

Metoda de colorare cu roșu alizarina.

Reactivi: soluție apoasă 2% de roșu alizarina, pH 4,2 (pH ajustat cu hidroxid de amoniu).

Se filtrează suspensia și se păstrează la frigider într-o sticlă de sticlă închisă la culoare. Imediat înainte de studiu, se filtrează cantitatea necesară de colorant printr-un filtru millipore.

Se amestecă 20 µl de colorant cu un volum egal de SF sau sediment obținut după centrifugare. Este mai bine să pregătiți un preparat nativ și microscopic într-un microscop polarizant: cristale în formă de ovoid, 2-3 microni în diametru, de culoare roșie saturată cu un halou roz.

NOTA 4 Aceste cristale se găsesc în artropatia cu hidroxiapatită.

În lichidul sinovial se găsesc și cristale de oxalat de calciu, colesterol, lipide, Charcot-Leiden etc.

NOTA 5 Cristalele de oxalat de calciu (C 2 CaO 4  H 2 O) au de obicei o formă cubică, dar pot forma cristale incolore, lucioase, foarte refractive de diferite dimensiuni sub formă de octaedre sau dreptunghiuri de formă poștală. Uneori există cristale de oxalat de calciu, rotunjite și interceptate, asemănătoare cu o clepsidră, greutăți de gimnastică sau arcuri (C 2 CaO 4  2H 2 O). Aceste cristale pot fi fagocitate de către leucocite polimorfonucleare (neutrofile).

NOTA 6 Cristalele lichide ale lipidelor sunt prezentate în câmp întunecat ca cruci malteze negre care împart fiecare picătură de lipide în patru segmente albe strălucitoare. Picăturile de grăsime neutră nu au efectul de refracție cu două fascicule a luminii.

Colesterolul, oxalatul de sodiu și cristalele lipide lichide nu sunt specifice unei anumite boli articulare și pot apărea într-o varietate de artropatii, reflectând o tulburare metabolică.

NOTA 7 Aglomerări de amiloid pot fi găsite în SF. Acestea sunt formațiuni incolore de formă rotunjită, o structură stratificată, care seamănă cu o tăietură de ferăstrău a unui copac, cu o strălucire caracteristică. Ele sunt identificate în preparate native la mărire x400, precum și cu imersie la mărire x1000. Amiloidul poate fi detectat în SF nativ colorat cu roșu Congo. Preparatul rezultat poate fi vizualizat atât la microscop luminos, cât și la un microscop polarizant.

Nodulii de amiloid se gasesc in bolile asociate cu artropatia amiloida.

Cristale de hematoidină.

Cristalele de hematoidină sunt formate prin descompunerea hemoglobinei în hematoame fără oxigen. Acestea sunt diamante ușor alungite și/sau ace galbene aurii. Cristalele de hematoidină se disting bine atât în ​​preparatele native, cât și în preparatele colorate cu azur-eozină. Deoarece aceste cristale sunt de obicei destul de mici în SF, se recomandă examinarea microscopică a preparatelor native prin imersie. În focarul inflamației, aceste cristale pot fi fagocitate de macrofage sau situate pe suprafața elementelor celulare.

NOTA 8 În caz de traumatism și sângerare intraarticulară, se creează condiții în cavitatea articulară sub care se pot forma cristale de hematoidină.
Cristale Charcot-Leiden.

Cristalele Charcot-Leyden au forma unui ac de busolă sau a unui diamant puternic alungit în lungime. De obicei, cristalele Charcot-Leiden sunt situate pe fundalul detritusului sau în combinație cu un număr mare de eozinofile și se formează în timpul descompunerii eozinofilelor din granularitatea eozinofilă, aceste cristale pot fi găsite în SF al pacienților care suferă de sinovită alergică.
Cristale medicinale

Steroizi. Injecțiile intraarticulare de medicamente steroizi duc la cristalizarea acestora în interiorul articulațiilor, unde pot persista până la 10 săptămâni. Detectarea acestor cristale în timpul examinării microscopice a preparatelor native și diferențierea incorectă ulterioară poate duce la concluzii eronate.
Elemente necelulare și necristaline în SF.

Fragmente de cartilaj și ligamente deteriorate pot fi găsite în SF. Fragmentele de cartilaj din preparatul nativ pot fi recunoscute după strălucirea lor mătăsoasă caracteristică. Se găsesc și fragmente de cartilaj care conțin grupuri de condrocite și fragmente de menisc, care sunt reprezentate de fibre ondulate de colagen și de asemenea condrocite; fragmentele de ligamente sunt reprezentate de fibrile lungi și subțiri și fire paralele de colagen

NOTA 9 Apare cel mai frecvent în SF după leziuni la genunchi.

NOTA 10 În ciuda sensibilității ridicate a metodei de microscopie de polarizare, sunt posibile erori grave la utilizarea acesteia, care apar de obicei din cauza rezoluției insuficiente a unui anumit microscop, a prezenței impurităților asemănătoare cristalelor străine și a deteriorării lamei sau a lamei. . Microscopistul trebuie să fie conștient de posibilitatea de interferență și să fie familiarizat cu principiile recunoașterii cristalelor.

3.5.5. Examinarea microscopică a preparatelor din lichid sinovial colorate cu azur-eozină (cu sinoviocitogramă de numărare).

Pregătirea frotiurilor SF și metodele de colorare a acestora (secțiunea 5.5.2).

Compoziția celulară a lichidului sinovial (sinoviocitograma).

Determinarea compoziției celulare a SF este cea mai importantă etapă a studiului său, care permite clarificarea diagnosticului, determinarea gradului de activitate inflamatorie a procesului și prognosticul. Determinarea distribuției cantitative a celulelor (sinoviocitograma) este cel mai important indicator pentru diagnosticul diferențial al bolilor articulare. Calculul procentului de celule se efectuează în același mod ca și calculul formulei de sânge leucocitar. (Se numără 100 de celule dintr-un frotiu și se calculează procentul fiecărui tip de celulă).

În mod normal, celulele de origine tisulară (sinoviocite și histiocite) predomină în SF - până la 65%. Limfocitele reprezintă aproximativ 30%, iar monocitele și neutrofilele - 1-2%.

Celulele sanguine din SF.

Neutrofile (leucocite polimorfonucleare).

Neutrofilele sunt de 1,5-2 ori mai mari decât un eritrocit, în diametru (14-16 microni). Raportul dintre nucleu și citoplasmă este deplasat către nucleu. Citoplasma este de culoare liliac, umplută cu granularitate fină, prăfuită, care are culoarea nucleului celular. Nucleii sunt formați din 3-4 segmente, cu o diviziune clară în oxicromatină și bazicromatină. Cu distrofie, numărul de segmente în neutrofile crește brusc la 5-7 (hipersegmentare). În timpul apoptozei în neutrofil, fragmentele de nucleu se contopesc în una sau două mase hipercromice omogene, fără structură, cu forma rotundă corectă.

În SF normal, numărul de neutrofile nu depășește 1-2% în formulă.

NOTA 1 În artrita reumatoidă, numărul de neutrofile ajunge la 90%, iar numărul de limfocite scade la 10%. O imagine similară se observă în spondilita anchilozantă. În bolile inflamatorii și sângerările intra-articulare, neutrofilele reprezintă 60-80% în formula SF și mai mult de 95% în artropatia septică.

Limfocite.

Aceste celule au un diametru de până la 12 microni. Raportul dintre citoplasmă și nucleu este deplasat către nucleu (9:1). Nucleul are o structură aproximativ aglomerată, citoplasma bazofilă înconjoară nucleul cu o margine îngustă, uneori este vizibilă o zonă de iluminare în jurul nucleului.

În SF normal, numărul de limfocite variază de la 8 la 30%.

NOTA 2 În bolile inflamatorii predomină neutrofilele, în timp ce în bolile degenerative predomină limfocitele. Cu boli degenerative ale articulațiilor și artrită traumatică în SF, conținutul de limfocite ajunge la 85%. Limfocitele predomină în formulă și în sinovita toxico-alergică și forma sinovială a tuberculozei. Cu artrita de etiologie virală, de exemplu, cauzată de virusul HTLV-1, apar limfocite atipice, al căror număr ajunge la 20%.

Monocite.

NOTA 3 Monocitele se găsesc în diferite artropatii articulare, inclusiv în artrita virală și artrita monocitară, precum și în deteriorarea protezelor implantare.

Pe lângă aceste celule din SF (în patologie), alte celule sanguine pot fi detectate în cantitate mică: eozinofile, bazofile, plasmocite.

Nota 4 - Eozinofilele sunt extrem de rare în SF, identice cu eozinofilele din sângele periferic.

Nota 5 - Bazofilele se gasesc in numar mic in artrita inflamatorie, artropatiile seronegative, artropatiile neinflamatorii asociate cu traumatisme.

NOTA 6 Celulele plasmatice se găsesc în SF în artropatiile inflamatorii. Detectarea celulelor plasmatice este caracteristică, în special, pentru artrita reumatoida, adică pentru un proces inflamator curent lung, lent.

Celulele tisulare din SF.

sinoviocitelor.

Aceste celule aparțin epiteliului aplatizat cu un singur strat care acoperă membranele sinoviale ale articulațiilor. În morfologia lor, ele sunt identice cu celulele mezoteliale. Sinoviacite - celule epiteliale cu un diametru de 18-25 microni, cu un raport nuclear/citoplasmatic diferit. Conțin nuclei localizați central sau excentric, de formă rotundă sau ovală, cu structură mică-buloasă sau buclă, înconjurate de o margine largă de citoplasmă bazofilă, uneori cu un „volan” de-a lungul periferiei. Citoplasma din zona perinucleara a unor sinoviocite contine boabe fine. Sinoviocitele sunt smulse de pe suprafața membranei sinoviale a articulației și se găsesc în SF în artropatii. Celulele sinoviale pot conține 2 sau mai mulți nuclei (multinucleare).

Există trei tipuri de sinoviocite:

tip A - sinoviocite macrofage capabile de fagocitoză;

tip B – fibroblaste sinoviale capabile de sinteza si secretie acid hialuronic;

tip AB - forme de tranziție ale celulelor care combină aceste două proprietăți.

Histiocite.

Macrofagele tisulare sunt celule cu dimensiunea de 18-20-25 microni cu un nucleu compact rotunjit sau monocitoid înconjurat de citoplasmă cu granulație fină sau negranulară.

NOTA 7 Histiocitele sunt întotdeauna prezente în SF în timpul proceselor inflamatorii.

NOTA 8 Celulele multinucleate pot fi găsite în SF, care sunt sinoviocite sau plasmocite și au aceeași semnificație ca și variantele mononucleare ale acestor celule.

NOTA 9 Detectarea celulelor LE care conțin incluziuni de material nuclear omogenizat în citoplasmă din SF, spre deosebire de sângele periferic, nu este o indicație directă a LES. Cu toate acestea, combinația de celule LE cu un număr mare de limfocite în SF face posibilă suspectarea prezenței LES la un pacient.

NOTA 10 - Celule în mitoză.

Cifrele mitotice nu au valoare diagnostică. Sinoviocitele aflate în stare de diviziune confirmă procesul de proliferare a celulelor care căptușesc punga articulară.
celule nediferențiate.

Celulele nediferențiate sunt observate în aproape toate sinoviogramele.

În frotiurile subțiri, bine făcute de SF, fixate cu fixative sau fixative colorante și colorate cu azur-eozină, toate elementele celulare sunt susceptibile de diferențiere. Numai în frotiurile groase preparate de o mână neexperimentată a unui asistent de laborator din SF vâscos, hipercelular și nediluat anterior, se întâlnesc celule care nu pot fi diferențiate. Poate fi orice element celular - atât țesut, cât și sânge. Este aproape imposibil să se detecteze cristale și microorganisme în astfel de preparate.

4292 0

Lichidul sinovial joacă un rol excepțional în funcționarea articulațiilor și tendoanelor. Formarea sa provine constant din substanțe plasmatice și produse ale celulelor epiteliului tegumentar al formațiunilor sinoviale. Cantitatea de SF în diferite articulații este diferită.

La o persoană sănătoasă, SF are o culoare galben deschis, este transparent, foarte vâscos și steril. Până la 1/3 din compoziția sa sunt proteine, nu există fibrină în ea, dar există acid glucuronic sub formă de complex cu proteine ​​(mucină). SF normal conține celule ale epiteliului tegumentar al sinoviului și leucocite, dintre care numărul de limfocite ajunge la 75%, puține neutrofile - 0-25%, sinoviacite - 0-12%.

Patologia articulară emergentă duce la o reacție aproape instantanee a membranei sinoviale, care modifică semnificativ compoziția SF. Pentru unele tipuri de patologie se pot distinge abateri foarte caracteristice, care este folosit ca un criteriu important de diagnostic diferenţial. Obținerea SF pentru studii vizuale și de laborator este posibilă numai cu ajutorul unei puncție a formațiunii articulare sau sinoviale și cu artroscopie.

După primirea lichidului în vrac este evaluat după numărul, culoarea, transparența, densitatea cheagului de mucină, vâscozitatea, citoza totală. Dacă este necesar, se efectuează căutarea cristalelor în lumină polarizată, bacterioscopie cu colorație Gram și cultură microbiologică.

Proprietățile fizice ale SF în condiții normale și în principalele procese reumatoide sunt prezentate în tabel. unsprezece.

Tabelul 11. Proprietățile fizice ale lichidului sinovial (Nasonova V.A., Bunchuk N.V., 1997)

Tabelul 12. Semne vizuale și de laborator ale SF în diferite boli

Conținutul formațiunii sinoviale poate fi sânge, care se observă în timpul traumei, precum și puroi.

Culoarea SF în condiții normale și în bolile neinflamatorii ale articulațiilor este galben deschis, pai. În bolile inflamatorii, poate fi lămâie, chihlimbar, verzui, gri, maro, galben lăptos, alb, roz.

Transparenţă. SF normal este transparent; în bolile neinflamatorii, poate fi și transparent sau translucid; în bolile inflamatorii, poate fi moderat sau intens tulbure.

Viscozitate. Poate fi determinat vizual prin vâscozitate atunci când este turnat dintr-o seringă într-o eprubetă sau după lungimea firului de mucină pe o lamă de sticlă. Pentru a face acest lucru, se aplică 1-2 picături de puictat pe sticlă și se trag în lateral cu o tijă de sticlă. Există 3 grade de vâscozitate: scăzut, când lungimea firului este de 1 cm, mediu - până la 5 cm, înalt - lungimea firului este mai mare de 5 cm. Fluidul normal are o vâscozitate ridicată. Vâscozitatea SF este determinată de concentrația și gradul de polimerizare a acidului hialuronic conținut în acesta. Vâscozitatea scade în timpul proceselor inflamatorii datorită scăderii concentrației în lichid și depolimerizării acidului hialuronic.

Testul mucinei. Când acidul acetic este adăugat la SF normal, se formează un cheag de mucină sau un precipitat în acesta. Dacă există o boală inflamatorie, atunci cheagul va fi de dimensiuni mai mici, friabil sau moderat friabil.

Un amestec de sânge. Sângele în SF apare când leziuni traumatice formațiuni articulare și alte sinoviale, cu leziuni articulare la pacienții cu hemofilie, cu artrită foarte acută de orice geneză, cu sinovită villesonodular pigmentată. Amestecul de sânge în SF din sinoviale deteriorate cu un ac de perforare este rar și numai cu manipulări aspre.

Citoza. Numărul total de celule din SF este numărat într-o cameră de numărare. Compoziția celulară în SF normal este reprezentată de celulele stratului tegumentar al membranei sinoviale și leucocite. În mod normal, numărul de leucocite poate fi în intervalul 200-600 per mm3. Cu inflamație ușoară, ajunge la 2000 mm3, cu inflamație severă - de la 2000 la 75.000 mm3, cu artrită septică - mai mult de 100.000 mm3. În mod normal, limfocitele predomină în SF, neutrofilele nu sunt mai mari de 25%.

Acest lucru se întâmplă și în procesele neinflamatorii. Cu sinovita, numărul de neutrofile polimorfonucleare crește brusc (până la 90%).

ragocite. Aceste elemente celulare sunt absente în SF normal. În bolile inflamatorii și spondiloartrita seronegativă, numărul acestora este de 2-15% din numărul total de celule, iar în poliartrita reumatoidă pot fi de până la 40% sau mai mult, în funcție de severitatea activității inflamatorii locale.

proteine ​​totale. În mod normal, SF conține 15-20 g/l de proteine. Cu artrita neinflamatoare, cantitatea acesteia crește la 22-37 g/l, cu artrita inflamatorie - până la 35-48 g/l, iar cu poliartrită reumatoidă și sinovita cristalină, poate fi de până la 70 g/l.

Factorul reumatoid și proteina C reactivă. În norma Federației Ruse, SF nu este conținut, iar cantitatea de SRV nu este mai mare de 0,001 g / l. În bolile neinflamatorii ale articulațiilor și spondiloartrita seronegativă, RF nu este detectată sau detectată într-un titru de 1/20-1/40 în artrita seronegativă, titrul său depășește 1/40. Bolile inflamatorii ale articulațiilor sunt însoțite de o creștere a CRV de la 0,01 la 0,06 g/l sau mai mult.

Cristale. Acestea sunt examinate cu ajutorul microscopiei polarizante. Numai cristalele de urat și pirofosfat de calciu sunt identificate în mod fiabil.

IN ABSENTA. Reutsky, V.F. Marinin, A.V. Glotov

Tehnologie analitică standardizată pentru analiza clinică de laborator a lichidului sinovial.

1. Scopul studiului

Tehnologia „Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial” este efectuată pentru a diagnostica bolile articulațiilor, precum și pentru a monitoriza evoluția bolii și eficacitatea tratamentului.

Studiul lichidului sinovial are mare importanță la:

Toți angajații trebuie să respecte instrucțiunile și reglementările de siguranță prevăzute în fișele tehnice pentru aparatele electrice utilizate în tehnologie (fotometre, microscoape, centrifuge); personalul care lucrează cu reactivi trebuie să fie instruit în manipularea acestora, să folosească echipament individual de protecție și să respecte regulile de igienă personală.

Pentru prevenirea incendiilor este necesar să se respecte regulile de securitate la incendiu în conformitate cu reglementările în vigoare.

Astfel, este necesar să se respecte cu strictețe toate punctele instrucțiunilor de siguranță, siguranță la incendiu și siguranță biologică.

2.3 Condiții de implementare a tehnologiei de analiză clinică de laborator a lichidului sinovial și scop funcțional

Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial se efectuează în laboratoarele de diagnostic clinic ale unităților medicale de specialitate ambulatoriu și internat (centre de reumatologie și artrologie).

Scopul funcțional al serviciului: efectuat în scopul diagnosticării bolilor articulațiilor, monitorizării cursului și progresiei bolii și eficacității tratamentului.

2.4.Resurse materiale necesare implementarii tehnologiei: instrumente, instrumente de masura, echipamente de laborator

2.4.1. Microscop binocular cu imersie și iluminator încorporat.

2.4.2 Microscop polarizant.

2.4.3. Centrifuga de laborator (cu racire: 5-8 °C).

Peletele de lichid sinovial trebuie preparate cu centrifuge care funcționează la 1000 rpm. Când utilizați o centrifugă, trebuie respectate cu strictețe instrucțiunile producătorului.

2.4.4. Contracalculator pentru calcularea formulei sanguine leucocitelor (pentru calcularea citogramelor sinoviale).

2.4.5. Stand pentru eprubete.

2.4.6. Recipiente și cuve pentru colorarea și fixarea frotiurilor.

2.4.7. Dispozitiv pentru uscarea frotiurilor.

2.4.8. Produse din sticla (plastic).

2.4.8.1. Tuburi de centrifuga (10 ml).

Pentru studiul macroscopic al SF, este mai bine să folosiți tuburi de sticlă transparente. Pentru centrifugarea SF se folosesc tuburi de centrifuga din plastic, care ar trebui sa aiba forma conica pentru a concentra sedimentul, gradatie pentru a determina cantitatea de lichid sinovial obtinuta in timpul punctiei articulatiei si inchise cu capace pentru a reduce riscul de stropire. Tuburile trebuie să fie curate chimic și etichetate pentru identificarea corectă a pacientului. Este posibilă utilizarea eprubetelor cu vid.

2.4.8.2. Camera lui Goryaev.

2.4.8.3. Lamele și lamele pentru microscopia preparatului nativ.

Sticlă obiect (de preferință cu câmp mată pentru marcare, dimensiune 26 x 76 x 1,1 mm.) pentru microscopia preparatului colorat.

Lamă de sticlă cu margine șlefuită (dimensiune 26 x 76 x1,1 mm.) sau o spatulă de plastic pentru pregătirea unui frotiu.

2.4.8.4. Pipete pentru transferul lichidului sinovial. Pipetele Pasteur din plastic cu vârf fin și cu un balon sunt utilizate în prezent pentru a standardiza volumul picăturii de peleți și pentru a reduce riscul de riscuri biologice asociate cu resuspendarea sau transferul lichidului sinovial. Acestea trebuie să fie uscate și curate chimic.

2.4.8.5 Tije de sticlă.

2.5 Reactivi

2.5.1 Soluții de fixatori de coloranți și alți reactivi necesari pentru prepararea frotiurilor colorate (vezi GOST R Examinarea citologică a punctatului de măduvă osoasă);

2.5.2 soluție de acid acetic 5%;

2.5.3 EDTA (sare dicalcică sau disodică).

2.5.4. soluție roșu alizarina 2%.

2.6 Alte consumabile

2.6.1. Manusi de cauciuc.

2.6.2. Dezinfectante.

3. Caracteristicile tehnicii de realizare a tehnologiei pentru studiul lichidului sinovial

3.1 Obținerea de probe de lichid sinovial

Pentru desfășurarea corectă a etapei preanalitice, este necesar să se respecte cerințele standardului GOST R 53079.4-2008. .

Puncția articulației este efectuată de un clinician.

Regulile pentru depozitarea și transportul probelor de lichid sinovial sunt stabilite în

Anexa A.

La perforarea articulației, SF este colectat în tuburi de centrifugă sterile (2-3 sau mai multe, în funcție de cantitatea de SF obținută) și imediat transferat în laboratorul de diagnostic clinic. Unul dintre tuburi (sau mai multe, în funcție de numărul de tuburi primite) este trimis la laboratorul de microbiologie (departamentul) pentru studii microbiologice, iar restul sunt folosite pentru a efectua un studiu clinic de laborator al SF (determinarea proprietăților fizico-chimice și examenul microscopic). de preparate native și colorate cu azur-eozină cu numărare sinoviocitogramă, numărarea elementelor celulare în 1 μl (citoză), precum și efectuarea de studii biochimice și imunologice. Studiile biochimice și imunologice sunt efectuate în supernatant după centrifugarea SF, iar precipitatul este utilizat pentru a căuta cristale în preparatul nativ folosind un microscop polarizant, precum și pentru numărarea sinoviocitogramei într-un frotiu colorat. Pentru a număra celulele, puteți colecta SF într-o eprubetă care conține un anticoagulant (EDTA disodic sau dipotasic), special Sunt disponibile tuburi de vid cu K2EDTA, care pot fi folosite pentru a lua SF.

Dacă există indicații adecvate (suspiciune de prezență a celulelor neoplasmatice), frotiul colorat este trimis la laboratorul de citologie.

3.2 Identificarea probei

Următoarele informații trebuie incluse în trimiterea pentru cercetare: numele și parafa pacientului, vârsta sau data nașterii, sexul, secția instituției medicale și secția (în spital), numărul de fișă medicală (numărul de identificare), diagnosticul, data și ora recoltării probei de lichid sinovial, ora predării probei la laborator. Ar trebui enumerați toți indicatorii care trebuie definiți. Dacă este necesar, indicați medicamentele injectate în articulația perforată.

Probele neetichetate sau etichetate greșit nu sunt adecvate pentru testare și trebuie notificate clinicianului care a comandat testul.

3.3 Acceptarea mostrei

Deoarece acuratețea rezultatelor testului lichidului sinovial depinde în mare măsură de calitatea probei livrate, este necesar să se respecte cu strictețe regulile de depozitare și transport a lichidului sinovial (Anexa A).

După ce proba de lichid sinovial este predată la laborator, angajatul laboratorului care primește materialul trebuie să verifice corectitudinea trimiterii pentru analiză, etichetarea vaselor (codul sau prenumele pacientului și celelalte date trebuie să fie identice cu datele indicate în formular de trimitere) și înregistrați materialul primit.

Lichidul sinovial colectat într-un tub cu K2 EDTA trebuie, de asemenea, examinat în 30 de minute, iar atunci când este păstrat la frigider (temperatura 3-50C) - nu mai târziu de 24 de ore (numai pentru examinarea frotiurilor colorate).

Notă ─ Depozitarea pe termen lung a supernatantului SF este permisă la -70°C pentru studii biochimice și imunologice.

Amânarea analizei și utilizarea răcirii probei sunt notate pe foaia de răspuns.

Probele trebuie aduse la temperatura camerei înainte de testare.

3.4 Evaluarea macroscopică și examinarea proprietăților fizico-chimice ale lichidului sinovial

3.4.1 Cantitatea de lichid sinovial variază în mod normal de la 0,2 la 2,0 ml (în funcție de dimensiunea articulației). În diferite boli ale articulațiilor, cantitatea de SF poate ajunge la 100 ml sau mai mult.

3.4.2. Culoarea lichidului sinovial.

Culoarea lichidului sinovial este normală - galben deschis

NOTĂ Lichidul sinovial galben deschis sau galben este observat în bolile degenerative ale articulațiilor; sângeroase - cu artrită traumatică; pentru boli inflamatorii ale articulațiilor (artrita reumatoidă (AR), artrită reactivă (ReA), spondilită anchilozantă, artrită psoriazică), diferite nuanțe de galben și culoarea maro(galben deschis, galben, lămâie, maro deschis, maro, chihlimbar sau portocaliu); cu gută se observă o culoare galben deschis, galben-verzui, alb-lăptos, galben-lăptos, alb-roz a SF; cu artrită pirofosfatică și condrocalcinoză - galbenă sau galbenă lăptoasă, cu artrită septică - galben-cenușiu, galben-verzui sau sângeroasă.

3.4.3. transparența lichidului sinovial.

Lichidul sinovial normal este complet transparent. Turbiditatea se datorează de obicei creșterii numărului de elemente celulare, prezenței cristalelor sau microorganismelor.

Scorul de transparență.

Există 4 grade de transparență: transparent, translucid, moderat tulbure și intens tulbure.

Notă - în bolile degenerative ale articulațiilor (osteoartroză), SF este transparent și translucid; în boli inflamatorii (AR, artrită seronegativă, gută, artrită pirofosfatică) - translucide, moderat tulbure sau intens tulbure; cu artrită septică – intens tulbure, groasă.

3.4.4. Prezența sedimentului.

În mod normal, nu există sedimente în SF. Apare numai în patologie și, de regulă, sunt fragmente de membrane celulare, filamente de fibrină, fragmente de țesut rezultate din distrugerea cartilajului și membranei sinoviale, precum și cristale.

N o t e ─ În bolile degenerative ale articulațiilor, un precipitat amorf se găsește în SF în amiloidoză. În bolile inflamatorii ale articulațiilor, sedimentul se găsește aproape întotdeauna. În SF al pacienților cu RA, mai ales la copiii cu RA juvenilă, se poate observa un sediment granular asemănător boabelor de orez sau „corpi de orez” format din fragmente microscopice de membrană sinovială necrotică saturată de fibrină. Un astfel de precipitat poate fi un indicator al activității inflamatorii ridicate a procesului.

3.4.5. Viscozitate

Cea mai importantă caracteristică a SF, care îl deosebește de alte fluide biologice, este prezența acidului hialuronic, un polimer cu greutate moleculară mare. Este acidul hialuronic, avand o vascozitate mare, care asigura in principal indeplinirea principalelor functii ale SF. Există o relație directă între conținutul, greutatea moleculară a acidului hialuronic și vâscozitatea fluidului.

Metode de determinare a vâscozității.

Caracteristicile cantitative ale vâscozității fluidului sunt determinate cu ajutorul unui viscozimetru.

În studiile de rutină, metoda baghetei de sticlă este de obicei utilizată:

tija de sticlă este coborâtă în SF și apoi îndepărtată. Vâscozitatea este estimată prin lungimea firelor de mucină, există trei grade de vâscozitate:

cu o lungime a firului de peste 5 cm - vâscozitate mare, până la 5 cm - medie, mai puțin de 1 cm - scăzută.

Este posibilă exprimarea vâscozității în unități punctuale: 1 - mare, 2 - medie, 3 - scăzută. În mod normal, vâscozitatea fluidului este mare.

Intensitatea vâscozității depinde de concentrația cristalelor, de gradul de polimerizare a acidului hialuronic și de temperatură.

Notă ─ Utilizarea metodelor instrumentale care utilizează diverse viscozimetre necesită (în afară de disponibilitatea dispozitivului) o serie de operații suplimentare și, prin urmare, o investiție semnificativă de timp, fără a oferi informații fundamental noi în comparație cu testele de laborator disponibile.

4.4.6. Determinarea densității cheagului de mucină în lichidul sinovial.

Acidul hialuronic din SF există într-un complex cu proteine ​​cunoscute sub numele de mucină. Definiția cheagului de mucină are o mare valoare diagnostică în bolile inflamatorii. Testul pentru mucină în lichidul sinovial se corelează bine cu vâscozitatea.

Metode pentru studiul densității unui cheag de mucină.

Principiul metodei: atunci când acidul acetic este expus la SF, se formează un cheag de mucină.

Progresul definirii:

O picătură de SF se adaugă într-o eprubetă care conține 3 ml dintr-o soluție de acid acetic 5% (CH3COOH). Agitați energic conținutul tubului timp de 1 minut, se formează un precipitat. Există 4 grade de densitate a sedimentelor: dens (sedimentul arată ca un bulgăre dens), moderat dens (un fel de structură ramificată, dar nu ruptă), moderat liber și liber - mai mult sau mai puțin se descompune în particule minuscule. Formarea unui cheag dens de mucină indică un conținut semnificativ de mucină.

În mod normal, sedimentul este dens.

Nota 1 ─ În artropatiile neinflamatorii, cheagul de mucină este de obicei dens sau moderat dens.În bolile inflamatorii ale articulațiilor, moderat friabil și friabil.

NOTA 2 Determinarea vâscozității și a densității cheagului de mucină este esențială pentru diferențierea între procesele „neinflamatorii” și cele inflamatorii în articulație. Aceste metode se pot controla reciproc: indicatorii unei metode corespund strict cu cei ai celeilalte. Vâscozitatea ridicată corespunde unui cheag de mucin dens, mediu - până la moderat dens, scăzut - unui cheag de mucină moderat.

3.5 Examinarea microscopică a lichidului sinovial

3.5.1 Cerințe pentru o probă de lichid sinovial pentru examinarea microscopică.

Înainte de a efectua o examinare microscopică, medicul trebuie să aibă informații despre momentul obținerii lichidului sinovial și rezultatele evaluării proprietăților fizico-chimice.

În prezent, se produc tuburi vidate care conțin un anticoagulant (K2EDTA) pentru preluarea fluidelor biologice, care este, de asemenea, un conservant pentru elementele celulare și nu afectează morfologia acestora.

Nota 1─ Lichidul sinovial stabilizat cu K2EDTA nu poate fi utilizat pentru detectarea ragocitelor.

Există trei tipuri de examinare microscopică:

numărarea celulelor în lichidul sinovial nativ din camera Goryaev (citoză), examinarea preparatului nativ și a preparatului colorat cu azur-eozină cu calculul sinoviocitogramei.

3.5.2 Numărarea numărului de elemente celulare în 1 µl de lichid sinovial în camera Goryaev (determinarea citozei).

Progresul cercetării.:

Studiul este realizat în lichidul sinovial K2EDTA nativ sau stabilizat.

Se toarnă 0,4 ml de soluție izotonă sau hipotonă de NaCl într-o eprubetă.

Se filtrează suspensia și se păstrează la frigider într-o sticlă de sticlă închisă la culoare. Imediat înainte de studiu, se filtrează cantitatea necesară de colorant printr-un filtru millipore.

Se amestecă 20 µl de colorant cu un volum egal de SF sau sediment obținut după centrifugare. Este mai bine să pregătiți un preparat nativ și microscopic într-un microscop polarizant: cristale în formă de ovoid, 2-3 microni în diametru, de culoare roșie saturată cu un halou roz.

NOTA 4 Aceste cristale se găsesc în artropatia cu hidroxiapatită.

În lichidul sinovial se găsesc și cristale de oxalat de calciu, colesterol, lipide, Charcot-Leiden etc.

NOTA 5 Cristalele de oxalat de calciu (C2CaO4 H2O) au, de obicei, o formă cubică, dar pot forma cristale incolore, lucioase, foarte refractive, de diferite dimensiuni, sub formă de octaedre sau dreptunghiuri asemănătoare plicurilor poștale. Uneori există cristale de oxalat de calciu, rotunjite și interceptate, asemănătoare cu o clepsidră, greutăți de gimnastică sau arcuri (C2CaO4 2H2O). Aceste cristale pot fi fagocitate de către leucocite polimorfonucleare (neutrofile).

NOTA 6 Cristalele lichide ale lipidelor sunt prezentate în câmp întunecat ca cruci malteze negre care împart fiecare picătură de lipide în patru segmente albe strălucitoare. Picăturile de grăsime neutră nu au efectul de refracție cu două fascicule a luminii.

Colesterolul, oxalatul de sodiu și cristalele lipide lichide nu sunt specifice unei anumite boli articulare și pot apărea într-o varietate de artropatii, reflectând o tulburare metabolică.

NOTA 7 Aglomerări de amiloid pot fi găsite în SF. Acestea sunt formațiuni incolore de formă rotunjită, o structură stratificată, care seamănă cu o tăietură de ferăstrău a unui copac, cu o strălucire caracteristică. Ele sunt identificate în preparate native la mărire x400, precum și cu imersie la mărire x1000. Amiloidul poate fi detectat în SF nativ colorat cu roșu Congo. Preparatul rezultat poate fi vizualizat atât la microscop luminos, cât și la un microscop polarizant.

Nodulii de amiloid se gasesc in bolile asociate cu artropatia amiloida.

Cristale de hematoidină.

Cristalele de hematoidină sunt formate prin descompunerea hemoglobinei în hematoame fără oxigen. Acestea sunt diamante ușor alungite și/sau ace galbene aurii. Cristalele de hematoidină se disting bine atât în ​​preparatele native, cât și în preparatele colorate cu azur-eozină. Deoarece aceste cristale sunt de obicei destul de mici în SF, se recomandă examinarea microscopică a preparatelor native prin imersie. În focarul inflamației, aceste cristale pot fi fagocitate de macrofage sau situate pe suprafața elementelor celulare.

NOTA 8 În caz de traumatism și sângerare intraarticulară, se creează condiții în cavitatea articulară sub care se pot forma cristale de hematoidină.

Cristale Charcot-Leiden.

Cristalele Charcot-Leyden au forma unui ac de busolă sau a unui diamant puternic alungit în lungime. De obicei, cristalele Charcot-Leiden sunt situate pe fundalul detritusului sau în combinație cu un număr mare de eozinofile și se formează în timpul descompunerii eozinofilelor din granularitatea eozinofilă, aceste cristale pot fi găsite în SF al pacienților care suferă de sinovită alergică.

Cristale medicinale

Steroizi. Injecțiile intraarticulare de medicamente steroizi duc la cristalizarea acestora în interiorul articulațiilor, unde pot persista până la 10 săptămâni. Detectarea acestor cristale în timpul examinării microscopice a preparatelor native și diferențierea incorectă ulterioară poate duce la concluzii eronate.

Elemente necelulare și necristaline în SF.

Fragmente de cartilaj și ligamente deteriorate pot fi găsite în SF. Fragmentele de cartilaj din preparatul nativ pot fi recunoscute după strălucirea lor mătăsoasă caracteristică. Se găsesc și fragmente de cartilaj care conțin grupuri de condrocite și fragmente de menisc, care sunt reprezentate de fibre ondulate de colagen și de asemenea condrocite; fragmentele de ligamente sunt reprezentate de fibrile lungi și subțiri și fire paralele de colagen

NOTA 9 Apare cel mai frecvent în SF după leziuni la genunchi.

NOTA 10 În ciuda sensibilității ridicate a metodei de microscopie de polarizare, sunt posibile erori grave la utilizarea acesteia, care apar de obicei din cauza rezoluției insuficiente a unui anumit microscop, a prezenței impurităților asemănătoare cristalelor străine și a deteriorării lamei sau a lamei. . Microscopistul trebuie să fie conștient de posibilitatea de interferență și să fie familiarizat cu principiile recunoașterii cristalelor.

3.5.5. Examinarea microscopică a preparatelor din lichid sinovial colorate cu azur-eozină (cu sinoviocitogramă de numărare).

Pregătirea frotiurilor SF și metodele de colorare a acestora (secțiunea 5.5.2).

Compoziția celulară a lichidului sinovial (sinoviocitograma).

Determinarea compoziției celulare a SF este cea mai importantă etapă a studiului său, care permite clarificarea diagnosticului, determinarea gradului de activitate inflamatorie a procesului și prognosticul. Determinarea distribuției cantitative a celulelor (sinoviocitograma) este cel mai important indicator pentru diagnosticul diferențial al bolilor articulare. Calculul procentului de celule se efectuează în același mod ca și calculul formulei de sânge leucocitar. (Se numără 100 de celule dintr-un frotiu și se calculează procentul fiecărui tip de celulă).

În mod normal, celulele de origine tisulară (sinoviocite și histiocite) predomină în SF - până la 65%. Limfocitele reprezintă aproximativ 30%, iar monocitele și neutrofilele - 1-2%.

Celulele sanguine din SF.

Neutrofile (leucocite polimorfonucleare).

Neutrofilele sunt de 1,5-2 ori mai mari decât un eritrocit, în diametru (14-16 microni). Raportul dintre nucleu și citoplasmă este deplasat către nucleu. Citoplasma este de culoare liliac, umplută cu granularitate fină, prăfuită, care are culoarea nucleului celular. Nucleii sunt formați din 3-4 segmente, cu o diviziune clară în oxicromatină și bazicromatină. Cu distrofie, numărul de segmente în neutrofile crește brusc la 5-7 (hipersegmentare). În timpul apoptozei în neutrofil, fragmentele de nucleu se contopesc în una sau două mase hipercromice omogene, fără structură, cu forma rotundă corectă.

În SF normal, numărul de neutrofile nu depășește 1-2% în formulă.

NOTA 1 În artrita reumatoidă, numărul de neutrofile ajunge la 90%, iar numărul de limfocite scade la 10%. O imagine similară se observă în spondilita anchilozantă. În bolile inflamatorii și sângerările intra-articulare, neutrofilele reprezintă 60-80% în formula SF și mai mult de 95% în artropatia septică.

Limfocite.

Aceste celule au un diametru de până la 12 microni. Raportul dintre citoplasmă și nucleu este deplasat către nucleu (9:1). Nucleul are o structură aproximativ aglomerată, citoplasma bazofilă înconjoară nucleul cu o margine îngustă, uneori este vizibilă o zonă de iluminare în jurul nucleului.

În SF normal, numărul de limfocite variază de la 8 la 30%.

NOTA 2 În bolile inflamatorii predomină neutrofilele, în timp ce în bolile degenerative predomină limfocitele. Cu boli degenerative ale articulațiilor și artrită traumatică în SF, conținutul de limfocite ajunge la 85%. Limfocitele predomină în formulă și în sinovita toxico-alergică și forma sinovială a tuberculozei. Cu artrita de etiologie virală, de exemplu, cauzată de virusul HTLV-1, apar limfocite atipice, al căror număr ajunge la 20%.

Monocite.

NOTA 3 Monocitele se găsesc în diferite artropatii articulare, inclusiv în artrita virală și artrita monocitară, precum și în deteriorarea protezelor implantare.

Pe lângă aceste celule din SF (în patologie), alte celule sanguine pot fi detectate în cantitate mică: eozinofile, bazofile, plasmocite.

Nota 4 - Eozinofilele sunt extrem de rare în SF, identice cu eozinofilele din sângele periferic.

Nota 5 - Bazofilele se gasesc in numar mic in artrita inflamatorie, artropatiile seronegative, artropatiile neinflamatorii asociate cu traumatisme.

NOTA 6 Celulele plasmatice se găsesc în SF în artropatiile inflamatorii. Detectarea celulelor plasmatice este tipică, în special, pentru artrita reumatoidă, adică pentru un proces inflamator lung și lent.

Celulele tisulare din SF.

sinoviocitelor.

Aceste celule aparțin epiteliului aplatizat cu un singur strat care acoperă membranele sinoviale ale articulațiilor. În morfologia lor, ele sunt identice cu celulele mezoteliale. Sinoviacite - celule epiteliale cu un diametru de 18-25 microni, cu un raport nuclear/citoplasmatic diferit. Conțin nuclei localizați central sau excentric, de formă rotundă sau ovală, cu structură mică-buloasă sau buclă, înconjurate de o margine largă de citoplasmă bazofilă, uneori cu un „volan” de-a lungul periferiei. Citoplasma din zona perinucleara a unor sinoviocite contine boabe fine. Sinoviocitele sunt smulse de pe suprafața membranei sinoviale a articulației și se găsesc în SF în artropatii. Celulele sinoviale pot conține 2 sau mai mulți nuclei (multinucleare).

Există trei tipuri de sinoviocite:

tip A - sinoviocite macrofage capabile de fagocitoză;

tip B - fibroblaste sinoviale capabile să sintetizeze și să secrete acid hialuronic;

tip AB - forme de tranziție ale celulelor care combină aceste două proprietăți.

Histiocite.

Macrofagele tisulare sunt celule de dimensiunea micronului cu un nucleu compact rotunjit sau monocitoid înconjurat de citoplasmă cu granulație fină sau negranulară.

NOTA 7 Histiocitele sunt întotdeauna prezente în SF în timpul proceselor inflamatorii.

NOTA 8 Celulele multinucleate pot fi găsite în SF, care sunt sinoviocite sau plasmocite și au aceeași semnificație ca și variantele mononucleare ale acestor celule.

NOTA 9 Detectarea celulelor LE care conțin incluziuni de material nuclear omogenizat în citoplasmă din SF, spre deosebire de sângele periferic, nu este o indicație directă a LES. Cu toate acestea, combinația de celule LE cu un număr mare de limfocite în SF face posibilă suspectarea prezenței LES la un pacient.

NOTA 10 - Celule în mitoză.

Cifrele mitotice nu au valoare diagnostică. Sinoviocitele aflate în stare de diviziune confirmă procesul de proliferare a celulelor care căptușesc punga articulară.

celule nediferențiate.

Celulele nediferențiate sunt observate în aproape toate sinoviogramele.

În frotiurile subțiri, bine făcute de SF, fixate cu fixative sau fixative colorante și colorate cu azur-eozină, toate elementele celulare sunt susceptibile de diferențiere. Numai în frotiurile groase preparate de o mână neexperimentată a unui asistent de laborator din SF vâscos, hipercelular și nediluat anterior, se întâlnesc celule care nu pot fi diferențiate. Poate fi orice element celular - atât țesut, cât și sânge. Este aproape imposibil să se detecteze cristale și microorganisme în astfel de preparate.

4. Înregistrarea rezultatelor analizei lichidului sinovial

Fiecare angajat al laboratorului ar trebui să folosească aceleași formulare (forme de rezultate ale testelor) pentru a raporta rezultatele. Formularul trebuie să conțină numele laboratorului și organizatie medicala; informații despre pacient suficiente pentru a-l identifica; denumirea materialului biologic și toți parametrii studiați; data primirii probei și, dacă este cazul, ora primirii; rezultatele cercetării; intervale de referință; numele si semnatura angajatului care a efectuat studiul. Procedura de eliberare a rezultatelor ar trebui să fie determinată de instrucțiunea aprobată de șeful organizației medicale

5. Asigurarea calității performanței tehnologiei de analiză a fluidului sinovial

5.1. Programe de asigurare a calității

Programele de asigurare a calității includ monitorizarea consecventă a fiecărui aspect al procedurii pentru a asigura capacități suficiente de diagnostic și de urmărire a pacientului. Programele de asigurare a calității ar trebui să includă toate etapele de lucru și să stabilească legături între toate componentele procesului (pacient, laborator, clinician). Controlul este necesar și în etapele de prelevare, depozitare, livrare, prelucrare manuală, înregistrare și eliberare a documentelor. De asemenea, trebuie controlată competența tehnică a personalului, continuarea continuă a educației. Pentru implementarea cu succes a tuturor activităților de control, este necesar să se respecte regulile stabilite în standardul GOST R ISO 15189 -2006. .

5.2. Evidența măsurilor de control

Înregistrarea controlului trebuie efectuată la toate nivelurile: pre-analitic, analitic și post-analitic, pentru fiecare etapă trebuie elaborate și documentate reguli de desfășurare a tuturor procedurilor.

Ar trebui elaborat un formular de cerere de testare pentru medici, inclusiv data numirii și colectarea probelor, informații pentru identificarea pacientului, diagnostic, informații despre medicamente sau proceduri de diagnosticare, dacă acestea pot influența rezultatele studiului.

Tehnica de prelevare a probelor de SF ar trebui să fie standardizată și descrisă în detaliu în instrucțiunile relevante pentru medicii și asistentele secției de chirurgie care efectuează puncție articulară.

Instrucțiunile pentru livrarea probelor ar trebui să includă condițiile și termenii de depozitare a probelor și regulile de transport în siguranță.

Pentru personalul de laborator trebuie definite criteriile pentru acceptarea și refuzul probelor, cerințele pentru înregistrarea probei, prelucrarea, etichetarea și depozitarea probei înainte de analiză. Etapa analitică se desfășoară în conformitate cu metodele de cercetare. În etapa post-analitică, este necesar să se elaboreze reguli pentru evaluarea gradului de acceptabilitate a rezultatelor analizei, care ar trebui să includă o evaluare a interferenței medicamentului, compararea rezultatelor cu un interval de referință și verificarea acurateței înregistrării. Formularul de eliberare a rezultatelor trebuie să fie aprobat de instituție și convenit cu secțiile de tratament.

5.3. Instrucțiuni pentru metodele de laborator utilizate

Metodologia pentru procesul de efectuare a cercetării de laborator ar trebui să fie documentată și să fie disponibilă la locul de muncă. Metodologia ar trebui să se bazeze pe ghiduri sau alte documente aprobate în modul prescris. Ar trebui să includă criterii pentru acceptarea sau respingerea probelor de SF (ținând cont de durata perioadei de păstrare a probei după prelevare, o cantitate suficientă de SF pentru cercetare); intervale de referință; metoda de înregistrare a rezultatelor; precauții legate de pericolul biologic al materialului de testat; motivele rezultatelor fals pozitive și fals negative.

5.4. Controlul calității examinărilor microscopice.

La elaborarea cerințelor pentru fiabilitatea analitică a unei metode vizuale, rezultatele unui studiu al probelor de biomateriale produse de un cercetător cu experiență vastă în examinarea vizuală a imaginilor, detectarea corectă și clasificarea componentelor studiate ale biomaterialelor ar trebui să fie utilizate ca ghid.

5.5. Formarea continuă a specialiștilor

Pentru a asigura calitatea analizei, calificările personalului ar trebui să fie adecvate complexității studiului efectuat. Tot personalul de laborator trebuie să urmeze periodic (o dată la cinci ani) pregătire în cicluri de perfecționare, care sunt conduse de instituțiile de învățământ medical care dețin licența corespunzătoare. Fiecare specialist trebuie să se angajeze în autoeducare. Laboratorul ar trebui să aibă la dispoziție literatură actualizată pentru utilizare, inclusiv periodice despre diagnostice de laborator și atlase. Specialiștii de laborator trebuie să participe la conferințe și seminarii.

6. Cerințe pentru regimul de muncă și odihnă, alimentație și restricții în pregătirea pacientului

Pentru personalul care efectuează prelevarea, trebuie elaborată o instrucțiune care să cuprindă, pe lângă procedura de prelevare, condițiile de pregătire a pacientului. Influența medicamentelor este deosebit de importantă, de exemplu, introducerea hormonilor steroizi în articulație, care se pot cristaliza (Anexa A.2).

7. Costuri cu forța de muncă pentru implementarea tehnologiei de analiză clinică de laborator a lichidului sinovial

Tabel 1 - Costuri cu forța de muncă în UET pentru implementarea tehnologiei „Analiza clinică de laborator a lichidului sinovial”

ANEXA A

(referinţă)

Colectarea probelor SF, condițiile de depozitare și livrare (etapa preanalitică)

A.1 Introducere

Puncția articulară este efectuată de medici.

Etapa preanalitică se desfășoară în secția medicală și, după livrarea biomaterialului la laborator, în laboratorul propriu-zis. Clinicienii pregătesc aplicații pentru cercetare. Cererea trebuie să indice numele complet al pacientului, sexul, vârsta sau anul nașterii, modalitatea de obținere a biomaterialului, articulația care urmează să fie perforată, momentul puncției, numărul de tuburi umplute cu SF, nativ și cu K2 EDTA. Trebuie indicate diagnosticul clinic și medicamentele care afectează analiza. Absența în ordinea diagnosticului sau a medicamentelor luate de pacient care afectează rezultatele poate duce la interpretarea incorectă a rezultatelor și la o eroare în diagnostic. Personalul de asistenta al sectiei este responsabil de pregatirea pacientului, livrarea urgenta a eprubetelor cu SF la laboratorul de diagnostic clinic.

Continuarea etapei preanalitice în laborator constă în primirea și înregistrarea biomaterialului intrat, depozitarea, dacă este cazul, până la studiu, prelucrare și pregătire pentru studiu.

Pregătirea cererilor de teste de către clinicieni este foarte punct important, deoarece corectitudinea diagnosticului depinde în mare măsură de aplicarea corectă.

A.2 Pregătirea pacientului

Pregătirea pacientului pentru puncția articulară trebuie standardizată.

Steroizii injectați în capsula articulară se pot cristaliza și interfera cu diagnosticul procesului patologic sau pot duce la un diagnostic greșit, astfel încât injecția intraarticulară de steroizi trebuie anulată cu cel puțin 5-7 zile înainte de puncția articulară. Dacă introducerea steroizilor în punga articulară nu poate fi anulată în avans, medicul trebuie să noteze introducerea acestor medicamente în cererea pentru studiu. În aplicație, pe lângă datele pașaportului pacientului, trebuie menționat ce articulație a fost perforată, numărul de tuburi umplute cu SF, momentul puncției și diagnosticul clinic trebuie indicat, cel puțin la nivelul unui diagnostic. presupunere.

A.3 Depozitare și livrare.

Pentru analiza generala SF este de obicei livrat la laborator imediat după puncție. Se efectuează un studiu al unui preparat nativ preparat din SF nestabilizat pentru a detecta ragocite și cristale, precum și pentru a determina citoza. Un frotiu colorat poate fi studiat prin păstrarea unei eprubete cu SF stabilizat cu K2 EDTA într-un frigider la o temperatură de +3-+50C timp de 24 de ore.

Depozitarea pe termen lung a SF este permisă la o temperatură de -70 ° C; aceste probe sunt utilizate pentru studii biochimice și imunologice.

N o t e ─ În prezent, tuburi speciale vid și recipiente de unică folosință pentru colectarea fluidelor biologice de 100 ml sunt produse din material indestructibil fără reactivi, cu K2EDTA sau alte directive.

Bibliografie

1.Zakharova lichid sinovial. În: Reumatologie. Ghiduri naționale. Ed. Academician al Academiei Ruse de Științe Medicale și Academician al Academiei Ruse de Științe Medicale. M., „GEOTAR-Media”, 2008, p. 62-66.

2.Instrucțiuni privind măsurile de prevenire a răspândirii boli infecțioase când lucra în laboratoarele de diagnostic clinic ale instituțiilor medicale, Moscova, 1991.

3. Reguli pentru colectarea, depozitarea și eliminarea deșeurilor din instituțiile medicale. SanPiN 2.1.1.728-99., Moscova, 1999

4. GOST R ISO 52095 -2:2003) Cerințe de siguranță.

5. GOST R 53079.4-2008 Tehnologii de laborator medical. Asigurarea calitatii cercetarii clinice de laborator. Partea 4 Reguli pentru efectuarea etapei preanalitice a studiilor clinice de laborator.

6. GOST R ISO 15189 -2006 Laboratoare medicale. Cerințe speciale de calitate și competență.

Proiectul de tehnologie standardizată a fost elaborat de:

, (MMA numit după I.M. Sechenov), (Institutul de Cercetare de Reumatologie al Academiei Ruse de Științe Medicale), (RMAPO), (RCSC numit după Academia Rusă de Științe Medicale), (policlinica nr. 000 din Moscova).